柴术抗激颗粒对早期断奶仔猪生长性能和血清相关激素水平的影响

为了探讨柴术抗激颗粒(CZKJCL)对早期断奶仔猪生长性能和血清激素水平的影响,选用28日龄±2日龄"杜×长×大"断奶仔猪48头,随机分为4个处理组,每个处理组设3个重复,每重复4头猪,分别饲喂添加0、1 500、3 000、6 000mg/kg柴术抗激颗粒的日粮。试验期14d。结果表明,日粮中添加3 000mg/kg的柴术抗激颗粒能显著提高早期断奶仔猪的ADFI和ADG(P<0.05),极显著降低F/G和腹泻率(P<0.01);极显著降低血清COR(P<0.01),显著或极显著升高血清GH、IGF-1、T3、T4、GAS(P<0.05或P<0.01)。添加6 000mg/kg的柴术抗激颗粒对上述指标也有较明显的影响,但效果不及3 000mg/kg剂量组。由此可见,柴术抗激颗粒可有效缓解断奶应激对仔猪造成的伤害。在生产实践中,以3 000mg/kg的水平在饲料中添加效果最好。     

促长散等促生长添加剂对仔猪生产性能的影响

以窝为单位将20窝哺乳仔猪随机分为4组,设1个对照组(试验Ⅰ组),3个试验组。试验组分别添加200mg/kg有机铬(Ⅱ组)、20mg/kg泰乐菌素(Ⅲ组)、1%促长散(Ⅳ组),试验期15d。结果表明:试验组较对照组日增重提高11.37%～34.12%,其中Ⅳ组达到显著水平(P<0.05);采食量提高1.59%～12.30%;饲料增重比降低8.40%～20.20%;仔猪腹泻频次降低10.34%～31.03%。经无菌粪样检验,试验各组大肠杆菌、沙门菌、葡萄球菌数均低于对照组,差异不显著(P>0.05);而乳酸杆菌、双歧杆菌均高于对照组,差异不显著(P>0.05)。     

腹水综合征肉鸡空肠黏膜组织结构及相关基因表达分析

试验旨在研究肉鸡腹水综合征发生发展过程中空肠核因子κB （NF-κB）及紧密连接蛋白（闭合蛋白（occludin）、紧密连接蛋白-1（claudin-1）和胞质紧密黏连蛋白1（zonula occluden 1,ZO-1）） mRNA相对表达量,以及绒毛长度、隐窝深度和绒隐比的变化,为肉鸡腹水综合征的防治提供理论依据。选取40羽1日龄罗斯肉鸡常规饲养7 d后,随机分为对照组和模型组（饲料添加3%猪油和4%鱼粉,饮水添加0.12% NaCl,9~11℃低温饲养）,35日龄检测体重,并取心脏组织测腹水心脏指数,取空肠组织以HE染色切片测量绒毛长度和隐窝深度,实时荧光定量PCR检测空肠NF-κB和紧密连接蛋白的基因表达量。结果表明,与对照组相比,模型组肉鸡体重极显著下降（P<0.01）,腹水心脏指数极显著升高（P<0.01）,空肠绒毛长度、绒隐比极显著下降（P<0.01）,隐窝深度极显著升高（P<0.01）,NF-κB mRNA相对表达量极显著升高（P<0.01）,occludin、claudin-1和ZO-1 mRNA相对表达量极显著下降（P<0.01）。表明肠道黏膜结构与功能异常及肠通透性增高促进了肉鸡腹水综合征的发生发展。     

板芪口服液定性与定量方法的研究

为了研究板芪口服液定性与定量的方法,采用薄层色谱法(TLC)定性鉴别板芪口服液中的黄芪、丹参、黄芩与连翘;高效液相色谱法(HPLC)测定板芪口服液中黄芩苷的含量。色谱柱:ZORBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水-磷酸(47∶53∶0.2);流速:1.0 mL/min;检测波长:280 nm。TLC结果显示供试品色谱在与对照品、对照药材相应位置上显相同颜色斑点。HPLC结果显示黄芩苷的含量在0.1531～1.225μg(r=0.999)范围内与峰面积呈良好的线性关系,低中高浓度的平均加样回收率分别为96.99%、98.06%、98.96%,RSD值分别为2.02%、1.81%、1.29%。结果表明,方法操作简单,重复性、准确性好,精密度高,可作为板芪口服液的质量标准。     

2种中药成分对肉鸡生产性能、营养物质消化利用率、肠道消化酶活性和肠道菌群的影响

本试验旨在探讨日粮中分别添加山楂叶总黄酮、何首乌二苯乙烯苷及二者同时添加对肉鸡生产性能、营养物质消化利用率、肠道消化酶活性和肠道菌群的影响,为二者在肉鸡体内的应用提供理论依据。选用1日龄AA肉鸡128只(公),随机分为4组,即空白对照组(饲喂玉米－豆粕型基础日粮)、试验Ⅰ组(在基础日粮中添加300 mg/kg山楂叶总黄酮)、试验Ⅱ组(在基础日粮中添加150 mg/kg何首乌二苯乙烯苷)和试验Ⅲ组(在基础日粮中添加300 mg/kg山楂叶总黄酮和150 mg/kg何首乌二苯乙烯苷),每组4个重复,每个重复8只。结果表明:①在整个试验期,试验Ⅲ组的平均日增重显著高于对照组(P＜0.05),料重比显著低于对照组(P＜0.05);②试验Ⅲ组的粗蛋白质、钙、总磷的消化利用率显著高于对照组和试验Ⅰ、Ⅱ组(P＜0.05),粗脂肪的消化利用率极显著低于对照组和试验Ⅰ、Ⅱ组(P＜0.01);③试验Ⅲ组的胰蛋白酶活性极显著高于对照组和试验Ⅱ组(P＜0.01),脂肪酶活性极显著低于对照组(P＜0.01),淀粉酶活性极显著高于对照组和试验Ⅰ组(P＜0.01);④试验Ⅲ组的回肠和盲肠大肠杆菌数显著低于对照组和试验Ⅰ、Ⅱ组(P＜0.05);回肠乳酸杆菌数显著高于对照组(P＜0.05);盲肠乳酸杆菌数显著高于对照组和试验Ⅰ、Ⅱ组(P＜0.05)。因此,日粮中单独或同时添加山楂叶总黄酮和何首乌二苯乙烯苷具有提高肉仔鸡生产性能和营养物质的消化利用率,增强肠道胰蛋白酶、淀粉酶活性,降低脂肪酶活性,刺激肠道有益菌生长,降低有害菌增殖等作用,但以二者同时添加效果最好。     

党参总皂苷抗氧化作用研究

目的:研究党参总皂苷(TSC)抗氧化作用。方法:将50只昆明系小鼠随机分为5组,即空白对照组、辐射模型组、3个不同剂量(100、200、400 mg/kg)党参总皂苷给药组。除对照组外,其余各组采用15Gy60Coγ射线一次性全身均匀照射。辐射后,各剂量组每天灌胃给予不同剂量TSC 0.2 mL;辐射模型组和空白对照组每天灌胃给予生理盐水0.2 mL。连续灌胃2周后,将小鼠处死,测定心脏、肝脏组织匀浆和血清MDA含量、SOD活性和GSH-Px活性。结果:与对照组比,模型组MDA含量极显著增高(P0.01),SOD和GSH-Px活性极显著降低(P0.01);与模型组比,TSC各剂量组MDA含量显著降低(P0.05),SOD和GSH-Px活性显著提高(P0.05),且以TSC高剂量组的效果最佳。结论:TSC具有明显的抗氧化作用。     

PAMs免疫粘附受体CR1-like对PRRSV感染的影响

[目的]本试验旨在探讨猪肺泡巨噬细胞（Porcine alveolar macrophages, PAMs）表面天然免疫粘附受体—猪I型补体受体（Porcine complement receptor 1-like, CR1-like）对猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV）感染PAMs的影响,为阐述CR1-like在PRRSV免疫应答中的生物学功能提供理论数据。[方法]采取PRRSV减毒活疫苗免疫接种PRRSV抗体为阴性的长白仔猪20～28 d后,提取分离抗病毒血清并检测抗PRRSV血清中和效价;将抗PRRSV血清进行不同倍比稀释,制备各类PRRSV抗原抗体复合物并接种于PAMs上,建立抗体依赖性增强（Antibody-dependent enhancement, ADE）模型,qRT-PCR技术检测各时间点PRRSV N基因拷贝数变化;PRRSV感染PAMs 9 h后,将抗血清和猪新鲜血清共处理细胞,运用ELISA测定不同时间点细胞上清液中猪新鲜血清C3b、C4b、CH50总活性...     

猪I型补体受体与C3b活性片段相互结合的体外检测

【目的】检测猪红细胞类补体受体I型（Complement receptor 1-like,CR1-like）与C3b活性片段能否发生结合,以期为阐明猪红细胞发挥免疫粘附功能的分子机理提供科学数据。【方法】利用前期已构建的CR1-like_(3-6)、CR1-like_(8-11)功能域片段的重组质粒建立酵母双杂交检测体系,运用酵母共转化的方法将诱饵质粒（重组pGBKT7-CR1-like）与捕获质粒（重组pGADT7-C3b）共同转入Y2HGold酵母细胞中,分别利用一缺平板SD/-Leu、SD/-Trp和二缺平板SD/-Leu/-Trp（DDO）严格筛选共转化成功的酵母细胞,再根据报告因子是否表达来鉴别转化子在SD/-Leu/-Trp/X-α-Gal（DDO/X）、SD/-Leu/-Trp/X-α-Gal/Aba（DDO/X/A）二缺培养板上的生长情况,并结合菌落的颜色变化现象综合判定CR1-like活性片段与补体C3b在酵母细胞中是否发生相互结合;然后运用免疫沉淀技术分离酵母细胞中CR1-like与C3b结合复合物,并对该复合物的特异性进行Western blot鉴定。【结果】试验成功将pGBKT7-CR1-like与pGADT7-C3b基因共转入Y2HGold酵母细胞。共转化的酵母克隆在SD/-Leu、SD/-Trp、DDO平板上能够正常生长,在DDO/X、DDO/X/A平板上正常生长且菌落呈现蓝色,由此表明,试验中酵母双杂交系统建立成功,并通过试验获得了阳性酵母克隆。共同转化了pGBKT7-CR1-like和pGADT7-C3b质粒的酵母菌落PCR反向鉴定结果显示,在共转化的酵母菌中含有目的基因CR1-like_(3-6)和CR1-like_(8-11),共转化组的质粒酶切后出现C3b基因片段,与设计大小一致,说明重组质粒成功共转化入酵母细胞中。免疫沉淀试验中应用pGBKT7载体的标签抗体c-Myc沉淀酵母细胞中的融合蛋白,以c-Myc为一抗进行Western blot检测发现,单独转化了pGBKT7-CR1-like_(3-6)和pGBKT7-CR1-like_(8-11)的融合蛋白在50 kD处出现特异性条带;共转化pGBKT7-CR1-like_(3-6) + pGADT7-C3b和共转化pGBKT7-CR1-like_(8-11) + pGADT7-C3b的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带;以HA单克隆抗体为一抗进行Western blot检测时,在pGBKT7-CR1-like_(3-6)和pGBKT7-CR1-like_(8-11)融合蛋白中没有出现特异性条带,只有3、4泳道中共转化的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带,表明在Y2HGold酵母细胞中存在CR1-like与C3b识别结合的复合物。使用CR1-like单克隆抗体沉淀酵母细胞中的融合蛋白,以CR1-like单克隆抗体为一抗进行Western blot检测发现,单独转化了pGBKT7-CR1-like_(3-6)和pGBKT7-CR1-like_(8-11)的融合蛋白在50 kD处出现特异性条带;共转化pGBKT7-CR1-like_(3-6) + pGADT7-C3b和共转化pGBKT7-CR1-like_(8-11) + pGADT7-C3b的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带;以C3单克隆抗体为一抗进行Western blot检测发现,在pGBKT7-CR1-like_(3-6)和pGBKT7-CR1-like_(8-11)融合蛋白中没有出现特异性条带,泳道3、4所示只有共转化的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带,表明在Y2HGold酵母细胞中存在具有生物活性的CR1-like与C3b识别结合的复合物。通过多个单克隆抗体杂交结果,可看出诱饵质粒的表达产物CR1-like_(3-6)、CR1-like_(8-11)片段与捕获质粒的表达产物C3b片段可在酵母细胞内发生结合。【结论】猪红细胞CR1-like发挥免疫粘附功能的识别配体为C3b,为猪红细胞CR1-like功能域分子结构的进一步解析提供了重要数据依据。     

苦参碱对感染PRRSV Marc-145细胞受体表达的影响

为探讨苦参碱在猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)感染Marc-145细胞过程中的抗病毒机制。本研究建立感染PRRSV的Marc-145细胞模型,将试验分为4组:细胞对照组、病毒对照组、苦参碱对照组和苦参碱试验组,每组重复3次。PRRSV感染细胞3,6,12,24h后,收集细胞,采用qRT-PCR和Western blot分别检测苦参碱对PRRSV N基因及其细胞受体CD163、Vimentin和CD151的影响。结果表明,在PRRSV感染24h内苦参碱显著降低PRRSV N基因的表达(P0.05)。与病毒对照组相比,在PRRSV感染6h时,苦参碱可显著降低CD163的表达量(P0.05);在PRRSV感染3,6h,苦参碱试验组Vimentin的表达量显著降低(P0.05);在PRRSV感染3,24h时,CD151的表达量显著低于病毒对照组(P0.05)。以上结果表明苦参碱在PRRSV感染Marc-145细胞的不同时间点可通过抑制细胞不同受体的表达来抑制PRRSV吸附和侵入宿主细胞,从而干扰PRRSV在细胞中的复制。     

雏鸡肾型传染性支气管炎的诊断与综合防制

2000年2月至7月中旬,山西省晋中地区一些养鸡场和养鸡专业户的雏鸡群中先后暴发了一种以发病突然、传播迅速、气管口罗音、拉白色稀粪、病死鸡肾脏肿大以及尿酸盐沉积等为主要特征的疾病.经系统的实验室诊断,结合流行特点、临床症状及病理剖检变化,最后确诊为肾病变型传染性支气管炎.通过采取相应的防制措施,使疫情得到了较好的控制.