‘岷县黑裘皮羊’不同组织中HSP60基因的表达定位

【目的】探讨‘岷县黑裘皮羊’不同组织器官中热休克蛋白60(HSP60)的表达差异及其规律.【方法】以3头成年雄性‘岷县黑裘皮羊’为研究对象,屠宰后采集心脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉和睾丸组织,利用实时荧光定量PCR、免疫组织化学染色和Western-Blotting检测不同组织中HSP60的表达差异及规律.【结果】‘岷县黑裘皮羊’不同组织中均可见HSP60基因和蛋白的表达且存在一定的差异,心脏组织中HSP60基因和蛋白表达最高,脾脏组织中表达最低;心脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉和睾丸组织切片中均有HSP60的阳性表达,心脏组织着色最深.【结论】HSP60可能对维持心脏或心肌细胞的功能具有重要调节作用,上述结果为今后HSP60基因功能的研究以及绵羊抗逆性研究提供参考依据.     

Toll样受体信号传导通路的研究进展

Toll样受体（toll like receptors,TLRs）能识别病原微生物相关分子模式,募集含有Toll/白介素-1受体（TIR）结构域的接头蛋白分子,通过髓样分化蛋白88（MyD88）依赖性信号传导通路或由β-干扰素TIR结构域衔接蛋白（TRIF）依赖性信号传导通路启动信号传导,继而引发特异性的免疫应答。作者就TLRs的结构特征、分布、配体识别、参与信号传导的接头蛋白分子及介导的信号传导通路的最新研究进展进行综述。     

卵黄抗体及其在疾病防制与饲料中的应用研究进展

卵黄抗体（immunoglobulin of yolk,IgY）具有性质稳定、制备简单、产量高、成本低等优点,已广泛用于动物的疾病防制,随着抗生素的禁用,卵黄抗体逐渐成为一种新型饲料添加剂在饲料中添加应用。作者就卵黄抗体的特征及其在动物疾病防制与饲料中的应用进行了简要概述。     

单增李斯特菌ActA的表达、免疫原性研究及单克隆抗体的制备

原核表达单增李斯特菌(Lm)ActA蛋白并进行亲合层析纯化,检测ActA的免疫原性,以表达蛋白为检测抗原制备Lm单克隆抗体,并对单抗的亚型、效价、亲合力及特异性进行测定。结果表明,成功表达了ActA蛋白;表达蛋白诱导了特异性的细胞免疫和体液免疫,具有良好的免疫原性;共获得4株抗Lm ActA单克隆抗体。其中3G6、4E10和2B9为IgG1亚类;腹水抗体效价,3G6和4E10为1∶64000,2B9为1∶32000;3G6、4E10和2B9的亲和常数分别为6.62×107M-1、5.67×107M-1和7.15×106M-1;3G6、2B4和4E10为Lm特异性单抗,2B9为致病性李斯特菌特异性单抗。所制备的单抗可用于Lm检测方法的建立。     

单核细胞增生性李斯特菌的主要毒力因子及其致病机理

单核细胞增生性李斯特菌(Listeria monocytogenes,LM)是重要的食源性人兽共患病原菌,LM的致病性与毒力因子密切相关,研究其毒力因子对于充分了解李斯特菌病的致病机制及有效防制该病有重要意义。作者对LM的毒力因子(如李斯特溶血素、肌动蛋白聚合蛋白、C型磷脂酶、内化素、细胞壁水解酶、酰胺酶及毒力调节因子如转录活化因子和应答调控因子等)和致病机理进行了综述。     

应用PCR检测单核细胞增生性李斯特氏菌

单核细胞增生性李斯特氏菌（Listeria Monocytogenes，LM0）简称单增李氏菌，是一种重要的人畜共患病和食源性病原菌之一，可引起人和多种动物的脑膜炎、败血症及流产等症状，死亡率达30％～40％，对畜牧业生产和人类健康构成严重威胁。传统的分离鉴定方法检测周期长、操作繁琐，不能满足食品快速检测和疾病暴发时诊断的需要。而PCR方法具有检测速度快、操作简便和特异性强等优点。本试验通过扩增hly基因部分片段，建立单增李氏菌PCR检测方法。     

孔雀致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

孔雀作为集观赏、食用、保健于一身的养殖珍禽,在很多地方都有养殖,但随着养殖量的增加,患病率也在逐渐增高,尤其是大肠杆菌病.大肠杆菌常引起禽类败血症、气囊炎、心包炎、肝周炎、肉芽肿、卵黄性腹膜炎、关节炎、眼炎、脐炎等病理变化,具有较高的发病率和死亡率[1].由于大肠杆菌血清型太多,并且极易产生耐药性,为弄清本病流行情况及流行菌株的耐药性,从而科学指导用药,经常对大肠杆菌病进行病原的分离鉴定及药敏试验,以期指导临床诊治.2009年11月中旬,长春某珍禽养殖场所饲养的80只6月龄孔雀先后有20几只发生腹泻、肿脸、流泪等症状,继而死亡,经临床检查、病理剖检初步诊断为大肠杆菌病.从现场采集了病料,通过病原分离、生化培养、动物试验等,最终确定病原体为致病性大肠杆菌.分离的大肠杆菌用临床常用抗菌药物进行了药敏试验,根据药敏结果合理选择药物,有效地控制了该群孔雀的病情.有关本次试验报告如下.     

PRRSV E蛋白的表达及检测抗体胶体金试纸的研制

为了建立快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的方法,试验采用RT-PCR扩增ORF5基因,克隆至原核表达载体pET-28a上,诱导重组质粒转化菌表达,SDS-PAGE分析目的蛋白表达情况,Western-blot检测表达蛋白免疫活性,亲和层析纯化表达蛋白。用SPA标记胶体金,分别以纯化E融合蛋白和羊抗猪抗体为检测线和质控线制备胶体金试纸,用所研制的试纸检测猪血清样品40份,并与IDEXX ELISA试剂盒的检测结果进行比较。结果表明:成功表达E融合蛋白,表达蛋白具有良好的反应原性,纯度为90%;制备的胶体金试纸与IDEXX ELISA试剂盒检测符合率为92%。说明该种方法可检测PRRSV抗体。     

犬肛门腺炎治疗

犬肛门腺又称肛门囊,是一对梨形的对称腺体,位于肛门两侧,开口于皮肤与黏膜连接处,其产生的灰色或褐色的皮脂样分泌物具有润滑肛门的功能。犬的肛门腺炎是因肛门腺囊内分泌物滞留、腐败引起的。