2012年广东猪群腹泻流行病学调查

为了解2012年广东猪群腹泻的发病状况,对全省19个地级市102个不同养殖规模的猪场进行了猪群腹泻的流行病学调查。采集236份肠道和粪便样品,采用猪流行性腹泻病毒(PEDV)-猪轮状病毒(PRo V)-猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)三重荧光RT-PCR方法进行病原检测。结果显示,猪群腹泻的场阳性率高达68.63%,发病率为37.76%,病死率为50.26%。从规模看,以存栏母猪100头以下的猪场群内发病率和病死率最高,分别为63.55%和66.75%;从生长阶段(用途)看,以哺乳仔猪的发病率和病死率最高,分别为47.74%和61.11%;免疫率高、生物安全措施好的场发病率和病死率均较低。PEDV阳性率为33.05%(78/236),PRo V阳性率为17.8%(42/236),未检测到TGEV。因此认为,广东猪群腹泻流行面广,导致猪病毒性腹泻的病原以PEDV为主,且以哺乳仔猪发病和死亡最多。     

广东部分规模猪场猪流感血清学监测结果与分析

从广东省9市17县采集28个规模猪场种公猪、后备和经产母猪血清627份,用微量血球凝集抑制(HI)试验监测H1、H3、H5、H9亚型猪流感抗体。结果表明:所监测猪场大部分猪群存在H1亚型猪流感抗体,场阳性率为75%(21/28),猪群血清抗体阳性率在8%～100%之间,总阳性率为46.09%(289/627);部分猪群存在H3亚型猪流感抗体,场阳性率为28.57%(8/28),猪群血清抗体阳性率在10%～95%之间,总阳性率为12.76%(82/627);未监测到H5、H9亚型猪流感抗体的存在。     

4个厂家不同批次猪瘟疫苗免疫效果比较试验

在同一条件下对4个厂家生产的8个批次的猪瘟原代细胞苗进行了免疫效果评价试验,并与猪瘟传代细胞苗免疫效果进行比较。结果发现4个厂家生产的猪瘟原代细胞苗二次免疫效果较好,但部分厂家存在批间差异、质量不稳定现象。猪瘟传代细胞苗免疫效果优于猪瘟原代细胞苗。     

3株PRRSV变异株理化特性研究及NSP2、ORF5基因序列分析

用Marc-145细胞从广东省3个发病猪群分离到3株病毒,经RT-PCR方法鉴定为PRRSV变异株(NSP21594～1680bp缺失)。3株分离株第1代均对Marc-145细胞适应性不强,第2代可致典型病变,第3代TCID50分别为103.67、104.20、104.75mL-1;在透射电镜下观察主要为40～70nm大小的圆形、椭圆形具有囊膜的病毒粒子;均对氯仿、酸、碱和热敏感。3株分离株NSP2基因与CH-1a、VR-2332等经典PRRSV相比均存在2个位点30个氨基酸缺失,与JXA1、HUN4、HPDEBV等变异株具有相同缺失特性且高度相似,相似性为98.1%～98.3%。ORF5基因均由200个氨基酸组成,与JX-A1、HUN4、HPDEBV等变异株高度相似,相似性为98.5%～99.0%,且第13、151位均为具有强毒特性的精氨酸(R)。本研究进一步证实在广东省内出现以NSP2缺失30个氨基酸为特征PRRSV变异株的流行,也为科学监测和综合防控该毒株感染引起的PRRS奠定了基础。     

三个厂家猪瘟活疫苗免疫效果比较试验

在同一条件下对3个厂家生产的猪瘟细胞源活疫苗进行了免疫效果评价试验,并与猪瘟传代细胞苗免疫效果进行比较。结果发现3个厂家生产的猪瘟细胞源活疫苗存在一定差异,2个厂家的免疫效果较好,1个厂家的免疫效果较差。猪瘟传代细胞苗免疫效果优于猪瘟细胞源活疫苗,猪瘟传代细胞苗免疫1次,抗体合格率高,持续时间长,猪瘟细胞源活疫苗要免疫两次才能获得比较好的效果。同时,我们发现高致病性猪蓝耳病活疫苗（JXA1-R株）对猪瘟抗体产生有一定影响。     

广东省禽流感原疫点及周围地区H5亚型禽流感监测报告

从广东省8个曾发生禽流感疫情的原疫点及周围地区,在强制免疫后21～28天采集家禽血清和咽喉、泄殖腔及环境样品拭子,进行H5亚型禽流感血清学监测和病原学调查。结果表明:发生禽流感疫情的地区,在进行紧急免疫接种后21～28天,受威胁区大部分禽只产生H5亚型禽流感保护性抗体,在环境样品拭子和家禽拭子中未监测到H5亚型禽流感病毒。     

黄羽肉鸡心包积水-肝炎综合征的诊断与防控

心包积水-肝炎综合征(Hydropericardium hepatitis syndrome,HHS),是鸡新发一种的危害较大的传染病,近年来在北方一些省份流行。2016年6月,某市一鸡场发生疑似病例,死亡率40%,经病毒分离、PCR诊断及序列测定等方法确认为该病。本次黄羽肉鸡的发病特点为发病急、死亡快,但心胞积液不明显,剖检病变极易与禽流感、新城疫等相混淆,需引起关注,根据发病特点提出鉴别诊断方法,以提高基层对本病的发现能力。     

黄羽肉鸡心包积水-肝炎综合征不同组织中病毒含量的比较

心包积水-肝炎综合征(HHS)是鸡的一种新发传染病,可导致较高的死亡率,对养鸡业构成重大威胁。本研究应用Taqman荧光PCR检测方法,对一自然病例中病死鸡不同组织样品相对病毒浓度进行了测定。结果显示不同组织平均病毒浓度从高到低依次为:肝肺脾肾肠气管胸腺心脑心胞液胰腺咽/肛。不同组织间病毒浓度相差较大。其中,肝脏的病毒浓度最高,较其他组织高出约1~4个数量级,故肝脏可作为诊断、监测及疫苗制备的首选靶组织;心胞液中病毒浓度并不高,仅为肝脏的0.22%;拭子样品病毒浓度最低,提示若采用拭子样品进行检测时,漏检的机率较大,需通过增加采样数量等方法来弥补样品灵敏度不足的问题。本研究为该病的监测、诊断和研究提供了依据。     

猪伪狂犬病、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合症、圆环病毒2型的相关性研究

2003-2004年对广东省猪伪狂犬病(PR)、猪瘟(CSF)、猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)、圆环病毒2型(PCV2)病原或野毒抗体调查发现,当前猪场这4种病的混合感染严重.对PR、PCV2、PRRS、CSF的动态流行情况进行相关性分析,结果表明:PR与PCV2之间存在较强的正相关性(P=0.012),相关系数为0.648,互谱图显示,PR与PCV2之间存在同时发生的关系.PCV2与CSF存在较弱的相关性,它们的互谱图表现为:PCV2的流行会微弱影响着未来7个月(负相关)、4个月(正相关)时CSF的流行情况,但这种影响是不显著的(P>0.05).     

猪圆环病毒2型ORF2截短基因的原核表达与纯化

对重组原核表达载体pET-ORF2的表达条件进行优化,结果表明,最佳IPTG诱导浓度为1.0mmol/L,最佳诱导时间为5h。在最佳诱导条件下获得猪圆环病毒2型重组Cap蛋白的基础上,利用HisBind蛋白质纯化试剂盒对表达产物进行纯化,再分别用SDS-PAGE电泳和Westernblotting对纯化产物的纯化效果及特异性进行检测,结果显示表达产物纯化良好,并能被PCV-2阳性血清识别,具有良好的抗原性。