Ras-GRF1蛋白对小鼠学习和记忆能力的影响

通过避暗穿梭试验、跳台试验、水迷宫试验和自主活动试验观察Ras-GRF10/0鼠和野生鼠2种小鼠行为学变化,来研究Ras-GRF1蛋白对学习和记忆能力的影响。结果显示,在避暗试验中Ras-GRF10/0鼠被电击的次数多于野生鼠,且在第1天有显著差异(P0.05);在跳台试验中,野生鼠表现出的学习记忆能力也强于基因敲除鼠;在水迷宫定位航行试验中,基因敲除鼠的潜伏期均长于野生鼠,且在第2天有显著差异(P0.05),第3、4、5、6、7天都有极显著的差异(P0.01);在空间探索试验中,基因敲除鼠和野生鼠第1次穿越平台的时间和穿越平台的次数均无显著差异;在自主活动试验中,基因敲除鼠和野生鼠的活动次数没有显著性的差异,但是野生鼠的活动次数都多于敲除鼠。结果表明,野生鼠的学习和记忆能力均强于Ras-GRF10/0鼠,且野生鼠的中枢神经兴奋性高于基因敲除鼠,反映出Ras-GRF1蛋白缺失,对小鼠学习和记忆能力有一定程度的损伤。     

猪戊型肝炎病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

根据GenBank中注册的AJ272108等序列,参考有关文献,利用引物设计相关软件在HEV ORF2片段的保守区设计并合成1对引物及探针,采用TaqMan探针建立了荧光定量PCR法。以鉴定正确的质粒为模板建立标准曲线,Ct值线性范围为14.89~27.02,相关系数为0.996。本试验建立的猪戊型肝炎病毒ORF2片段基因实时荧光定量PCR方法扩增效率高、线性范围广,为快速检测猪戊型肝炎病毒的绝对定量分析奠定了基础。     

哺乳动物胚胎冷冻保存研究进展

哺乳动物胚胎冷冻保存效果受冷冻保护剂、冷冻方法、解冻方法等多种因素影响,其中冷冻方法是一个关键性因素.目前胚胎冷冻方法主要有常规慢速冷冻法和玻璃化冷冻法两种.常规慢速冷冻法是指利用甘油、乙二醇等做冷冻保护剂通过缓慢降温的方式进行胚胎冷冻;玻璃化冷冻法是指利用高浓度的冷冻保护剂通过快速降温的方式进行胚胎冷冻.与常规慢速冷冻法相比,玻璃化冷冻法简化了操作过程,大大缩短了操作时间,不需昂贵的程序控制冷冻仪.     

应用巢式PCR检测猪戊型肝炎病毒核酸及其序列分析

根据GenBank注册的AJ272108等序列,利用Oligo6应用软件设计内外2对引物,采用RT-PCR技术时本实验室分离的猪戊型肝炎病毒进行探索性扩增,并对测定的序列进行分析,结果用套式引物扩增出了目的条带,序列·分析表明该序列属于基因Ⅳ型,并与其核苷酸同源性在85.6%～94.8%之间,氨基酸同源性在99.1%～100%之间.而与基因Ⅲ型核苷酸同源性最低,与基因Ⅱ型氨基酸同源性最低.     

日粮中锌、铜、锰和硒对生长獭兔生产性能及生化指标的影响

选用吉戎-Ⅱ生长獭兔随机分组，各组日粮中分别添加锌、铜、锰和硒，其中锌的添加量为0、40、80、120mg／kg，硒为0、0．1、0．25、0．4、0．55、0．7mg／kg，锰为0、5、15、25、35、45mg／kg，铜为0、10、20、40、80、160mg／kg。结果表明，4种元素均能影响生长獭兔的生长性能。试验所选相关酶CuZn-SOD、GPX、Mn-SOD、CP的活性能较好地反映此4种元素在獭兔体内的代谢状况。肾脏、肝脏中Zn和Se的沉积量能较好地反映饲粮Zn和Se在獭兔体内的沉积情况。胫骨和被毛中锰浓度则可以作为评价锰吸收利用率的敏感指标。综合各项指标得出，吉戎-Ⅱ獭兔日粮中锰、锌、铜、硒的适宜添加量分别为35、80、40、0．25mg／kg。     

SPRN0/0型小鼠与C57BL/6野生鼠大脑中miRNAs的差异表达

应用荧光定量PCR及基因芯片技术,检测小分子RNA(microRNA,miRNA)在SPRN0/0型小鼠与C57BL/6野生鼠大脑中的差异表达,探讨SPRN基因敲除后小鼠大脑中miRNAs相对表达变化,对检测部分差异表达的rmiRNAs进行验证.结果表明:与正常标本相比,SPRN0/0型小鼠大脑中miR-135a、-24-2*、-146a、-7a、-380、-448、-128和-152的表达量均显著下调,其中miR-24-2*、-380、-448、-152均下调1/10以上,miR-135a、-146a、-7a均下调1/2以上.miRNAs的这些变化可能与Shadoo蛋白的生理功能有关.     

酵母双杂交系统研究及其应用进展

分子生物学技术的发展和人类基因组计划的完成,使人类对基因的结构和功能的认识日益加深。基因工程领域又迎来了一个新的时代——功能基因组时代,它的任务就是解释大量生物体基因组测序结果,尤其是大量未经描述之基因的功能及其相应的蛋白质产物及功能。系统综合分析蛋白-蛋白相互作用将为了解蛋白质的功能提供重要的信息。酵母双杂交是目前研究蛋白-蛋白相互作用的所有方法中较为简便、灵敏和高效的一种方法。酵母双杂交系统（yeast two-hybrid system）在酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）中研究蛋白质间相互作用的一种非常有效的分子生物学方法。是一种新的直接于细胞内检测蛋白-蛋白相互作用,并且灵敏度很高的遗传学新方法,并被推广到了诸如细胞周期调控、信号传导、肿瘤基因表达等多个研究领域。