用酶标A蛋白法诊断兔脑胞内原虫病

我们已报道了兔脑胞内原虫病(Encephalitozoonnosis)的病理形态特征,但是用病理组织学方法诊断该病,多属于死后标本的回顾性检查。国外已有用免疫血清学诊断活体脑胞内原虫感染的报告,国内尚无     

从药敏试验的结果观察鸡大肠杆菌病的耐药性

鸡大肠杆菌病是由埃希氏大肠杆菌为原发性或继发性病原的传染病,该病属于条件性疾病,在一些饲养管理、卫生防疫条件较差的鸡场和专业户的鸡群中,几乎都有发生。由于饲料中添加抗菌药物种类的增多和滥用抗菌药物的现象比较普遍,以致鸡大肠杆菌的耐药菌株日益增多,一旦发病按常规的抗大肠杆菌药物进行治疗往往无效,不仅给控制和治疗该病造成困难,而且还加剧了该病对养鸡业的危害。我们以鸡大肠杆菌病病鸡的23批次(每批次2—4只病鸡),病料为肝、脾等脏器,用青霉素、链霉素、庆大毒素、卡那霉素、氯霉素、红霉素、四环素、土霉素、痢特灵、氨基苄和氟哌酸等11种     

用间接血凝试验等方法普查广州地区牛锥虫病

分别用间凝试验的血纸法和血清法作对比,用间凝试验与炭素凝集试验、血液病原检查等方法作对比的结果证明,间凝试验血纸法与血清法完全一致,血纸法比血清法更简便;间凝试验检查牛锥虫病方法简便,检出率高,结果可靠。介绍了健康牛与锥虫病牛、药物治疗前后血红蛋白及红血球数的变化,以及药物治疗后不同日期的凝集抗体消长规律。     

猪瘟病毒E2蛋白与猪RACK1相互作用的鉴定

为筛选和鉴定与猪瘟病毒(CSFV)E2蛋白相互作用的猪宿主蛋白,我们采用酵母双杂交方法筛选猪肺泡巨噬细胞表达文库得到与CSFV E2蛋白相互作用的宿主细胞RACK1蛋白,经共转化试验和GST pull-down试验进一步证实两者可以特异性结合,并且共聚焦试验表明两者共定位于细胞的细胞浆。本研究显示E2蛋白与宿主细胞RACK1蛋白存在相互作用,RACK1在CSFV感染过程中所发挥的功能有待进一步研究。     

新疆“十二·五”动物防疫体系建设探讨

畜牧业不仅面临市场风险、自然灾害风险而且还要应对动物疫病风险,一旦爆发重大动物疫病不仅使畜牧业遭受重创而且还将引发较大的公共卫生事件,甚至造成不良政治、经济、社会影响。未来,人们对动物疾病防控、卫生监督和畜产品安全将会提出更高的要求,因此,必须将动物防疫体系建设纳入公共卫生监督管理范畴,高度重视全力应对,不断创新和完善,确保动物和畜产品质量卫生,确保畜牧业健康稳定可持续发展。本文概述了＂十一·五＂期间新疆兽医体制改革和动物防疫体系建设的基本情况、取得的成绩和存在的问题;阐述了＂十二·五＂动物防疫体系建设面临的形势、发展思路和目标;明确了新时期的发展原则、建设重点、主要任务;提出了动物疫病的防控重点、培训要求和保障机制。     

猪瘟病毒衣壳蛋白与宿主丝/苏氨酸蛋白激酶N1相互作用的鉴定

为筛选并鉴定与猪瘟病毒(CSFV)衣壳(C)蛋白相互作用的宿主蛋白,本研究采用酵母双杂交技术以CSFV C蛋白为诱饵从猪外周血单个核细胞(PBMC)c DNA表达文库中筛选与之相互作用的宿主蛋白,共筛选到6种蛋白,分别为ATP5B、SON3、PKN1、PCBP1、RPS20和IQGAP1,根据Gene Ontology分析结果,这些蛋白分别参与细胞的增殖和代谢等过程。本研究选取丝/苏氨酸蛋白激酶N1(PKN1)进行进一步验证,经酵母共转化试验、免疫共沉淀试验和GST pull-down试验证实,宿主PKN1蛋白与CSFV C蛋白之间存在特异性结合。本研究首次证明PKN1与CSFV蛋白之间的相互作用关系,为进一步研究PKN1蛋白在CSFV感染过程中发挥的作用奠定了基础。     

猪外周血单个核细胞cDNA酵母表达文库的构建及与猪瘟病毒E2蛋白相互作用细胞蛋白的筛选

为研究猪瘟病-毒(CSFV)蛋白与宿主细胞蛋白之间的相互作用,本研究通过SMART技术合成猪外周血单个核细胞(PBMC)双链cDNA,以携带与载体pGADT7-Rec重组位点同源序列的特异引物经long-distance PCR扩增双链cDNA.纯化双链cDNA并与载体pGADT7-Rec共转化酵母菌株Y187,经同源重组构建PBMC cDNA酵母表达文库.以CSFV E2蛋白为诱饵进行酵母双杂交筛选,得到阳性克隆根据序列比对分析结果,进一步进行共转化验证.结果显示筛选到17个与CSFV E2蛋白相互作用的宿主细胞蛋白,基因注释(GO)分析表明这些蛋白分别参与免疫、代谢、细胞生长与增殖、生物调节等过程,为研究它们与CSFV E2的相互作用奠定了基础.     

应用酵母双杂交方法筛选与猪瘟病毒Npro蛋白相互作用的宿主蛋白

为研究猪瘟病毒(CSFV)与宿主细胞间的相互作用,本研究采用酵母双杂交方法以猪瘟病毒Npro蛋白为诱饵,从猪外周血单个核细胞(PBMC) cDNA表达文库中筛选与之相互作用的蛋白,经共转化试验表明,共筛选到12个与Npro蛋白相互作用的宿主蛋白,应用Cytoscape 2.8.2软件绘制了蛋白质间相互作用关系图,根据GO分析结果,这些蛋白分别参与细胞代谢、细胞生长、免疫等过程,经双分子荧光互补(BiFC)试验表明筛得的部分宿主蛋白与CSFV Npro具有相互作用.本研究中筛选得到的蛋白质对CSFV复制的影响有待进一步深入研究.     

重组牛α-干扰素的原核表达与纯化

为在大肠杆菌表达系统中高效表达牛α-干扰素(bovine interferon-α,Bo IFN-α),将经密码子优化后的牛α-干扰素成熟蛋白基因合成并克隆到表达载体p Cold II中,转化大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,获得可溶性的表达蛋白。对重组菌表达条件进行优化,结果显示在IPTG浓度为0.64 mmol/L,诱导温度为15℃,诱导时间为9 h的条件下,可溶性目的蛋白的表达量最高。重组蛋白经镍柱纯化后的纯度为99.2%,表达量为36 mg/L菌液。重组蛋白在MDBK细胞上抗水泡性口炎病毒的活性为1×106U/mg。     

云南省楚雄州牛羊蓝舌病的血清学调查

应用琼脂扩散试验法，对采自云南省楚雄州４个县（市）的４１７份牛、４０６份羊血清进行了蓝舌病的血清学调查，结果血清抗体阳性率分别为１３．１９％和４６．３１％；对血清学检测呈阳性反应的１７头牛和３４只羊进行了临诊调查，结果未发现有关的病史、症状与病变，均呈隐性带毒状态。