羊传染性脓疱病毒耐热冻干保护剂筛选及冻干曲线优化

采用冻干试验筛选出保护剂基础配方,再通过Plackett-Burman设计法筛选主要保护剂基质,然后通过Box-Behnken响应面分析法对羊传染性脓疱病毒(ORFV)耐热保护剂配方进一步优化,用冻干试验进一步验证筛选出1种针对ORFV保护效果最好的耐热冻干保护剂作为疫苗用候选配方。同时,依据前期试验获得的活疫苗冻干曲线,通过进一步优化,获得疫苗最佳冻干曲线。利用该冻干工艺冻干的疫苗,保护剂的保护率可达95.3%,且疫苗各项指标均达到《中华人民共和国兽用生物制品规程》要求。经37℃保存7,15,30d病毒滴度分别下降0.46,0.70,1.00;2~8℃保存3,6,12,24个月病毒滴度分别下降0.10,0.10,0.40,0.60,证明此配方制备的疫苗具有良好的热稳定性。本试验解决了ORFV细胞弱毒疫苗仅能在低温条件下保存和运输的瓶颈技术问题,使疫苗的储存、运输更为方便。     

逆转录病毒载体介导的T7RNA聚合酶在猪源细胞PK15及SK6中的稳定表达

本研究旨在利用逆转录病毒载体系统将T7RNA聚合酶基因导入猪源细胞,并对该基因的遗传稳定性进行分析。作者克隆并构建含T7RNA聚合酶基因的逆转录病毒重组载体pBABEpuro/T7。将pBABEpuro/T7与水泡性口炎病毒载体pVSV-G共转染GP2-293细胞,收获重组病毒并用该病毒在Polybrene的介导下分别感染PK15和SK6细胞,用嘌呤霉素筛选阳性细胞克隆。对此阳性细胞进行传代,并对不同代次细胞中的T7RNA聚合酶基因进行扩增,确定其遗传稳定性。用直接荧光法和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测细胞中T7RNA聚合酶基因的表达及其活性。结果表明T7RNA聚合酶能够被稳定地整合进靶细胞基因组内,细胞系内的T7RNA聚合酶具有较好的转录活性,其活性传代不减弱。免疫荧光检测发现所表达的T7RNAP蛋白具有良好的反应原性。本研究表明T7RNA聚合酶基因稳定整合进猪源细胞,该基因的稳定整合为建立高效体内病毒拯救系统提供了良好的工具。     

鹅IGF-Ⅰ基因5’调控区序列的克隆与分析

根据鸡、鸭等的IGF-Ⅰ基因5’调控区的保守区序列设计一对兼并引物,从五龙鹅的基因组DNA中扩增了IGF-Ⅰ基因5’调控区序列,将其克隆到pMD18-T载体上进行测序,结果得到长796 bp的序列。五龙鹅IGF-Ⅰ基因5’调控区序列与鸭、鸡的同源性分别为98.1％、93.0％,充分显示了IGF-Ⅰ基因在进化上的高保守性;与鸭相比有4处碱基缺失和7处碱基插入;与鸡相比有4处碱基缺失和3处碱基插入。对其序列进行酶切图谱分析发现,共有5种常见的限制性内切酶的酶切位点。     

加拿大有机乳生产规范及产业概况

2006年,加拿大颁布了新的"加拿大有机产品标准",其中包括了有机乳业的标准,这一标准规范了加拿大有机乳业,有力地促进了有机乳业的发展.加拿大的有机乳业主要集中在安大略省、魁北克和不列颠哥伦比亚三个省,近年来,它们的生产者数量、有机乳生产量和产品种类都有了很大的提高.本文就加拿大有机乳业近年来的发展进行概述和归纳,为国内有机乳的发展提供借鉴和参考.     

不同钙磷水平对0～4周龄五龙鹅生产性能及血浆和胫骨生化指标的影响

试验选用1日龄健康五龙鹅雏,研究了饲粮中不同钙磷水平对0～4周龄五龙鹅生产性能、血浆钙磷含量和碱性磷酸酶(AKP)活性以及胫骨灰分及钙磷含量的影响。试验采用4×2二因子设计,饲粮钙水平设计为0.65%、0.75%、0.85%和0.95%,非植酸磷(NPP)水平设计为0.3%和0.4%。结果表明:①本次试验条件下,以五龙鹅最大体增重、采食量及最高饲料利用率为衡量指标,饲料中适宜的钙水平为0.65%,NPP为0.3%。钙磷间的交互作用对体增重、饲料消耗及料重比影响显著,以体增重与饲料消耗为衡量指标,最佳组合为0.65%Ca×0.3%NPP,Ca/NPP比为2.17,以料重比衡量最佳组合为0.65%Ca×0.4%NPP,Ca/NPP比为1.63。②以较高的血钙、血磷含量和较低的血浆AKP活性为衡量指标,饲粮中适宜的钙水平为0.65%,NPP为0.4%。钙磷间的交互作用对血浆钙磷水平及AKP活性影响极显著,以较高的血钙浓度为衡量指标较理想组合为0.65%Ca×0.4%NPP,以较高的血磷含量为衡量指标较理想组合为0.85%Ca×0.4%NPP,以较低的血浆AKP活性为衡量指标较理想组合为0.65%Ca×0.3%NPP。③以较高的胫骨灰分及钙磷含量为衡量指标,饲粮中适宜的钙水平为0.65%,NPP为0.4%。钙磷互作对胫骨灰分及钙磷含量影响极显著,以胫骨粗灰分及磷含量为衡量指标的较佳组合为0.75%Ca×0.4%NPP,Ca/NPP     

热风-真空冷冻联合干燥对脆性龙眼果干品质及益生活性的影响

【目的】 研究热风-真空冷冻联合干燥对脆性龙眼果干品质及益生活性的影响,为高品质龙眼果干工业化节能干燥模式提供理论依据。【方法】 以热风干燥、真空冷冻干燥龙眼果干为对照,比较分析热风-真空冷冻联合干燥对脆性龙眼果干水分含量、水分活度、皱缩率、复水比等理化特性和总糖、多糖等营养品质的影响。同时采用GC-MS测定风味物质变化,电量表测定能源消耗量。并选用植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌发酵龙眼果干,比较发酵过程中活菌数、总糖、还原糖以及短链脂肪酸的变化,评价热风-真空冷冻联合干燥对龙眼体外益生活性的影响。【结果】 热风-真空冷冻联合干燥龙眼果干的水分含量、水分活度和皱缩率显著低于热风干燥,而复水比显著高于热风干燥。在总糖、多糖含量以及挥发性风味物质种类和总量上,热风-真空冷冻联合干燥低于真空冷冻干燥而高于热风干燥。在能源消耗上,热风-真空冷冻联合干燥比真空冷冻干燥节约干燥时间12.16%,节约单位能耗25.40%。在益生活性方面,植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌均能通过发酵龙眼干增加活菌数量,利用龙眼干中的总糖产生短链脂肪酸,降低发酵液pH,且益生效果受干燥方式和菌株种类的影响较大。当植物乳杆菌发酵热风-真空冷冻干燥的龙眼果干48 h后,活菌数生长最多可达12.40 lg cfu/mL,高于真空冷冻干燥、热风干燥和新鲜龙眼。嗜酸乳杆菌发酵48 h后,热风-真空冷冻联合干燥活菌数达11.84 lg cfu/mL,与真空冷冻干燥接近,低于热风干燥,但高于新鲜龙眼。【结论】 热风-真空冷冻联合干燥结合了热风干燥和真空冷冻干燥两种干燥方式的特点,可以显著缩短干燥时间,节约能耗,提高干燥效率和果干品质。     

有机肥液对直播蔬菜种子萌发和幼苗生长的影响

蔬菜废弃物富含植物所必须的各种营养元素。通过蔬菜废弃物沤制时间和施用水平二因素试验结果表明：蔬菜废弃物沤制的有机肥液作浇塘肥施用,对种子萌发产生非常明显的毒害作用：出苗后的幼苗仍不断死亡,表明蔬菜废弃物沤制的有机肥液不宜作浇塘施用。合理施用有利于改良土壤结构,补充蔬菜生长所必需的各种中、微量元素,实现资源循环利用。     

烟后种植西兰花施肥效应研究

烤烟是一种喜钾作物,为保证烤烟品质,种植过程中磷、钾肥的施用水平相对较高,一般P2O5和K2O的施用水平分别是纯N的1.5～2.5倍。通过分析烤烟种植后土壤N、P、K含量表明,土壤P、K含量较高,进一步开展肥效试验结果表明,P肥利用率均为负值,除无N区K肥利用较高外,其余各处理利用均为负值,说明烟后种植西兰花,应重点施用氮素肥料,不必施用磷、钾肥。烟后种植西兰花在交通便利且土壤肥力较高的地区,是一种既可充分利用烤烟种植后富集在土壤中的磷、钾肥,达到节本增效目的,又可减轻施肥对土壤环境的污染的重要措施。     

XML与面向Web的数据挖掘技术的应用研究

Web是一个动态性极强的信息源,访问、分析这些数据必须要研究异构数据的集成问题和选择合适的技术进行数据分析、集成和处理。介绍了多数据源数据仓库体系结构,多数据源数据的集成思想和实现的框架;分析了转换器在面向Web的数据挖掘中存在的不足和XML语言韵技术特点;指出了应用XML技术在面向Web的数据挖掘中的作用并提供了实现的方法。     

口蹄疫病毒P1+2A基因真核表达载体的构建

通过RT-PCR方法获得了口蹄疫病毒O型,编号为OF3毒的P1+2A区的目的基因,并将其克隆到克隆载体pMD18-T上,再根据表达载体pQE-Trisystem的特性及酶切位点设计合适的表达引物.由表达引物通过PCR技术从克隆载体上扩增出带有特定酶切位点的目的片段,再对载体和目的片段进行酶切处理,处理后由T4 DNA连接酶将二者连接.通过PCR及酶切鉴定,结果证明口蹄疫病毒目的基因片段已被正确克隆到表达载体pQE-Trisystem上.