Ⅰ群禽腺病毒4型IgG抗体间接ELISA检测方法的建立

利用纯化的 Ⅰ 群禽腺病毒4型重组Hexon蛋白,通过各反应条件筛选,建立了 Ⅰ 群禽腺病毒4型IgG抗体间接ELISA检测方法.结果显示,抗原最佳包被浓度为1μg/mL;最佳封闭液为1% 牛血清白蛋白;待检血清最佳作用浓度是400倍稀释,37℃孵育60 min;酶标抗体的最佳作用条件为稀释度1:8000,37℃孵育60 min;最佳显色时间为10 min.用所建方法对160只临床鸡只进行检测,同时与拭子PCR检测对比,一致性较好,表明该方法可有效用于临床检测.     

北京市伴侣动物(宠物)寄养机构现状分析

为了解伴侣动物(宠物)寄养机构建设现状,给优化管理政策措施提供支持,对北京市90家寄养机构的寄养方式、环境条件、饮食情况、收费情况、服务模式,以及伴侣动物主人的服务体验反馈、动物寄养适应性情况、发生纠纷原因、问题建议等方面进行了调查。结果显示:寄养方式主要有宠物店寄养、动物医院寄养和家庭寄养伴侣动物O2O平台;伴侣动物寄养机构从整体上看,寄养环境和服务管理模式较好,但存在寄养面积小、寄养收费不规范、纠纷多发等不足;寄养机构一般采用专人专事的服务管理模式,且根据寄养动物体型进行收费。结果提示:寄养O2O平台应提高寄养家庭的服务水平;行业需制定寄养机构寄养条件、环境要求等标准,用标准规范秩序,促进行业健康发展;相关部门应完善相关法律法规,提高伴侣动物寄养机构准入门槛。     

西门塔尔牛短期重复超排效果与分析

为研究西门塔尔牛短期重复超排效果,对6头优秀西门塔尔母牛进行重复超数排卵试验。第1次超排获得胚胎73枚,其中可用胚胎49枚;间隔30 d后,第2次超排,获得胚胎69枚,其中可用胚胎45枚。结果表明,对西门塔尔母牛进行重复超排对母牛的繁殖性能没有造成明显影响,两次超排结果差异不显著(P>0.05)。说明母牛经过1个情期的生殖与体况的恢复,其卵巢机能基本恢复到超排前的状态,重复超排是可行的。     

非洲猪瘟病毒LAMP可视化快速检测方法的建立与应用

旨在建立一种适用于现场快速检测非洲猪瘟病毒(ASFV)的可视化环介导等温扩增(LAMP)方法.采用针对非洲猪瘟病毒的p72基因编码区序列,设计合成2组引物,对引物进行筛选和反应条件优化,确定敏感性与特异性,并与荧光定量PCR方法进行比较.结果:建立的LAMP方法在63℃50 min内对ASFV的检测灵敏度为10 cop...     

积极防治猪胸膜肺炎病

我国是养猪大国 ,生猪存栏数约占世界总存栏量的 5 0 % ,猪肉产量占世界总产量的 44%。解放5 0多年来 ,在党和政府的领导下 ,广大农民在畜牧兽医人员的指导下 ,克服了种种困难 ,取得了以上好成绩。但是 ,由于我国是发展中国家 ,畜牧兽医科学技术与世界差距较大 ,特别是在兽医防病治病的工作上存在很多问题 ,对许多病如猪胸膜肺炎病等的危害没有引起兽医人员和养猪户的足够重视。最近几年 ,笔者到过不少猪场发现 ,当地有些兽医人员对此病不了解 ,往往把猪胸膜肺炎病当成猪瘟、猪肺炎、霉形体病等病来治疗 ,其结果可想而知钱也花了病也没治好 …     

不同冷冻方法对牛卵母细胞及孤雌胚发育的影响

研究了麦管和OPS管法冷冻以及OPS法中保护剂种类对牛卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响。结果发现,OPS管冷冻牛卵母细胞形态正常率、卵裂率、囊胚率极显著高于麦管法(P<0.05)。在OPS法中,应用两种保护剂冷冻后,卵母细胞形态正常率、卵裂率、囊胚率差异极显著(P<0.01);采取38℃与25℃温度平衡,冷冻后卵母细胞各发育指标差异不显著(P>0.05);采用4℃平衡,冷冻后的卵母细胞激活后没有出现囊胚,各发育指标极显著降低(P<0.01)。结果表明,OPS法可以有效地保护卵母细胞,保证其后孤雌激活;采用低温平衡会对孤雌发育的囊胚阶段有较大影响。     

I群禽腺病毒4型IgG抗体间接ELISA检测方法的建立

为建立I群禽腺病毒4型血清学检测方法,本研究利用纯化的I群禽腺病毒4型重组Hexon蛋白,通过各反应条件筛选,建立了I群禽腺病毒4型IgG抗体间接ELISA检测方法。结果显示,抗原最佳包被浓度为1 μg/mL;最佳封闭液为1%牛血清白蛋白;待检血清最佳作用浓度是400倍稀释,37℃孵育60min;酶标抗体的最佳作用条件为稀释度1:8000,37℃孵育60min;最佳显色时间为10min。用所建方法对160只临床鸡只进行检测,同时与拭子PCR检测对比,一致性较好,表明该方法可有效用于临床检测。     

非洲猪瘟病毒实时荧光LAMP检测方法的建立与应用

为建立一种快速简便、灵敏度高、准确性好的非洲猪瘟病毒恒温快速检测方法,根据ASFV P72基因保守区域设计特异性引物,优化引物浓度、反应温度、反应时间,建立了一种基于SYTO9荧光染料的非洲猪瘟病毒实时荧光LAMP快速检测方法。结果表明,该方法在63℃条件下扩增40 min,该方法灵敏度高,最低可检测限为10 copies/μL;特异性良好,与猪伪狂犬病毒、猪瘟病毒、美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒、欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪流行性腹泻病毒无交叉反应;重复性好,变异系数低于5%。对70份临床样本检测,4份血液样品和9份脾脏样品检测阳性,与荧光定量PCR检测结果符合率为100%。该方法灵敏度高、特异性强、重复性好、符合率高,适用于非洲猪瘟现场快速诊断。     

D型流感病毒研究进展

自2011年从猪体内分离到全球首株D型流感病毒以来,美国、墨西哥、法国、爱尔兰、意大利、中国、日本以及西北非等多个国家或地区报道D型流感病毒在猪、牛、羊群中广泛流行,甚至人抗体呈阳性。遗传进化分析表明D型流感病毒主要分为D/OK和D/660两个谱系,目前我国主要流行的是D/OK谱系,D/660谱系主要在北美地区流行。虽然D型流感病毒主要引起感染动物轻微的呼吸道疾病,但是其可能会进入血液引起病毒血症,给公共卫生安全带来严重威胁。随着D型流感病毒流行范围不断扩大,为提高人们对该病的认识,作者从D型流感病毒特性、流行病学、致病性以及诊断和防治等相关方面的最新研究进展进行概述。     

1种检测新城疫病毒的微滴式数字PCR方法

本研究旨在构建一种新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）的微滴式数字PCR方法（droplet digital PCR,ddPCR）。以NDV F基因为靶基因,选取保守区域设计引物和探针,构建了NDV ddPCR。对ddPCR反应引物和探针浓度、退火温度进行了优化,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行测定。试验结果表明,ddPCR的最佳引物和探针浓度分别为900和250 nmol·L^-1,最佳的退火温度为55℃。ddPCR的线性良好,最低检测下限为1.8 copies·μL^-1,与禽传染性支气管炎病毒等其他6种病毒无交叉反应,样本重复的变异系数为2.4%。结果提示,本研究建立的ddPCR方法灵敏度高、特异性强,可对新城疫病毒感染的临床样品进行定量检测。