辣椒CaHsfA2上游转录因子的筛选及耐热功能分析

【背景】辣椒作为一种在世界范围内普遍栽培的蔬菜,具有喜温不耐热的特性。随着近些年极端高温天气出现日渐频繁,热胁迫已经成为影响辣椒生产的主要环境因素之一,明确辣椒的耐热机制进而培育耐热品种对辣椒生产具有重要的意义。【目的】热激转录因子HsfA2在植物耐热性中发挥重要作用,筛选辣椒CaHsfA2上游的转录因子,并分析后者在辣椒耐热性形成中的作用,为进一步阐明辣椒耐热分子机制提供理论依据。【方法】以CaHsfA2起始密码子上游的955 bp启动子序列为诱饵,利用酵母单杂交（Y1H）技术,筛选CaHsfA2的上游转录因子,并通过Y1H点对点杂交、双荧光素酶报告系统（Dual-Luciferase）与萤火素酶互补技术（LCA）进一步验证二者之间的互作关系。利用qRT-PCR技术分析热胁迫下CaHsfA2上游转录因子在辣椒耐热品系‘R9’中的动态表达模式;利用基因瞬时表达技术分析上游转录因子的亚细胞定位;利用病毒诱导的基因沉默技术（VIGS）分析CaHsfA2上游转录因子的耐热功能。【结果】筛选获得了CaHsfA2上游转录因子CaBES1,验证了二者的互作关系,通过分析双荧光素酶报告系统的结果及CaBES1沉默辣椒植株中CaHsfA2的表达量发现,转录因子CaBES1对CaHsfA2具有转录抑制作用。亚细胞定位结果表明,CaBES1在细胞膜和细胞核上均有表达,热胁迫处理后细胞核内的荧光信号增强,符合其发挥生物学功能时由细胞质向细胞核转移的特性;动态表达模式分析表明,热胁迫下,CaBES1表达水平呈现先降低后升高的变化趋势,这也说明CaBES1可以响应热信号,为下一步对其耐热功能研究提供了支撑。辣椒CaBES1被沉默后,通过对比分析沉默植株和对照植株的表型、相对电导率、叶绿素含量等指标发现,CaBES1的沉默表达提高了CaHsfA2表达量并增强了辣椒的耐热性。【结论】CaBES1通过负调控CaHsfA2表达而抑制辣椒的耐热性。     

鱼眼为何患“白内障”

“七·五”期间,笔者在安徽省花园湖鱼种池塘里,观察到草鱼种眼睛水晶体混浊,犹如老年人的白内障一般,更甚者,有的眼珠掉落,导致了鱼眼瞎,这到底是怎么回事? 这还得从寄生虫谈起。自然界中有一种称为复口吸虫的寄生虫,其成虫寄生在鸥鸟     

围塘河豚养殖技术研究

2001～2002年,我们在浙江三门县沙柳旗门养殖场养殖河豚鱼(双斑东方)40亩,分4口塘,放苗40000尾,总投入120万元,成活率达75%,商品率达65%,总产出180万元,亩净效益达10000多元,其效益显著。现将养殖技术简要概述如下。一、前期准备1.场地选择养殖场地选择要求背风向阳,以泥沙底为佳,水质无异色、异臭、异味,符合海水养殖水质标准,海水比重保持在1.005～1.015,悬浮物质人为增加的量不得超过10毫克/升,pH值7.0～8.5,溶解氧连续24小时中,16小时以上必须大于5毫克/升,其余任何时候不得低于3毫克/升。2.围塘基础建设围塘进排水系统独立,面积以5～1…     

小反刍兽疫的防治

近年来由于山东省养殖业的发展,动物活体远距离频繁调运,使新发病有所增加,特别是小反刍兽疫传染病。〈br〉 1病原〈br〉 小反刍兽疫是由小反刍兽疫病毒引起的,本病毒为副黏病毒科麻疹病毒,病毒在体外存活时间不长,病毒存在于血、脾、淋巴腺内的半衰期为5min。70℃以上,迅速灭活。4℃下,pH7.2~7.9,病毒稳定,半衰期3.7d,但如pH高于9.6或低于5.6,病毒迅速灭活。     

用尿素代替配合饵料中的部分鱼粉养殖鲤鱼的试验

在饲料中添加尿素作为蛋白源,饲养反刍动物的研究,早在本世纪初业已开始,到第二次世界大战期间,开始实际使用尿素补充乳牛和肉牛等家畜所缺乏的蛋白质。现在美国还把素尿添加到配合饵料中,制成产品使用。但是,用尿素作为鱼类的蛋白源的研究,现在才刚刚开始。到目前为止,仅见到1980年苏联学者和波兰学者在这方面作过简单报导。1981年我们在配合饵料中加入了适量的尿素代替其中部分鱼粉,用于鲤鱼饲养,进行了探索性试验。现将试验结果作如下简报。材料和方法     

淡水白鲳当年养成商品鱼初探

在一口３．１１亩池塘中进行淡水白鲳当年养成商品鱼试验，放全长２．４３ｃｍ体重０．２４ｇ鱼种，经１０５天试验，养成规格２２９ｇ，总产３３６．２ｋｇ，饵料系数１．３０（含鲤鱼）。本文对２２～３２℃养殖积温２５００～２８００℃地区淡水白鲳当年养成商品鱼技术进行了论述与探讨。     

三门青蟹养殖技术概要

三门县沙柳旗门养殖场有养蟹池塘53.3hm^2，塘底为泥沙性底质，没有淤泥，投喂饵料以淡水螺蛳、牡蛎、兰蛤等贝壳类为主，辅以配合饵料，调控好水质、水位，疾病预防为主。青蟹放养密度4-6只/m^2，效益12万元/hm^2。     

竹炭基生物炭对茶叶品质和土壤微生物群落结构的影响

为探讨竹炭对茶叶品质、土壤微生物群落结构及土壤酶的影响,本研究以多年种植的茶园土为对象,茶叶为供试作物,设置5个处理:不施肥对照处理(CK₁);有机肥7 500 kg·hm^-2对照处理(CK₂);有机肥7 500 kg·hm^-2+竹炭1 125 kg·hm^-2处理(T₁);有机肥7 500 kg·hm^-2+竹炭2 250 kg·hm^-2处理(T₂);有机肥7 500 kg·hm^-2+竹炭3 375 kg·hm^-2处理(T₃),探究茶园多年种植条件下土壤微生物和胞外酶对施入竹炭的响应机制。结果表明,竹炭的施入对土壤微生物总生物量(T)、细菌生物量(B)、真菌生物量(F)、茶叶产量(Y)、Mg含量、过氧化氢酶(PER)活性、酸性磷酸酶(ACP) 活性、β-葡萄糖苷酶(BG)活性和蔗糖酶(SU)活性具有促进作用,各处理表现为T₂>T₁>T₃> CK₂>CK₁;对放线菌生物量(A)、真菌/细菌(F/B)比值、百芽重(BW)、发芽密度(BD)、水浸出物(WE)、咖啡碱(Caf)、茶多酚(Po)、氨基酸(Am)、儿茶素(Cat)和Vc含量也具有促进作用,各处理表现为T₂>T₃>T₁>CK₂>CK₁。竹炭施入通过改变F/B比值和酚氨比,从而改善了病土食物网结构、土壤生态系统食物网营养结构以及茶叶的品质。在外界种植环境相同的条件下,随着竹炭添加量的增加,T、B、F、A、F/B、BG活性、PER活性、ACP活性、SU活性呈现先增加后减少的趋势,酚氨比、G^-/G⁺呈现下降趋势,压力指数先减少而后升高。竹炭添加量为2 250 kg·hm^-2(T₂)时更为有效。本研究结果可为深入解析茶叶品质、茶园土壤质量演变特征与保护提供科学依据。