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1.
本研究旨在探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先,用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii(Cyt-Tra)]、Ii CLIP (class Ⅱ-associated invariant chain peptide)-三聚体区[Ii(CLIP-TRIM)]和Ii突变体[Ii(M81-87aa)、Ii(M91-99aa)和Ii(M81-99aa)]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次,将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T,观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化,最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明,成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii(Cyt-Tra)及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位,而Ii(CLIP-TRIM)与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域,而不是CLIP与三聚体区。综上所述,鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区,而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制,为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。 相似文献
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审判中心主义自提出以来即被赋予了很高的期待,理论界和实务界都希望通过此次改革来提升当下诉讼存在的诸多弊端。由于审判中心主义概念具有很强的伸缩性和纵深性,学界对此争论不休,实务界也存在诸多困惑。本文希望通过对基本概念的理清,为审判中心主义的实施打下良好的基础 相似文献
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[目的]为了加深对金丝楸(Catalpa bungei C. A. Mey.)优良无性系资源遗传背景的认识,[方法]本研究运用荧光扩增片段长度多态性(AFLP)技术,筛选10对Eco RⅠ+3/MseⅠ+3引物组合,以梓树属的梓树(C.ovata G. Don)、灰楸(C. fargesii Bur.)、光叶楸和‘豫楸1号’良种为对照,在基因组水平上检测定植于河南省洛宁县的75个金丝楸无性系的遗传变异。[结果]总体水平上,在获得的1 177条可统计条带中,1 130条呈多态性,多态性带百分率(PPBs)达96.01%;不同位点的有效等位基因数为1.00~1.99,平均为1.48±0.03;基因多样度为0.00~0.49,平均为0.28±0.01;Shannon信息指数为0.00~0.69,平均为0.43±0.02。当遗传相似系数为0.827 7时可将供试样品分为8组,其中,71个无性系聚为一组,显示出金丝楸无性系遗传背景较狭窄。各无性系的遗传距离和地理距离呈极显著正相关,表明地理隔离对楸树遗传多样性有明显的影响。结合聚类分析结果,金丝楸无性系当中的63号与其他遗传距离最远,值得重点保护和推广。[结论]形态学性状观察和AFLP分子标记分析显示:金丝楸与普通楸树存在较显著的差异,因此,认为金丝楸的分类地位宜做更加深入的探讨。 相似文献
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奶牛围产期是指产前三周(产前21天)至产后两周(产后15天)的时期,这一阶段由于奶牛的免疫力下降。而且组织内的矿物质浓度要求必须稳定在很窄的适宜范围内。因而各种传染性和代谢疾病(如产褥热、胎衣不下、子宫炎、真胃移位、乳房炎等)主要发生在这一时期,不同的调查结果显示。在美国5%~7%的牛只发生产褥热(Jordan和Fourdraine,1993),产奶量降低14%,产奶寿命减少3.4年(Block,1984),66%的奶牛产后患有亚临床型低钙血症(Beede,et,al,1992),每年给美国奶牛养殖业带来1.4亿美元的损失。我国高产牛群中27%以上的奶牛患有产褥热,82%以上的经产奶牛产后患有亚临床型低钙血症,所以为保持奶牛在围产期的健康以期获得理想的生产效益。围产期奶牛的营养及管理改变了以往产前低钙产后高钙的传统饲养理念。实验研究表明,当只有低钙日粮每天提供的钙不超过15克时对预防产褥热才具有非常明显的效果(Goings等,1974),而在现实生产中含钙量如此低的日粮营养师是很难或不可能配制出来的。 相似文献
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天峨县岜暮乡板花村林场始建于60年代,经营面积1700亩,有林面积1200亩。近几年来,林场年收入均超5万元。有了收入,村里不是忙于搞分配,而是用来为群众办实事。1993年投资两万余元安装村部附近三个自然的引水工程,使62户喝上清洁卫生的自来水。 相似文献