刺梨果实主要抗氧化组分对机械伤及 UV-B 胁迫的响应

 以‘贵农5 号’刺梨为材料,研究了果实发育过程中主要抗氧化组分对机械伤及UV-B 胁迫的响应。结果表明：机械伤和UV-B 处理均可诱导刺梨果实中H2O2 等自由基的产生,并促使膜脂过氧化水平增加;但抗氧化系统对两种胁迫的响应模式不尽相同：机械伤胁迫下抗氧化酶POD、SOD 以及非酶组分AsA、GSH 均受快速产生的H2O2 等自由基诱导,表现出快速应激响应;之后这两种抗氧化酶呈现出逐渐降低的趋势,而AsA 和GSH 则一直保持在较高水平。在UV-B 处理中,需要较长时间额外增加UV-B辐射才会有效增加成熟果实中SOD、AsA 及GSH 等组分的活性或积累;而在减弱紫外处理时,SOD、POD和GSH 的变化均表现出前期升高后期回落的趋势。机械伤和UV-B 胁迫下,CAT 和APX 等酶只是间或或根本无法检测到活性。总体上看,POD + SOD 以及AsA + GSH 的共同作用是刺梨果实在这两种胁迫下抗氧化反应的主要机制。     

刺梨CDPK基因家族的鉴定及其对供钙水平的表达响应

【目的】CDPKs是植物中广泛存在的Ca²⁺感受器,鉴定刺梨(Rosa roxburghii Tratt.)CDPK基因家族成员,并探索其对不同供钙水平的表达响应。【方法】采用生物信息学方法鉴定并分析Rr CDPK基因家族,通过转录组测序及实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,q RT-PCR)分析其组织表达特异性及在不同供钙水平下的表达响应。【结果】从刺梨基因组中共鉴定出16个具丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶和EF-hand结构域的CDPK基因(命名为Rr CDPK1～16),结构分析显示蛋白长度在393～561 aa之间,分子质量在44.02～62.98 ku之间,平均等电点6.05;家族基因结构差别较大,外显子数量为2～10个,包括6个保守基序;亚细胞定位预测Rr CDPKs在细胞核和多种细胞器均有定位,主要定位于细胞质;进化分析可分为4个亚族,且与草莓的亲缘关系最近,其次是苹果,较远为拟南芥和水稻。启动子顺式作用元件分析表明,Rr CDPKs大多含光响应元件、多种激素响应元件及胁迫响应元件等。不同器官及果实发育时期的转录组数据显...     

利用CTAB法从刺梨中提取核酸的效果分析

高质量DNA和RNA的获得是进行分子标记、基因克隆、分子杂交等分子生物学实验的基础.从植物组织中提取核酸的方法较多,针对不同植物主要有SDS法、CTAB法、异硫氰酸胍法等[1].刺梨作为原产于我国的一种新兴果树,近年来对其种质遗传多样性及特殊、珍稀性状的分子生物学研究逐渐受到重视.     

缺铁胁迫对川梨的生理影响

 以野生川梨为材料 ,采用溶液培养的方法 ,研究了缺铁胁迫对其生理的影响。结果表明 ,缺铁使川梨叶绿素a、叶绿素b和叶绿素总量明显降低 ;光合速率显著下降 ,而且光合速率的降低先于叶绿素含量的减少。川梨在介质供铁浓度低于 2 5 μmol·L-1时才发生失绿症状。在缺铁胁迫下 ,叶内POD和CAT活性降低 ,但降低幅度和时间不尽相同 ,而且CAT比POD与叶绿素的相关性更显著。缺铁叶内各营养元素含量高于正常供铁处理 ,并表现出不同的变化规律 ;活性铁分别与叶绿素、光合速率呈极显著正相关 ,可作为铁营养生理诊断指标。     

无刺刺梨茎段快繁体系的建立

以“无刺2号”当年生营养枝为外植体,采用不同浓度的植物生长调节剂进行组培试验,研究了不同消毒方式、激素浓度对外植体消毒效果、初代培养、增殖培养及生根培养的影响,以期建立较为成熟的无刺刺梨组织培养体系。结果表明：外植体经清水冲洗后用75%的酒精消毒15 s,以0.1%的升汞消毒8 min,存活率为85.28%;受污染后的植株在超声洗涤液中洗涤,洗涤液中添加多菌灵60 mg·L^-1和青霉素40 mg·L^-1,同时配置培养基时添加多菌灵60 mg·L^-1和青霉素40 mg·L^-1是最佳处理;适合“无刺2号”初代培养的培养基为MS+1 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,萌芽率达92.04%;增殖培养基为MS+0.2 mg·L^-1 6-BA+0.1 mg·L^-1 NAA,增殖系数为3.9;在1/2MS+0.1 mg·L^-1 IBA+20 g·L^-1蔗糖+0.5...     

外源Ca2+、Mg2+、Cu2+和吖啶黄素对刺梨果实维生素C合成的影响

【目的】研究二价金属离子和传统抑制剂对刺梨果实维生素C合成的调控作用。【方法】以‘贵农5号’刺梨为材料,采用离体喂饲和活体注射相结合的方法,研究Ca2+、Mg2+、Cu2+等二价金属离子及吖啶黄素、石蒜碱等有机抑制剂对刺梨果实半乳糖内酯脱氢酶（GalLDH）活性和维生素C（AsA）合成的影响。【结果】Ca2+、Mg2+两种离子对初纯化的GalLDH酶活性有一定的促进作用,Cu2+则显著抑制其活性;当用金属离子与AsA合成底物半乳糖内酯（GalL）共同喂饲果肉时,Ca2+、Mg2+两种离子未有效促进AsA合成,Cu2+处理下的刺梨果肉中AsA含量甚至显著降低;在刺梨果实发育过程中,注射Ca2+对活体果实AsA合成有明显促进作用,Mg2+的作用不明显,而Cu2+依然表现出对AsA合成的抑制作用。吖啶黄素能抑制初纯化GalLDH酶液约70%的活性,而石蒜碱的抑制作用较小（约30%）,但两者在离体喂饲处理中对AsA合成表现出相似的抑制效果;活体注射处理时,吖啶黄素在处理后期对AsA合成表现出较明显的抑制作用,石蒜碱则无此效应。【结论】外源增Ca2+可促进刺梨果实AsA合成和积累,而Cu2+和吖啶黄素则有抑制作用。     

刺梨叶片中总黄酮和水溶性多糖的提取工艺

采用水煮浸提法综合提取刺梨叶片中的总黄酮和水溶性多糖,通过单因素实验筛选对提取有显著影响的因素进行正交实验,分析获得较优工艺参数。结果表明,综合提取总黄酮和水溶性多糖的较优的工艺参数为：固液比1：30,温度90℃,pH=10。提取液通过炭粉吸附法获得粗多糖的纯度为21．37％,粗黄酮的纯度为53．26％。提取液通过大孔吸附树脂法获得粗多糖的纯度为18．27％;粗黄酮的纯度为36．27％。用水煮浸提法,对刺梨叶片中黄酮和多糖共同进行提取是可行的,并通过大孔树脂或活性炭将二者初步分离。     

秦美猕猴桃果实的生长发育规律

为摸清秦美猕猴桃品种在贵州中部地区的生态及果实的生长发育规律,以秦美猕猴桃为试材,生育期定期采样,研究了果实纵横径生长、体积变化、单果鲜重和干物质重变化规律。结果表明,在贵阳地区,秦美猃猴桃果实生长发育过程大致可分为三个时期。（１）迅速生长期：从５月上旬至６月下旬;（２）缓慢生长期：从６月下旬至７月下旬;（３）停滞生长期：从８月上旬至９月中旬果实成熟。果实生长与新梢生长呈消长关系;果实纵横径相对生     

刺梨半乳糖内酯脱氢酶的序列特征和部分反应特性

分析和研究了从刺梨中克隆的维生素C合成关键酶半乳糖内酯脱氢酶的氨基酸序列特征及其基本生化反应特性.结果表明,该基因含有一段线粒体靶信号肤序列、2个跨膜区、一个典型的FAD结合域以及1个天冬酰胺糖基化位点、8个蛋白激酶C磷酸化位点、11个酪蛋白激酶2磷酸化位点、2个酪氨酸激酶磷酸化位点和4个N端十四(烷)酰化位点等潜在功能性或翻译后修饰位点.丫啶黄素显著抑制GalLDH活性,二价金属盐CuSO4和ZnSO4有部分抑制作用,而石蒜碱几乎没有作用.     

生育期猕猴桃果实中营养元素积累规律研究

以秦美猕猴桃为试材,研究了猕猴桃果实生育期的干物质和N、P、K、Ca、Mg等大量元素及Zn、Cu、Fe、Mn等微量元素的积累规律。结果表明：在果实发育的整个过程都有干物质的不断积累,但不同时期其积累量和积累强度不同;大量元素中除Ca在果实中稳定积累之外,N、P、K、Mg均在夏季出现负积累而且起伏较大;微量元素中,果实吸Fe最多,但在7月之后就不断“流失”,Zn、Mn也较类似,Cu的吸收比较稳定。新梢生长对果实积累营养元素影响较大。