猪李氏杆菌病的防治

猪李氏杆菌病是因健康猪采食了被李氏杆菌污染的饲料或饮水,通过消化道和呼吸道等途径传染的一种散发性传染病.临床上以中枢神经系统机能障碍为特征.本病多发生在春、冬季节,死亡率较高. 体温在病初多为轻热,后又降为常温下.多数猪呈现神经质,有时后躯不全麻痹,前肢有特殊的"高跷"运动,或盲目前进,抵物不动,倒地后全身抽搐,四肢呈游泳状乱划,口吐白沫,叫声嘶哑.     

荔枝水孔蛋白基因LcPIP的克隆与组织特异性表达研究

 从荔枝组织中克隆了9个质膜水孔蛋白基因（LcPIP）的cDNA全长序列，并研究了其组织特异性表达。结果表明：9个LcPIP分为PIP1和PIP2两类。定量PCR结果表明9个LcPIPs在荔枝的不同组织中均表达，其中LcPIP1-2、LcPIP1-4、LcPIP2-1、LcPIP2-2在花中的表达量相对较高，LcPIP1-1在茎中相对较高，LcPIP1-2在果肉中较高，LcPIP2-5在种子中的表达量仅次于果皮，而LcPIP1-3在叶中最高，LcPIP2-4在根中最高。LcPIP1-1、LcPIP2-4、LcPIP2-5在果皮中表达量较高，而LcPIP2-3在果皮中特异表达，且在所有成员中表达量最高，可能与果皮组织水分运输有关。     

采前香菇多糖处理对妃子笑荔枝果实采后生理及抗病性的影响

研究荔枝果实采前喷施0.5 mg/mL香菇多糖对采后常温贮藏过程中的生理效应及抗病性的影响。结果表明：采收前香菇多糖处理有效地降低了果实的呼吸强度和细胞的膜脂过氧化程度，并延缓了花色苷降解，抑制了荔枝果实果皮的褐变进程；轻微抑制了过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性的变化。此外，采前喷施香菇多糖还提高了果皮中的β-1，3-葡聚糖酶(GLU)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性。由此表明，采前喷施香菇多糖可维持细胞膜的完整性而延缓荔枝果实的衰老，并通过诱导荔枝果实的抗性来减少采后病害的发生。     

白细胞介素-2的研究进展与应用

白细胞介素-2又称T淋巴细胞生长因子,是T淋巴淋巴细胞受抗原刺激后所分泌的具有免疫调节作用的淋巴因子.白细胞介素-2除了能在体外维持T淋巴细胞长期增殖与分化外,还具有增强自然杀伤细胞的杀伤活性及促进B细胞分化与增殖的能力,以及诱导淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)产生等重要生物学作用.研究发现,白细胞介素-2在抗肿瘤、抗毒素、免疫调节及感染性疾病的治疗等方面具有重要作用.     

荔枝能荷水平及能量相关基因表达与采后褐变关系的研究

为了揭示荔枝果实采后能量调控规律及其与衰老的关系,以‘南岛无核’荔枝果实为材料,研究自然能荷水平（清水浸泡30 min,25 ℃贮藏,对照）;低能荷水平（2,4–二硝基苯酚,即DNP浸泡30 min,25 ℃贮藏）;较高能荷水平（5 ℃低温贮藏）等3种能荷水平状态下果皮衰老变化与能量、能量相关（生成、转运、耗散）基因表达的关系。结果表明：与对照相比,DNP处理（低能荷水平）明显促进了荔枝果实衰老,5 ℃低温贮藏（高能荷水平）果实衰老缓慢。DNP处理,LcAOX1在6 h表达量上调,果实在24 h开始大量褐变,LcUCP1的表达受到明显抑制,LcSnRK2的表达水平上调时间提前,表达水平提高。在荔枝果实贮藏后期,对照和DNP处理,果实能荷水平较低,果实衰老严重时,LcAAC1、LcAOX1、LcUCP1表达水平也出现下降。5 ℃低温贮藏,LcAAC1、LcAOX1、LcUCP1和LcSnRK2的表达量均保持在较低水平。荔枝果实采后能荷水平下降是导致果实快速衰老的重要因素之一,LcSnRK2和LcAAC1是荔枝果皮能量变化的敏感基因,对能量匮乏反应快,能荷水平下降可诱导LcSnRK2和LcAAC1表达上调。LcAOX1和LcUCP1表达量上调与荔枝果实衰老同步,它们的表达水平提高可以作为荔枝果实采后开始走向衰老的参考标志。     

基于SSR和InDel标记的海南荔枝种质资源遗传多样性分析

为了解232份主要来自海南的栽培荔枝、半野生荔枝和野生荔枝的遗传多样性及其演化地位,摸清荔枝品种中存在的同名异物和同物异名问题;本研究依据获得的荔枝EST序列和基因组序列开发了一批SSR和InDel标记,利用这些标记对232份荔枝种质资源进行了遗传多样性研究;取6个荔枝品种DNA为模板,筛选出18对SSR引物和12对InDel引物应用于遗传多样性研究,检测到基因位点141个,等位基因变异数范围为2~11个,平均4.70个,多态性位点为139个,多态性位点比率是98.58%。UPGMA聚类分析发现,232份荔枝种质资源的遗传相似系数是0.66~1.00;发现SSR引物的多态性大于InDel引物;在遗传相似系数为0.76处,供试材料分为15类,多数来自海南的荔枝资源能一起聚类,海南11份野生荔枝资源分别聚类在5个类群中,说明海南野生荔枝资源的遗传多样性较丰富。研究将为进一步开展荔枝遗传改良和育种提供依据。     

牛病毒性腹泻检测技术研究进展

近年来牛病毒性腹泻病的诊断技术，特别是在分子生物学诊断技术上取得了显著的成就。本文从BVD的病毒分离鉴定、血清学诊断方法、免疫学诊断方法以及分子生物学诊断技术等几个方面的进展进行了综述。     

AA肉鸡IFN-γ的表达及蛋白结构的初步预测

为了进一步研究肉鸡Ⅱ型干扰素(ChIFN-γ)蛋白的结构与功能,将新城疫Ⅳ系苗接种于9～11日龄SPF鸡胚尿囊腔中,诱生ChIFN-γ,提取脾脏总RNA,经过RT-PCR扩增出ChIFN-γ基因cDNA,测序后亚克隆至原核表达载体pProEXTMHTb中,转化大肠杆菌DH5α,用IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE及Westen Blot检测,利用DNAStar软件包中的Editseq将ChIFN-γ核苷酸序列翻译成氨基酸序列,然后利用Protean软件进行氨基酸序列分析,对蛋白的二级结构进行初步预测,利用自动比较蛋白同源建模的服务器Swiss-Model对ChIFN-γ的氨基酸序列进行三级结构预测。结果显示,所克隆的ChIFN-γ序列大小为495bp,与Digby和Lowenthal首次克隆的鸡Ⅱ型干扰素的同源性为99.8%。表达出预期大小(18ku左右)的融合蛋白,可以与His单克隆抗体发生特异性反应,蛋白质结构预测表明,ChIFN-γ蛋白具有丰富的二级结构和多处抗原指数较高的区段,其解螺旋最低能量值为-4245.698kJ·mol-1,有6个α螺旋结构。     

农杆菌注射法瞬时转化荔枝果实组织的研究

为了寻找一种高效的荔枝果实瞬时基因表达方法,本研究以荔枝品种‘新球蜜荔’（Litchi chinensis Sonn. var. ‘Xinqiumili’）为试材,利用农杆菌注射法对荔枝果实组织进行转化,研究了果实发育时期、菌株种类、注射部位、取样时间、菌液浓度等对转化效率的影响。结果表明：选择果肉已完全包裹种子的Ⅱb期果实进行连体注射,在果柄、果皮、种子、果肉分别注入OD₆₀₀值为2.4的农杆菌菌株GV3101,4 d后取样进行检测,4个组织的GUS染色率较高。本研究成功建立了适用于荔枝果实的基因瞬时表达系统,为今后快速鉴定荔枝果实相关基因功能提供了基础。     

不同授粉隔离方式对荔枝杂交育种效率的影响

荔枝雌雄同株、花量大,杂交育种效率低下。为提高花期不遇荔枝品种的单位时间杂交效率,研究了几种授粉隔离方式的杂交育种效率。结果表明:在100目防虫网的网室隔离条件下,杂交前后都套袋具有最高的杂种率,其次为授粉前套袋隔离;网室内不进行套袋隔离直接授粉是最有效的授粉方式,荔枝坐果率最高,虽然杂种率最低,但单位时间内获得的杂种植株最多。