绦虫成虫制片方法的改进

目的制作结构清晰、颜色鲜亮、不易褪色的莫尼茨绦虫成虫染色标本。方法采用德氏(Delafield)苏木素染色液、盐酸卡红染色液和硼砂卡红染色液等3种染色液分别对莫尼茨绦虫成虫进行染色。结果用德氏(Delafield)苏木素染色液1:15稀释液,室温染色12h,盐酸酒精分色5~10m in,染色效果最好。结论德氏(Delafield)苏木素染色法,适用于各种大型绦虫成虫的染色标本的制作,在寄生虫学教学科研及动物检疫等方面有很大的使用价值。     

巴什拜羊、盘羊杂交羊重组SP-A蛋白对体外培养MO增殖的影响

为研究巴什拜羊和盘羊杂交羊的重组肺表面活性物质相关蛋白A(rSP-A)对体外培养的绵羊肺炎支原体(MO)增殖的影响,本研究利用不同浓度(10μg/mL、20μg/mL和40μg/mL)巴什拜羊和盘羊杂交羊的rSP-A添加于MO培养液中进行体外培养,采用平板菌落计数和荧光定量PCR方法检测其对MO增殖的影响。平板菌落计数结果显示,巴什拜羊的3个rSP-A浓度组菌落数分别比对照组减少了8.35%(p>0.05)、23.04%(p<0.05)和40.03%(p<0.01);盘羊杂交羊的3个rSP-A浓度组菌落数分别比对照组减少了6.73%(p>0.05)、21.74%(p<0.05)和37.11%(p<0.01)。荧光定量PCR检测结果显示,添加rSP-A培养4h后MO16SrRNA基因拷贝数降至最低,巴什拜羊3个rSP-A浓度组16SrRNA基因拷贝数比对照组下降了72.15%(p<0.05)、78.81%(p<0.01)、81.48%(p<0.01);盘羊杂交羊的3个rSP-A浓度组的MO16SrRNA基因拷贝数比对照组下降了26.26%(p>0.05)、76.62%(p<0.01)、80.83%(p<0.01)。研究表明,巴什拜羊和盘羊杂交羊的rSP-A对体外培养的MO具有明显的抑制作用。本研究比较了不同品种羊SP-A蛋白在抗MO感染中的作用,为进一步研究盘羊杂交羊易感MO的分子作用机制奠定基础。     

巴什拜羊SPLUNC1基因的克隆与真核表达

为了克隆巴什拜羊SPLUNC1基因并表达该蛋白,本试验从巴什拜羊肺脏组织中提取总RNA,利用RT-PCR方法扩增出SPLUNC1基因开放阅读框序列,将该基因片段插入到真核表达质粒pPIC9K中构建pPIC9K-SPLUNC1重组质粒,然后将pPIC9K-SPLUNC1重组质粒线性化并电击转化入毕赤酵母GS115中,经甲醇诱导蛋白表达后用SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定目的蛋白。结果表明,经RT-PCR扩增成功获得大小为748 bp的SPLUNC1基因;构建的pPIC9K-SPLUNC1重组质粒经PCR、酶切及测序鉴定与预期结果一致;SDS-PAGE及Western blotting检测鉴定结果表明获得大小为25.53 ku的SPLUNC1蛋白。本试验结果为进一步研究巴什拜羊SPLUNC1蛋白的生物学活性奠定基础。     

生长抑素基因疫苗pES/2SS的构建与表达

为了获得安全性较好的生长抑素(SS)基因疫苗,采用PCR扩增pcS/SS中的SS基因,将其融合到pUSS/S质粒S基因后,构建pUS/2SS质粒;然后将S/2SS融合基因亚克隆到pEGFP-N_1中,得到S/2SS融合表达质粒pES/2SS。酶切和测序鉴定表明:重组质粒pES/2SS构建成功。将pES/2SS转染HeLa细胞,用ELISA检测表达的融合蛋白可与SS抗体特异性结合;将pES/2SS免疫10只大鼠(每只100μg)后,5只大鼠产生抗SS抗体,而对照组未检出SS抗体。结果证明,所构建的质粒pES/2SS可在真核细胞中表达生长抑素,用于免疫可产生抗SS特异性抗体。     

金银花源miR2911靶向非洲猪瘟病毒基因区域分析

金银花源miR2911是一种高丰度、性质稳定的抗病毒分子,在抗流感病毒感染、 SARS-CoV-2感染中具有一定效果。然而,对于miR2911靶向ASFV基因区域的研究却鲜有报道。由此,本研究旨在分析miR2911靶向ASFV的基因区域,从而进一步分析miR2911靶点在不同流行毒株中的保守性。利用miRanda软件成功预测了miR2911在ASFV基因组中存在的多个靶点,且靶向ASFV基因区域保守性很高。为后续深入研究miR2911在抗猪源病毒感染机理方面提供理论依据。     

重组捻转血矛线虫半乳糖结合凝集素免疫山羊皱胃细胞因子表达定位

【目的】检测重组雌、雄捻转血矛线虫半乳糖结合凝集素(rHco-GAL-f/m)免疫山羊皱胃转录细胞因子。【方法】用rHco-GAL-f/m免疫山羊,通过原位杂交法对阴性对照组(A)、攻虫对照组(B)、免疫攻虫组(C)和免疫不攻虫组(D)山羊皱胃中白介素-1β(IL-1β)、白介素-2(IL-2)、白介素-4(IL-4)、白介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA转录进行定位,并对上述细胞因子阳性反应细胞数量进行分析。【结果】A组山羊皱胃组织中没有检测到细胞因子,其它3组仅在皱胃黏膜下层中检测到了上述细胞因子。B、C和D组间IL-4和IL-6阳性反应细胞数差异显著(P0.05),其中C组明显高于其它两组;B、C和D组间IL-1?、IL-2和TNF-α阳性反应细胞数差异显著(P0.05),其中D组明显高于其它两组;IFN-γ阳性反应细胞数在B组和C组之间差异不显著(P0.05),D组与B组和C组之间差异显著(P0.05),且明显高于其它两组。【结论】重组捻转血矛线虫半乳糖结合凝集素能够诱导山羊皱胃局部免疫应答。     

非洲猪瘟病毒复制相关基因E165R启动子预测及其甲基化分析

ASF(非洲猪瘟)是由ASFV(非洲猪瘟病毒)引起猪的一种烈性、急性、出血性传染病.ASFV基因组为双股线性DNA(170～190 kb),可编码150～200种病毒,已报道ASFV的E165R基因与其复制相关,E165R编码的dUTPase蛋白结构已被解析.本文旨在利用软件和数据库对基因E165R的启动子进行生物信息...     

“复方益孕液”治疗奶牛不孕症疗效及作用机理

选取产后60 d以上不发情,患有持久黄体和卵巢机能减退的不孕奶牛50例进行复方益孕液临床治疗试验,利用电化学发光免疫方法对部分患牛治疗前后血清雌二醇(E2)和孕酮(P4)水平进行检测.结果表明,复方益孕液治疗奶牛持久黄体和卵巢机能减退后,发情率分别为83.3%和77.3%,受胎率分别为80.0%和76.5%,显著高于对照组(P<0.01).持久黄体患牛在处理后血清中E2水平不断升高,最高值为(17.81±7.32)pg/mL,P4水平逐渐降低.最低值为(0.75±0.46)ng/mL;卵巢机能减退患牛在处理后血中E2和P4水平均升高,最高值分别为(14.16±9.45)pg/mL和(4.23±1.85)ng/mL.结果表明复方益孕液对治疗奶牛持久黄体和卵巢机能减退引起的不孕症疗效显著,且具有微调体内激素,溶解黄体和诱导发情作用.     

中西医结合治疗奶牛子宫内膜炎不孕症的疗效及其分析

[目的]探讨中西医结合治疗奶牛子宫内膜炎不孕症的效果。[方法]根据抑菌试验的结果,使用中药“复方益孕液”＋乳酸环丙沙星为试验组。土霉素或生理盐水为对照组。采用子宫内灌注法治疗81例患有不同类型子宫内膜炎的奶牛,并验证中西医结合临床效果,同时利用电化学发光免疫方法对部分患病牛治疗前后血清雌二醇（E2）和孕酮（P4）水平进行检测。[结果]试验组46头奶牛使用“复方益孕液”＋乳酸环丙沙星的有效率为91．3％,受胎率为87．0％,显著高于土霉素对照组（68．6％）。慢性子宫内膜炎患牛在处理后血清中E2水平不断升高,最高值为（16．19±9．94）μg／ml,P4水平逐渐降低,最低值为（1．26±1．03）ng／ml。[结论]“复方益孕液”＋乳酸环丙沙星具有抗菌消炎、诱导发情和提高受胎率的作用。     

石河子地区奶牛蹄叶炎的发病调查与综合防治

对石河子地区5个规模化奶牛场蹄叶炎进行了调查、治疗和综合预防。调查发现春季和冬季蹄叶炎的发病率最高,一胎、二胎牛的发病率较高,分别为35.89%和31.97%,发病时间主要集中在产犊后的2～3周内,分别为34.28%和37.04%。治疗试验结果表明,早期使用抗组胺组疗效显著高于消炎激素组、静脉放血组、封闭组（P<0.05）,实施综合预防措施效果明显。