非洲猪瘟病毒实时荧光LAMP检测方法的建立与应用

为建立一种快速简便、灵敏度高、准确性好的非洲猪瘟病毒恒温快速检测方法,根据ASFV P72基因保守区域设计特异性引物,优化引物浓度、反应温度、反应时间,建立了一种基于SYTO9荧光染料的非洲猪瘟病毒实时荧光LAMP快速检测方法。结果表明,该方法在63℃条件下扩增40 min,该方法灵敏度高,最低可检测限为10 copies/μL;特异性良好,与猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒、欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒无交叉反应;重复性好,变异系数低于5%。对70份临床样本检测,4份血液样品和9份脾脏样品检测阳性,与荧光定量PCR检测结果符合率为100%。该方法灵敏度高、特异性强、重复性好、符合率高,适用于非洲猪瘟现场快速诊断。     

黄芪多糖粉对犬瘟热和细小病毒抗体效价影响的研究

正本研究开展了黄芪多糖粉对犬瘟热、细小病毒二联活疫苗免疫效果的影响试验,本实验的目的旨在观察黄芪多糖粉对犬瘟热、细小病毒二联活疫苗免疫效果的影响,以评价黄芪多糖粉对犬临床的有效性。一、试验材料(一)试验药品黄芪多糖粉,由爱迪森(北京)生物科技有限公司提供,生产批号:1208041,产品批准文号:兽药字(2011)     

1种检测新城疫病毒的微滴式数字PCR方法

本研究旨在构建一种新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）的微滴式数字PCR方法（droplet digital PCR,ddPCR）。以NDV F基因为靶基因,选取保守区域设计引物和探针,构建了NDV ddPCR。对ddPCR反应引物和探针浓度、退火温度进行了优化,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行测定。试验结果表明,ddPCR的最佳引物和探针浓度分别为900和250 nmol·L^-1,最佳的退火温度为55℃。ddPCR的线性良好,最低检测下限为1.8 copies·μL^-1,与禽传染性支气管炎病毒等其他6种病毒无交叉反应,样本重复的变异系数为2.4%。结果提示,本研究建立的ddPCR方法灵敏度高、特异性强,可对新城疫病毒感染的临床样品进行定量检测。     

D型流感病毒研究进展

自2011年从猪体内分离到全球首株D型流感病毒以来,美国、墨西哥、法国、爱尔兰、意大利、中国、日本以及西北非等多个国家或地区报道D型流感病毒在猪、牛、羊群中广泛流行,甚至人抗体呈阳性。遗传进化分析表明D型流感病毒主要分为D/OK和D/660两个谱系,目前我国主要流行的是D/OK谱系,D/660谱系主要在北美地区流行。虽然D型流感病毒主要引起感染动物轻微的呼吸道疾病,但是其可能会进入血液引起病毒血症,给公共卫生安全带来严重威胁。随着D型流感病毒流行范围不断扩大,为提高人们对该病的认识,作者从D型流感病毒特性、流行病学、致病性以及诊断和防治等相关方面的最新研究进展进行概述。     

对玉米机械化收获技术推广的探讨

玉米是河南省商丘市第2大粮食作物,常年种植面积在33.3万hm2以上。近几年来,随着党的惠农政策实施以及农机购置补贴力度的不断加大,商丘市的玉米联合收获机拥有量逐年增加,玉米机械化收获水平不断提高。截至目前,全市玉米联合收获机保有量达1236台,     

新城疫病毒LaSota株检测用国家核酸标准物质的研制

为满足禽类及禽类产品质量安全检测领域对标准物质的需求,将新城疫病毒(NDV)LaSota株接种于9日龄SPF鸡胚,72 h后收集鸡胚尿囊液,经灭活后分装、冻干,制备新城疫病毒LaSota株核酸标准物质.对该标准物质开展了均匀性评估、稳定性评估、标准物质定值、不确定度评定和临床适用性评价.结果表明,该标准物质均匀性、稳定...     

北京1株犬源狂犬病病毒全基因组序列测定及分析

本试验旨在对北京1株犬源狂犬病病毒株(BJ2012ZW株)在全基因组水平上进行分子进化研究,比较与全国流行株及疫苗株之间的差异.试验采集犬脑组织以直接免疫荧光技术和内基氏小体检查方法进行检测,以RT-PCR扩增病毒核酸覆盖全基因组,对产物测序后进行遗传学分析.结果显示,BJ2012ZW株狂犬病病毒属于基因1型,与目前中国的主要流行株全序列同源性为83.9%~99.7%.与同样分离自北京的毒株BJ2011E和CNM1101C的核苷酸全序列同源性最高(99.7%),进化关系近.G蛋白主要抗原位点分析结果表明,BJ2012ZW株与国内疫苗株相比有部分抗原位点发生了替换.BJ2012ZW株属于中国目前的流行株,与目前国内所使用的疫苗株存在一定的差异.