正交试验法筛选环糊精包合碘制备工艺研究

选定搅拌速度(A)、高温搅拌时间(B)、搅拌总时间(C)、混合时β-环糊精温度(D)4个因素,综合评价产品碘含量和合格产品碘收率,对环糊精包合碘生产工艺进行4因素3水平筛选。结果表明,最优水平分别为A1B2C1D2,即搅拌速度为300 r·min-1、高温搅拌时间60 min、搅拌总时间8 h、混合时环糊精温度80℃时可以得到最优产品综合加权指数,此时产品有效碘(I)含量为17.71%,合格产品碘收率为87.16%。极差分析法表明各因素重要程度排序为混合时环糊精温度>搅拌总时间>搅拌速度>高温搅拌时间;方差分析法表明混合时环糊精温度与搅拌速度可以显著影响产品综合指数(P<0.05),作为工艺筛选评价方法较极差分析法更为客观。     

鸡新城疫病毒F基因与鸡白介素-2(IL-2)基因在真核载体中串连表达及免疫原性

为了探索鸡白介素-2(IL-2)对鸡新城疫病毒(NDV)F蛋白免疫效果的增强作用,本研究通过重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)利用连接子(G2SG3S)将鸡IL-2基因和鸡NDV F基因串连,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+),构建了表达质粒pcDNA-IL-2-F.通过脂质体介导DNA瞬时转染法,将重组质粒pcDNA-IL-2-F和pcDNA-F分别转染鸡胚成纤维细胞,Western blot验证表明,pcDNA-IL-2-F和pcDNA-F均能瞬时表达F蛋白,表达蛋白分别为76.0和59.6 kD,表达蛋白的大小与预期一致并具有抗原性.将表达质粒免疫SPF鸡(Gallus domedticus),6d后开始用ELISA方法检测NDV的特异抗体,免疫20 d后,用F48E9进行攻毒.结果显示,免疫pcDNA-IL-2-F的鸡群产生的抗体水平(P＜0.05)高于混合免疫pcDNA-IL-2和pcDNA-F,高于免疫pcDNA-F的鸡群,但比免疫Lasota组的抗体水平要低.攻毒试验说明免疫pcDNA-IL-2-F组比免疫其他质粒组保护率高,这说明串连表达的免疫效果要好于二者的联合使用,为病毒病疫苗的研制提供了思路.     

鸡肾型传染性支气管炎病毒的分离

在平邑地区某鸡场出现严重呼吸道病症状和肾脏病变的肉鸡群中分离到一株病毒,分离毒接种胚发育迟滞,胚体卷缩,肾脏尿酸盐沉积;对酸不敏感,对氯仿敏感;能干扰 NDV在鸡胚中的增殖;尿囊液毒攻击鸡具有呼吸困难,气管罗音,气管环出血及花斑肾等病变特征。这些结果表明,所分离的病毒是一株鸡肾型传染性支气管炎病毒,暂定名为 IBV-SPY株。     

鸡新城疫病毒S_1山东分离株的生物学特性研究

通过SPF鸡致病性试验、MDT、ICPI、血凝解脱速率和血凝素热稳定性试验 ,结果表明 ,从山东分离的鸡新城疫病毒S1株与Lasota、F4 8E8间存在生物学差异。对S1株的鸡胚增毒量进行了研究 ,结果显示 ,10 3 5EID50 接毒量既不影响病毒的增殖量也不影响其感染性     

不同药物对鸡败血霉形体病的治疗试验

鸡败血霉形体病是由败血霉形体引起的主要侵害鸡呼吸道的疾病,该病不仅可以经卵垂直传染,并且能引起饲料转化率降低。目前我国还没有有效的疫苗采用,防冶该病主要依靠抗菌素,为了探讨不同药物对该病的治疗效果,我们用不同的抗菌素对败血霉形体阳性鸡进行了治疗试验和净化方面的研究。     

一步法RT-PCR快速检测鸡新城疫病毒强毒株

本文参照NDV融合蛋白(F)基因序列设计引物，通过一步法RT-PCR扩增到NDV强毒株的170bp大小的特异条带。试验中未检出NDV弱毒株、IBV、AIV、IBDV的RNA，能够检出NDV尿囊液毒的最低滴度为10^-5稀释度(相当于10^3.7EID50病毒量)。对山东省不同地区于1997至2003年所分离的21个NDV强毒株检测全为阳性，而6个NDV弱毒株全为阴性。整个实验操作从病毒核酸提取到判定结果，在5h内即可完成。实验结果表明，该方法特异、敏感，适用于NDV强毒感染鸡群的快速检测。     

鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体的研制及应用

应用雏鸭病毒性肝炎病毒（DHV）弱毒疫苗和DHV油乳剂灭活苗多次免疫产蛋鸡，制备鸡抗鸭病毒性肝炎高免卵黄抗体，自制鸭病毒性肝炎病毒高免卵黄抗体的疗效取决于卵黄抗体的中和效价及治疗的时间。实验室试验及临床应用结果表明，卵黄抗体的中和效价应达2^8以上，并且在感染DHV 24h以内对雏鸭进行肌肉注射，治疗效果最为理想。     

鸡α—干扰素基因的克隆及序列分析

利用RT-PCR方法，从ConA诱导的鸡淋巴细胞中扩增出鸡α—干扰素基因，经同源性比较，发现家禽α—干扰素核苷酸序列之间同源性较高，而与哺乳动物的同源性较低，说明家禽α—干扰素的生物学功能与哺乳动物可能存在一定差异。     

Dot—ELlSA用于雏鸭病毒性肝炎的诊断

本实验采用过碘酸钠法用辣根过氧化物酶标记纯化的Ⅰ型鸭肝炎病毒单克隆抗体，建立了检测DHV(鸭病毒性肝炎)的Dot—ELISA方法。该方法简便易行，特异性好，与鸭瘟病毒、小鹅瘟病毒、鸡传染性法氏囊病毒、鸡新城疫病毒等无交叉反应，重复性高，对病毒尿囊液的最低检出范围为1：16，而对肝脏病料的最低检出范围为1：160。该方法可用于临床发病鸭的检测。     

鸭病毒性肝炎病毒JH2株感染雏鸭血清生化指标的动态变化

用1型鸭肝炎病毒山东分离株JH2人工感染3日龄健康樱桃谷雏鸭,对接种后1～5 d的血清酶、血糖及血脂等多项血清生化指标进行测定,结果表明:鸭肝炎病毒感染雏鸭1～2 d内丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性较未攻毒的对照组极显著升高:碱性磷酸酶活性在接种后2～3 d内与对照组差异极显著;接种后1～5 d攻毒组总胆红素和间接胆红素的含量均低干对照组,其中接种后1、3、4 d时差异显著;攻毒组胆碱脂酶和甘油三脂在接种后1～2 d内较对照组极显著升高,胆固醇在整个试验中无明显变化;谷氨酰胺转移酶活性在接种后1～4 d内较对照组有极显著升高;乳酸脱氢酶活性1～3 d内较对照组极显著升高,而肌酸激酶活性虽高于对照组,但差异不显著;雏鸭在接种后1～3 d内表现出明显的低尿酸血症,接种后1 d肌酐含量较对照组显著升高;α-淀粉酶活性呈逐渐升高的趋势,但均低于对照组,接种后1～2d与对照组差异极显著:攻毒组总蛋白、白蛋白和球蛋白在整个试验期间表现为先升高后降低的趋势,血清葡萄糖在接种后1 d降至最低,与对照组差异极显著.