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81.
82.
应用PCR检测方法,对来自山东、河北、河南等10省44份表现高热病症状的临床发病猪病料,进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒(PCV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪巨细胞病病毒(PCMV)和猪流感病毒(SIV)6种病原的检测。结果发现,6种病原中PRRSV的检出率最高为72.7%;单纯PRRSV感染的比例仅为2.27%。根据PCR检测结果分析PRRSV与其他5种病毒的混合感染情况,结果发现两重感染中PRRSV/PRV并发率最高(62.50%),三重感染中PRRSV/PRV/PCV并发率最高(43.75%),四重感染中PRRSV/PRV/PCV/PCMV并发率最高(28.125%),五重感染中PRRSV/PCV/PCMV/CSFV/PRV并发率最高(15.625%),PRRSV/PCV/PCMV/CSFV/PRV/SIV六重感染的比例为9.375%。将PRRSV阳性病料接种猪肺巨噬细胞和Marc-145细胞,共分离到9株PRRSV,分离率为28.1%。结果表明,发病猪多为感染PRRSV的同时混合感染其他多种病毒,为制定合理的免疫程序预防猪场各种疾病提供科学依据。 相似文献
83.
84.
85.
RT—PCR一步法检测鸡传染性支气管炎病毒的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
根据已发表的IBVS基因核苷酸序列,自行设计合成了一对跨幅约0.9kb的引物。该区段包括了S1基因C末端的400bp和S2基因N末端的500bp。用该引物对5株IBV参考毒株Gray、M41、H120、H52和MA5进行RT-PCR一步法扩增均获得预期的PCR产物,该引物的RT-PCR灵敏度检测结果表明,可以检测出0.112pg/μL的模板。用该引物对30个地方分离株进行检测,18株呈阳性,与鸡胚传代及电镜观察结果一致。 相似文献
86.
鸡14种病毒病基因芯片的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
应用PCR或RT—PCR方法分别获得鸡新城疫(ND)、禽流感(AI)、鸡传染性支气管炎(IB)、鸡传染性法氏囊病(IBD)、鸡传染性喉气管炎(ILT)、鸡马立克氏病(MD)、减蛋综合征(EDS-76)、禽网状内皮组织增生症(RE)、鸡脑脊髓炎(AE)、鸡传染性贫血症(CIA)、鸡病毒性关节炎(AVA)、包涵体肝炎(IBH)、禽白血病(AL)、鸡痘(FP)各一特异性片断,以这些片断为探针,采用接触式点样技术,制成低密度的DNA阵列芯片。自病料中提取核酸,通过生物标记技术,使样品核酸标记上生物素。当样品和预点在硝酸纤维素膜上的探针杂交后.通过显色技术,即可得出诊断结果。 相似文献
87.
应用PCR方法,从郑州、福建、浙江金华和宁波猪肺脏中分别扩增出4段PCMV gB基因,并将其分别克隆入pMD18-T载体,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,将阳性克隆进行序列分析并构建系统进化树。序列分析表明,其gB基因全长为2 580bp,编码860个氨基酸,与PCMV其他序列相比,其同源性在96.1%~99.7%,与β疱疹病毒亚科中其他常见毒株同源性在25.9%~38.1%;推导的氨基酸序列,有11个半胱氨酸,17个潜在N-糖基化位点,其裂解位点是RYKR;系统进化树分析发现,推导的氨基酸序列出现两个分支,而且来自上述4个地区PCMV gB糖蛋白氨基酸序列处在不同的分支中。 相似文献
88.
89.
猪流感病毒分型基因芯片的建立和初步应用 总被引:9,自引:0,他引:9
根据流感病毒血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)亚型基因序列间的差异性,分别设计H1、H3、H9、N1和N2的特异分型引物,并根据M基因设计A型流感病毒的通用引物。RT-PCR扩增猪流感病毒各亚型HA、NA和M基因的特异片段,克隆至pMD18-T构建重组质粒,制备探针。将各探针按一定的阵列点加到硝酸纤维素膜上,制成基因芯片。并对217份不同地区的样品进行检测。结果表明:该芯片可以同时检测待检样品中5种亚型A型流感病毒,并显示了较高的灵敏度和特异性,灵敏度比PCR高1个稀释度,比病毒分离高2个稀释度。该方法的建立为猪流感的检测及猪流感病毒各亚型在猪群中的流行病学调查提供了一种快速、灵敏和高通量的手段。 相似文献
90.
为进一步研究高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)的致病机理,对HP-PRRSV自然感染和人工感染下的病理组织学变化进行比较观察。在组织病理学变化方面,自然感染病例病变性质与人工感染基本相同,但在病变范围以及严重程度方面存在明显差异:自然感染病例的胃肠道病变尤为显著,而人工感染病例却较少引发消化道病变;自然感染病例的炎症波及全身淋巴结,而人工感染病例以肺门淋巴结、下颌淋巴结、肠系膜淋巴结病变最为明显,其他部位淋巴结未见明显病变。自然感染病例中,常见多种病原的混合感染,提示HP-PRRSV可能作为多种疾病的基础病因。自然感染和人工感染病例在肺脏上均表现为严重的间质性肺炎,说明肺脏部位的病理变化对单纯HP-PRRSV感染的诊断具有指证意义。本研究为HP-PRRSV感染的诊断及其致病机理研究提供了理论依据。 相似文献