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为建立梅山猪骨髓间充质干细胞(BMSC)体外分离培养方法及对梅山猪BMSC的生物学特性进行分析,本研究采用全骨髓法分离培养并传代梅山猪BMSC,倒置相差显微镜下观察细胞形态,以计数法检测细胞增殖状况,流式细胞术检测细胞周期,细胞压片进行染色体分析,免疫细胞化学和RT-PCR法检测细胞表面标志和转录因子的表达情况,并检测成骨和成脂分化能力.结果显示:梅山猪BMSC体外生长良好,细胞形态呈成纤维细胞样,具有稳定分裂增殖能力;CD29、CD44、CD90等表面标志基因及Fou5F1、Sox2、Nanog等转录因子基因表达呈阳性,CD45、Lin28表达呈阴性;在特定诱导液作用下,BMSC可分化为成骨样细胞及成脂肪样细胞.采用全骨髓法成功分离培养出大量纯度较高的梅山猪BMSC,其生长状态良好,可作为后续BMSC相关研究的种子细胞. 相似文献
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为研究大豆卵磷脂对妊娠母猪繁殖性能的影响,选取妊娠时间相近的长大二元杂种母猪,随机分成4组,每组4个重复,每个重复约30头母猪。试验时间从妊娠第100天开始至产后7 d结束,对照组只饲喂基础饲粮,3个试验组每天2次在基础饲粮中分别添加大豆卵磷脂、嘉两头和其它同类产品,添加量为50 g/d。分别记录母猪采食量、窝产仔数、窝产活仔数、窝产合格仔数、产程、仔猪初生重、脐带直径、胎盘面积和厚度等指标。结果发现:1)嘉两头组和大豆卵磷脂组的产前2周平均日采食量高于对照组,分别提高5.08%和2.82%。2)产仔方面,嘉两头组和大豆卵磷脂组的窝产活仔数[分别为(10.70±0.23)和(10.71±0.22)头]和窝产合格仔数[分别为(10.36±0.23)和(10.32±0.22)头]均显著高于对照组[(分别为(10.00±0.26)和(9.56±0.26)头],而同类产品组窝产活仔数与对照组差异不显著(P0.05)。初生个体重,3个试验组与对照组相比均有提高的趋势,但差异均不显著(P0.05)。3)嘉两头组和大豆卵磷脂组均对母猪产程具有缩短的趋势。嘉两头组、大豆卵磷脂组、同类产品组和对照组难产率分别为1.74%、3.74%、8.11%、9.38%。4)与对照组相比,嘉两头组有提高脐带直径、胎盘表面积、胎盘厚度和胎盘总重的趋势。因此,在妊娠母猪饲粮中添加嘉两头具有改善母猪生产性能的作用。 相似文献
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奶山羊胎儿成纤维细胞的分离培养及脂质体法转染研究 总被引:4,自引:1,他引:3
为获得转基因克隆羊的供体细胞,本试验采用组织块培养法结合胰蛋白酶消化法分离纯化得到奶山羊胎儿成纤维细胞(gFFs),绘制了生长曲线,鉴定了胎儿细胞性别及核型特征,并且研究了脂质体量、质粒量和转染时间对gFFs的绿色荧光蛋白(GFP)转染效率的影响。结果表明:该培养体系可以支持奶山羊胎儿成纤维细胞的体外生长,其细胞形态为梭形,高度汇合后呈火焰状,增殖特性以及核型特征均为正常,性别鉴定显示该奶山羊胎儿细胞为雌性,符合体细胞转基因克隆的基本要求。24孔板中采用脂质体转染试剂4.0μL、质粒DNA 1.2μg,转染6 h可以获得最佳的转染效果,转染效率达4.21%。 相似文献
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为了评价布舍瑞林注射液对靶动物猪的安全性,将16头断奶母猪随机分为4组(每组4头),即布舍瑞林1倍、3倍、5倍推荐剂量组以及空白对照组。试验组连续3 d单次颈部肌内给药,对照组不给药。于给药前和最后1次给药结束后1 h内收集血液,测定血常规和血液生化指标;试验结束时对空白对照组和5倍剂量组猪的脏器进行病理学观察;记录试验期间猪的体温变化。结果显示,与空白对照组相比,各给药组猪的体温无显著变化(P>0.05);各给药组的平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)较处理前显著升高(P<0.05),无机磷(P)较处理前显著降低(P<0.05);5倍剂量组钙离子(Ca2+)较处理前显著降低(P<0.05),处理后P比同期对照组也显著降低(P<0.05);与对照组相比,各内脏器官未见明显的病理变化。综上所述,3倍及以下剂量布舍瑞林注射液对靶动物猪是安全的。 相似文献