猪滋养层干细胞样细胞的分离培养

滋养层干细胞(TSc)是形成胎盘组织细胞的前体细胞,与胚胎着床和胎盘形成密切相关。体外分离滋养层干细胞为研究滋养层的发育与功能提供了研究工具和基础。滋养层干细胞已经成功从小鼠附植前囊胚中获得,在猪上也有相关报道,但并没有关于6 d囊胚中分离到猪滋养层干细胞(pTSc)的报道。本试验通过对6 d孤雌囊胚透明带进行划口处理, 饲养层和基础培养液中附加碱性成纤维生长因子(bFGF)和人白血病抑制因子(hLIF)分离猪滋养层干细胞样细胞。同时,通过采用形态学和基因表达分析的方法对获得的猪滋养层干细胞样细胞进行了初步鉴定。结果显示,本试验分离得到的细胞呈现上皮样细胞形态,细胞间结合紧密,边缘光滑,核质比较大,RT-PCR结果显示表达滋养层干细胞标记基因Cdx2,体现了滋养层干细胞特征。结果表明,本试验成功在6 d孤雌囊胚分离得到猪滋养层干细胞样细胞,为后续研究猪滋养层发育提供了试验基础。     

湖南省辣椒上首次发现象耳豆根结线虫

应用线虫比较形态学、同工酶技术和IGS-PCR技术,对采自湖南省永州地区辣椒上的根结线虫进行种类鉴定。结果表明,该病原线虫为象耳豆根结线虫(Meloidogyne enterolobii),这是首次在湖南地区发现象耳豆根结线虫。     

小麦抗叶锈近等基因系TcLr38 RGAs分析

为获得Lr38的抗病类似物质,寻找与抗病基因表达相关的目的片段.根据已知植物抗病基因的NBS-LRR(核苷酸结合位点-富含亮氨酸重复)类保守区域设计简并引物,应用RGA技术在小麦的未知基因cDNA中扩增和分离抗病基因同源序列.从小麦抗叶锈近等基因系TcLr38中获得了9个小麦抗病基因同源片段D-8、A-5、B-20、C-6、F-16、A-4、B-9、C-4和D-12.经BLASTp分析,9个片段都含有NB-ARC保守结构域,其中D-8、A-5、B-20、C-6、A-4、B-9、C-4和D-12与已知抗病基因的相应区域相一致,具有抗病基因NBS特征结构域激酶2a(Kinase-2a)、激酶3a(Kinase-3a)和疏水结构域(HD).片段D-8、A-5、B-20、C-6、A-4、B-9、C-4和D-12可能与抗病基因表达相关.     

细毛羊与粗毛羊育肥饲喂试验

为了从根本上搞清舍饲育肥条件下粗毛羊与细毛羊的育肥效益,探索各品种幼龄羊育肥性能及社会效益,为养殖业的发展提供理论依据,进行此育肥试验。     

液压抽芯装置

注塑模具和压铸模具是型腔模里应用量最大的两类模具,作为实现聚合物、熔融金属向制品转变的这一过程的必要工装,两者在模具结构上具有很大的相似性.为了保证脱模过程的安全性,脱模过程必须严格控制脱模力、脱模速度和脱模行程.     

牛支原体新基因(P18)的克隆表达及活性鉴定

牛支原体(M.bovis)可以引起犊牛肺炎、关节炎、乳腺炎、角膜结膜炎等疾病,是一种牛的重要呼吸道病原体,目前M.bovis粘附宿主细胞的机制还不明确。研究表明,M.bovis表面存在的多种蛋白与致病菌在宿主体内的侵袭力与传播能力有关。我们通过分离表达多个M.bovis基因,最终获得了一个表达纤溶酶原结合蛋白的新基因,并命名为P18。该基因表达大小约为67ku的重组蛋白。通过western blot鉴定,重组表达的P18蛋白可以被M.bovis抗体识别。进一步的试验表明,P18蛋白还具有纤溶酶原结合活性,从而推测该基因表达的蛋白可能是M.bovis的一个粘附相关因子。     

牛支原体免疫相关性蛋白硫锌酰胺脱氢酶的筛选与鉴定

为鉴定牛支原体(M.bovis)菌体免疫相关蛋白及其免疫原性,本实验以M.bovis湖北株为样品,通过建立M.bovis全菌蛋白的双向电泳体系,获得了分辨率及重复性良好的双向电泳(2-DE)图谱。利用western blot技术进行筛选,鉴定得到多个M.bovis蛋白,其中一个分子量为68 ku,经过质谱分析和氨基酸一级结构比对确定该蛋白为硫锌酰胺脱氢酶(LipDH)。经原核重组表达,LipDH重组蛋白与M.bovis阳性血清的western blot反应为阴性,而Dot blot及以重组表达蛋白作为包被抗原的ELISA鉴定结果均为阳性。本研究为进一步研究LipDH的功能以及采用其重组蛋白用于该蛋白缺失的M.bovis疫苗株的鉴别检测方法的建立奠定了基础。     

水库来水量预测的进化神经网络法

利用遗传算法的全局空间寻优功能和BP网络映射能力强的优点，用遗传算法确定最优网络结构，建立了水库来水量预测进化神经网络（简称GA-ANN）模型，据此预测水库来水量。实例分析表明，该模型克服了BP网络输入层、隐含层节点确定的盲目性，适应性强，精度高，可供用于水库来水量预测。     

液压喷播在黄土地区边坡植被建植中的应用研究

液压喷播技术是从国外引进的边坡快速绿化播种工程技术，目前在我国南方得到大规模应用，但在水土流失较为严重的黄土地区应用效果不理想。为解决黄土地区喷播植被群落建设问题，开展了微环境改良技术（土壤改良、覆盖改良）、植物选择与配比、边坡坡向等不同处理措施对植被建植的影响研究。结果表明：边坡开挖水平阶截持水分量是未处理的1．75倍，初始植株保存数量较未处理高82．5％；覆盖稻草与遮光网下的截持水量是覆盖无纺布的1．14倍与1．71倍，最高，遮光网与无纺布覆盖下初始植株保存数量分别为麦草覆盖下的43％与52％；麦草比无纺布覆盖下植被盖度高5％～23．7％；柠条＋外来草种与唐古特白刺＋本地草种当年生长季末盖度可分别达到59％和56．5％，第2年为52．5％和77．5％。研究指出，黄土地区边坡土壤可蚀性强，喷播层易于流失，干旱、盐碱性突出等因素是造成喷播植被难以建成的主要原因，进行微环境改良、选择乡土灌木＋乡土草种组合可以成功建植液压喷播植被，实现持续效果。