两种外源钙对刺梨抗顶腐病和果实品质的影响

以“贵农5号”刺梨为试材,探究田间喷施不同浓度氨基酸钙和糖醇钙对刺梨抗顶腐病和果实品质的影响。结果表明,1 g/L氨基酸钙和3 g/L糖醇钙处理显著降低刺梨果实顶腐病发病率,并提高超氧化物歧化酶(SOD)活力和增加果实总酚、总黄酮含量;扫描电镜观测表明,两种外源钙处理下果皮结构致密性明显提升。与高浓度钙处理相比,0.25 g/L氨基酸钙和1.5 g/L糖醇钙均可显著提高果实单果质量从而增加单株产量,且氨基酸钙较糖醇钙对于提高果实可溶性固形物含量的效果更加明显。综上,幼果期田间喷施适当浓度的氨基酸钙和糖醇钙能诱导刺梨果实增强顶腐病抗性并提升果实品质。     

刺梨GGP和DHAR基因序列多态性及其与果实维生素C含量的关联分析

高含量的维生素C是刺梨果实的重要性状,挖掘与维生素C含量相关联的基因序列变异及单倍型对刺梨的品种改良具有指导意义。在21份野生刺梨资源中对GGP和DHAR基因进行PCR扩增和测序,分析基因序列多态性及其与果实维生素C含量的相关性。GGP基因在21份野生刺梨中共扩增出长度为2 035 bp的同源序列,其中包含22处变异位点,产生15种单倍型,在0.01显著性水平上,3个单核苷酸多态性(SNP)及Hap15与刺梨果实高含量维生素C相关;在0.05显著性水平上,3个SNP及Hap7与刺梨果实低含量维生素C相关;GGP基因单倍型存在网状进化。DHAR基因在21份野生刺梨中共扩增出长度为1 609 bp的同源序列,其中包含69处变异位点,产生9种单倍型,在0.05显著性水平上,8个SNP、9个InDel及Hap9与刺梨果实中低含量维生素C相关,1个SNP及单倍型Hap4～Hap6与刺梨果实中高含量维生素C相关;DHAR基因单倍型呈现扇形进化。GGP基因具有更高的单倍型多样性,DHAR基因具有更高的DNA多态性;GGP基因特异单倍型Hap15和DHAR基因特异单倍型Hap4共同存在于刺梨中时,可以使果实维生素C含量表现为高的状态;而GGP基因特异单倍型Hap7和DHAR基因单倍型Hap9同时存在于刺梨中时,可以使果实维生素C含量表现为低的状态。     

刺梨对土壤干旱胁迫的生理响应

 用土壤干旱胁迫的方法 ,发现刺梨 (RosaroxburghiiTratt .)的抗旱力甚弱 ,在黄壤上 ,其萎蔫系数高达2 2 .7%。受旱后 ,其叶水势、光合速率、叶绿素含量及叶绿素a/b比值都明显下降 ,轻度干旱时 ,其根中的NR活性迅速大幅度下降 ,叶中的SOD、POD活力及GA1+ 3 、IAA、ZRs含量也明显降低 ,根和叶中的可溶性总糖、还原糖、脯氨酸显著增加。正常情况下 ,刺梨根、叶、茎中NR活性比值约 1∶0 .4 5∶0 .11。在严重干旱胁迫时 ,茎和叶与其根相比更能够维持较高的NR活性     

基于EST-SSR标记与果实品质性状的贵州野生刺梨核心种质构建

采用10对EST-SSR引物和9个果实品质性状指标对收集的220份野生刺梨(Rosa roxburghii Tratt)资源的遗传多样性进行分析,结果表明:10对EST-SSR引物共扩增出多态性条带27条,多态百分率为76.67%;9个品质性状中平均单果质量、可滴定酸、固酸比、维生素C和类黄酮含量的变异系数达到20%以上;说明该220份贵州野生刺梨种质资源遗传变异丰富,遗传多样性分布范围较广,适于进行核心种质的构建研究。进一步将9个品质性状指标进行6级分类,并处理为9个品质标记共产生54条多态带,与EST-SSR标记一起,采用Nei’s遗传距离进行UPGMA聚类,同时采用位点优先取样策略进行核心种质构建,以表型保留比例、均值差异百分率、方差差异百分率、极差符合率、变异系数变化率、多态性位点百分率、Nei’s基因多样性指数、Shannon’s信息指数等对核心种质进行评价,并利用主坐标分析法对核心种质进行确认。结果表明:构建的32份核心种质在分子水平,表型水平及地区分布上都能够代表原种质的遗传多样性。     

无刺1号刺梨快繁体系的建立

通过对无刺1号刺梨在初代培养、继代培养、生根培养过程中不同植物生长调节剂的筛选,建立高效茎段快繁体系。以无刺1号当年生茎段为材料,利用不同植物生长调节剂对茎段进行腋芽诱导、增殖及生根,并进行炼苗移栽。结果表明：无刺1号茎段组培的最佳时期是4-5月,最佳消毒方案是30 s 75%酒精+10 min 0.1% 升汞;适合无刺1号初代培养的培养基为MS+ 2.5 mg?L-1 6-BA+ 0.1 mg?L-1 NAA,萌芽率达90.63%;增殖培养基为MS+ 1.5 mg?L-1 6-BA+0.1 mg?L-1 NAA,增殖系数为3.94;在1/2MS+ 0.3 mg?L-1 IBA+ 20 g?L-1 蔗糖+ 0.5 g?L-1 活性炭的培养基上,无刺1号的生根率为87.30%,驯化移栽成活率达87.74%。     

不同刺梨品种的光合特性

对刺梨的5个重要品种：贵农1号、贵农2号、贵农5号、贵农6号和贵农7号的营养枝和结果枝叶片的光合速率、光补偿点和光饱和点进行了测定。结果表明，叶片光合速率（Pn）由强到弱的顺序为：贵农6号〉贵农7号〉贵农2号〉贵农1号〉贵农5号；坐果情况会对光合速率产生重要影响，结果枝叶片的Pn高于营养枝叶片的Pn。各品种光补偿点由低到高为贵农2号〈贵农7号〈贵农1号〈贵农5号〈贵农6号；光饱和点由高到低为贵农7号、贵农2号〉贵农1号、贵农5号〉贵农6号，较低的光补偿点、较高的光饱和点是刺梨品种丰产的一般特点。     

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为筛选出果实品质良好的刺梨资源,以收集到的贵州11个县市共242份野生刺梨为材料,测定单果重、可溶性固形物、可滴定酸、可溶性总糖及维生素C含量等品质指标.结果表明:单果重,福泉市刺梨样品最大,平均为(14.04±3.73)g;最小的是绥阳刺梨,为(9.62±2.83)g.平均可溶性固形物含量,遵义样品最高,为(14.07±3.84)％;兴义样品最低,为(10.54±1.34)％.平均可滴定酸含量,福泉市最高,为(0.86±0.20)％;罗甸县的最低,为(0.59±0.12)％.可溶性总糖含量,平坝县的样品最高,平均为(3.25±1.16)％;罗甸县的最低,为(1.96±0.66)％.维生素C含量,遵义样品的最高,平均含量达2318.38 mg/100g;惠水的最低,为(1035.00±96.55)mg/100g.结论:贵州不同地区野生刺梨果实品质表现存在很大的差异,具有筛选出优良或特色资源的巨大潜力,其中盘县、安龙和遵义地区的刺梨可作为良好的资源进行开发利用.     

贵长猕猴桃果实生长发育及矿质养分积累规律

以贵长猕猴桃(Actinidia deliciosa cv Guichang)为试材,生育期定期取样测定果实大小、鲜重和干物质变化以及果实内矿质元素的变化,以为果实和树体营养管理提供参考.结果 表明:贵长猕猴桃果实生长发育过程大致可分为三个时期,即迅速生长期(5月中旬--7月上旬)、缓慢生长期(7月上旬—8月中旬)和停...     

刺梨RNA的有效提取及Actin基因片段的克隆

[目的]为刺梨的分子生物学研究奠定技术基础。[方法]分别采用改进的CTAB-LiCl法和CTAB法提取刺梨果实中的总RNA和基因组DNA。对刺梨总RNA进行反转录,生成cDNA第1链。根据GenBank上的蔷薇科肌动蛋白(Actin)基因保守序列设计1对跨内含子引物Actin1和Actin2,以cDNA第1链和基因组DNA为模板进行RT-PCR扩增。将含有目的片段的凝胶进行回收纯化,克隆到PMD18-T载体上,转化大肠杆菌TG1感受态细胞,选取带有目的片段的重组质粒进行测序和序列分析。[结果]将目的片段回收后克隆于T载体,可获得298 bpActin基因的cDNA序列。克隆所得核苷酸序列与蔷薇、桃和葡萄的核苷酸序列相似性达83%,与富士苹果、甜菜等的相似性也超过80%。刺梨Actin基因编码的氨基酸序列与梨的相似性最高(达97%),其次是葡萄、花生、大豆、棉花和马铃薯,而与水稻、拟南芥等的相似性也达90%以上。[结论]Actin基因跨内含子,用该Actin基因片段作内标可以减少DNA污染。     

刺梨园覆盖不同颜色地膜的效果分析

为探索不同颜色地膜覆盖对刺梨园土壤、刺梨树枝梢生长及成花坐果的影响,筛选适宜于刺梨园覆盖的适宜地膜类型,试验以自然生草不覆盖为对照,设置四种不同颜色（无色T1、红色T2、绿色T3及黑色T4）地膜覆盖处理,地膜材质均为PE,比较分析各处理下果园土壤物理性质及微生物碳含量、刺梨树枝梢生长量、成花坐果及产量表现等的差异。结果表明：（1）地膜覆盖均可不同程度提高土壤温度,并导致物候期提前,其中覆盖黑色和红色地膜的处理开花期较对照提前4～5d。（2）覆盖黑色地膜处理下土壤物理参数如盐度、体积含水率、总溶解固体、电导率和介电常数等整体高于对照,其余几种地膜处理无此效果,但其土壤物理性质更趋稳定。（3）覆盖黑色和红色地膜可显著抑制刺梨园杂草生长,覆盖区域内杂草生物量较对照分别减少88.36%和89.5%,显著低于其余处理及对照。地膜覆盖均能增加叶片的叶绿素含量,且绿色地膜对促进刺梨新梢生长最为有利。（4）覆盖无色和黑色地膜均可显著促进刺梨成花,前期坐果量较对照分别增加约43.8%和37%,最终覆盖无色地膜处理的增产效果最为突出,较对照提高52.55%,而黑色地膜因同时会导致果实发育过程中的落果数增加从而其最终产量较对照仅增加14.39%。研究结果说明不同颜色地膜在改善或稳定土壤物理参数、促进树体生长、抑制杂草及提高产量等方面各具优势,生产上可根据需要选择使用,其中无色地膜对提高产量的效果尤其明显,可作为刺梨覆膜栽培的优先推荐地膜类型。