口蹄疫基因工程疫苗研究进展

口蹄疫是由口蹄疫病霉(Foot-and-Mouth Disease,Virus，FMDV)引起的偶蹄动物共患的一种急性、热性、高度接触性传染病，具有传染性强、传播速度快、传播途径广的特点，曾多次在世界发生大流行，被联合国粮农组织和世界动物卫生组织列为A类传染病之首。该病的爆发流行，给畜牧业生产和人民生活造成极大损失，严重影响国际贸易，为此，引起了世界各国的高度重视。     

牛白细胞介素-2基因的克隆与序列分析

白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)是一种具有广泛生物学活性的细胞因子,主要由激活的T淋巴细胞产生,它能提高免疫细胞杀伤癌细胞、病毒或细菌感染细胞以及促进抗体生成和分泌的能力[1-2],在机体正常免疫过程中起着十分重要的作用.     

内蒙古家畜布鲁氏菌病综合防控模式效果评估

为科学评估内蒙古自治区畜间布鲁氏菌病的防控成果,掌握布鲁氏菌病疫情发生发展的规律,进一步完善自治区的综合防控策略,对在四子王旗设立的防控试点开展的溯源灭点、免疫、监测、消毒、检疫监管等综合防控工作进行效果评估。结果表明,开展畜间布鲁氏菌病溯源灭点的防控效果明显,但防控效果因布鲁氏菌病感染基础情况不同而有一定差距。当畜群布鲁氏菌病感染率高时,一次溯源灭点无法达到彻底清除感染畜的目的;不开展溯源灭点,直接实施免疫,对控制畜间布鲁氏菌病有一定的效果。     

牛轮状病毒NSP5基因SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用

为建立检测牛轮状病毒(BRV)快速特异的荧光定量RT-PCR方法,本研究针对BRV NSP5基因设计了一对特异性引物经PCR扩增目的片段,并克隆于pCI载体作为重组质粒标准品(pCI-NSP5),经优化反应条件,建立了基于NSP5基因的BRV荧光定量RT-PCR方法,并对其进行了特异性、敏感性及重复性试验.结果显示,建...     

应用直接透射电镜配合免疫电镜诊断牛轮状病毒性腹泻

犊牛腹泻是养牛业的常见疾病之一,其病因很复杂,细菌、病毒、寄生虫、消化不良和饲养管理差均可引起犊牛腹泻,其中轮状病毒是较为多见的病因之一。轮状病毒性腹泻主要发生于新生犊牛,其发病率高,死亡率低,但由其引起的损失仍然是很严重的。本病广泛分布于世界各地。我国也有本病发生的报道,并且分出了病毒。     

鸡沙门氏菌外膜蛋白亚单位疫苗的研究

用十二烷酰肌氨酸法提取鸡沙门氏菌外膜蛋白（OMP）作为抗原，制备免疫激发复合物型（Immunostimulating Complex,ISCOM）亚单位疫苗。ISCOM型OMP亚单位疫苗在电镜下可笼型颗粒结构，直径为60mm-120nm。无菌性检测结果为无菌，具有可靠的安全性。对3周龄雏鸡肌注接种，6周龄攻毒，接种80ugOMP／只ISCOM型亚单位疫苗的雏鸡以鸡白痢沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌的攻击具有显著的免疫保护力。     

鸡沙门氏菌外膜蛋白亚单位疫苗的研究——Ⅱ油乳剂型(OE)亚单位疫苗的研究

用十二烷酰肌氨酸法提取鸡沙门氏菌外膜蛋白，作为抗原，制备油乳剂型（Ｏｉｌ　Ｅｍｕｌｓｉｏｎ　ＯＥ） 亚单位疫苗。该亚单位疫苗为油包水（Ｗ／Ｏ）型，稳定性良好，安全可靠。对３周龄雏鸡用该疫苗肌注接种，６周龄攻毒，结果表明，接种 ８００ｕｇ ＯＭＰ／只油乳剂型亚单位疫苗的雏鸡对鸡白痢沙门氏菌或鼠伤寒沙门氏菌的攻击具有显著的免疫保护力。     

我国部分地区牛轮状病毒的病原学调查及一株G1OP[11]型牛轮状病毒的分离鉴定

应用轮状病毒RNA电泳方法，对内蒙古、黑龙江、新疆、北京、安徽等地共90份犊牛腹泻粪便样品进行检测。在内蒙古和新疆采集的粪样中共检出11份轮状病毒阳性样品，平均阳性率为12％（11／90）。阳性样品经RT-PCR分型鉴定，新疆2份和内蒙古5份样品属于G10型，新疆另一牛场的4份样品属于G6型。对所有阳性样品进行病毒分离，获得1株能在MA104细胞上稳定传代的病毒株，经鉴定该分离株属于G10P[11]型轮状病毒，命名为HM26。G10型牛轮状病毒的分离在国内尚属首次。     

布鲁菌BAB基因的原核表达及间接ELISA检测方法的建立

本研究以布鲁菌Rev.1株基因组为模板,扩增BAB基因序列,将其克隆至原核表达载体pET-30a（+）,获得重组质粒pET-30a-BAB,对重组质粒进行原核表达,经Western blotting检测后,利用表达产物构建检测布鲁菌病的间接ELISA方法。结果表明,本试验成功克隆并表达了BAB基因,纯化表达产物经SDS-PAGE分析显示,本研究获得较纯的重组BAB蛋白;Western blotting试验表明,表达蛋白可与布鲁菌羊阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性;以重组BAB蛋白作为包被抗原,建立并优化了检测BAB抗体的间接ELISA方法。确定最佳包被条件：BAB蛋白包被量0.25 μg/mL,血清稀释度为1：400;封闭液为3%猪源明胶;二抗稀释度为1：6 000;显色时间为10 min。应用建立方法对临床40份羊血清进行检测,计算得出临界值为0.607。即当待检血清的P/N ≥ 1.5,且D_{450 nm} ≥ 0.607时,判定为阳性,当D_{450 nm} ≤ 0.561时,判定为阴性,当0.607 < D_{450 nm} < 0.561时,判定为疑似值,需要进行复检。与虎红平板试验和试管凝集试验比较,阳性符合率为100%,阴性符合率为71.88%,总符合率为77.5%。