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根据克隆得到的迟缓爱德华氏菌gyrB基因序列设计并合成一对特异性引物,通用性和特异性检测结果显示所设计的引物具有良好的种间特异性和种内通用性,构建含gyrB基因的重组质粒作为标准品,经过反应体系优化后建立了检测迟缓爱德华氏菌的SYBR Green I实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,该方法线性关系良好,在Tm为63℃时,扩增产物的熔解曲线仅有一个单特异峰,扩增所得标准曲线为y=-3.32x 39.38,相关系数为0.998,扩增效率为1.00,最低能检测到60个拷贝。应用建立的方法对人工感染的大菱鲆病样进行了检测,三个被检样品均呈阳性反应,证明该方法具有较好的适用性。实验结果表明所建立的实时荧光定量PCR方法具有特异、敏感、快速、定量的优点,可用于迟缓爱德华氏菌病的快速检测。 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的表达和重组蛋白的纯化及免疫学活性分析 总被引:9,自引:1,他引:8
猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)为不分节段、聚腺苷酸化、有囊膜的单股正链RNA病毒。其基因组长约15kb,含有8个开放的阅读框架(ORFs)。PRRSV基因组的顺序依次为:5’-ORFla-ORFlb-ORF(2—6).ORFT-3’。鲁韦韦等分析表明,PRRSV的ORF7基因保守性较好,变异较小。此外,ORF7编码的核衣壳蛋白(N蛋白)具有良好的免疫原性及反应原性,机体产生的PRRSV抗体主要是针对N蛋白的。因此,N蛋白常可作为诊断抗原来检测PRRSV。 相似文献
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圆不锈钢管混凝土轴压力学性能的有限元分析 总被引:2,自引:1,他引:1
廖飞宇 《福建农林大学学报(自然科学版)》2009,38(6)
在确定了不锈钢与核心混凝土的材料本构模型、单元类型以及界面接触模型的基础上,根据构件的几何和材料非线性,建立了圆不锈钢管混凝土轴压构件的有限元模型.算例分析结果表明,有限元计算和试验结果总体上吻合良好.利用有限元模型,比较了不锈钢管混凝土和普通钢管混凝土轴压构件的荷载-变形关系曲线. 相似文献
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以槲皮素(QT)与Al3+的相互作用为例,建立了基于单次扫描光谱获得共振光散射信号升降变化的一种全新双波长比率法Al3+在醋酸-醋酸钠缓冲溶液中形成的羟基配合物,随槲皮素加入,槲皮素将羟基配合物中的铝竞争下来形成槲皮素与铝的配合物,使得280 nm处的散射强度(IRLS280)降低,444 nm处的散射强度(IRLS444)增强.结果表明Log(IRLS 280/444nm)与槲皮素浓度在(2.5~25)×10-5 mol/L范围内呈线性关系,相关系数R=0 998 0,检测限为2.0×10-6mol/L. 相似文献