肉牛肢蹄病的病因及防治

正肉牛肢蹄病是一种常见病和多发病,尤其是种公牛容易发生。病牛发生肢蹄病后,主要表现肢蹄跛行、蹄裂以及蹄变形,如果出现明显的跛行、站立困难,会对机体爬跨、采精造成明显影响。当病牛症状严重且无法逆转时,如发生严重的骨裂、骨折以及腐蹄病等,只能作淘汰处理。1病因分析1.1病原因素肉牛发生肢蹄病主要是由于感染病原菌,且多种病原菌都能致病。从大部分病牛患处可分离得到的病原体主要有坏死杆菌、结节状类杆菌、脆弱类杆菌以及产黑色素类杆菌。     

猪I型补体受体与C3b活性片段相互结合的体外检测

【目的】检测猪红细胞类补体受体I型（Complement receptor 1-like,CR1-like）与C3b活性片段能否发生结合,以期为阐明猪红细胞发挥免疫粘附功能的分子机理提供科学数据。【方法】利用前期已构建的CR1-like_(3-6)、CR1-like_(8-11)功能域片段的重组质粒建立酵母双杂交检测体系,运用酵母共转化的方法将诱饵质粒（重组pGBKT7-CR1-like）与捕获质粒（重组pGADT7-C3b）共同转入Y2HGold酵母细胞中,分别利用一缺平板SD/-Leu、SD/-Trp和二缺平板SD/-Leu/-Trp（DDO）严格筛选共转化成功的酵母细胞,再根据报告因子是否表达来鉴别转化子在SD/-Leu/-Trp/X-α-Gal（DDO/X）、SD/-Leu/-Trp/X-α-Gal/Aba（DDO/X/A）二缺培养板上的生长情况,并结合菌落的颜色变化现象综合判定CR1-like活性片段与补体C3b在酵母细胞中是否发生相互结合;然后运用免疫沉淀技术分离酵母细胞中CR1-like与C3b结合复合物,并对该复合物的特异性进行Western blot鉴定。【结果】试验成功将pGBKT7-CR1-like与pGADT7-C3b基因共转入Y2HGold酵母细胞。共转化的酵母克隆在SD/-Leu、SD/-Trp、DDO平板上能够正常生长,在DDO/X、DDO/X/A平板上正常生长且菌落呈现蓝色,由此表明,试验中酵母双杂交系统建立成功,并通过试验获得了阳性酵母克隆。共同转化了pGBKT7-CR1-like和pGADT7-C3b质粒的酵母菌落PCR反向鉴定结果显示,在共转化的酵母菌中含有目的基因CR1-like_(3-6)和CR1-like_(8-11),共转化组的质粒酶切后出现C3b基因片段,与设计大小一致,说明重组质粒成功共转化入酵母细胞中。免疫沉淀试验中应用pGBKT7载体的标签抗体c-Myc沉淀酵母细胞中的融合蛋白,以c-Myc为一抗进行Western blot检测发现,单独转化了pGBKT7-CR1-like_(3-6)和pGBKT7-CR1-like_(8-11)的融合蛋白在50 kD处出现特异性条带;共转化pGBKT7-CR1-like_(3-6) + pGADT7-C3b和共转化pGBKT7-CR1-like_(8-11) + pGADT7-C3b的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带;以HA单克隆抗体为一抗进行Western blot检测时,在pGBKT7-CR1-like_(3-6)和pGBKT7-CR1-like_(8-11)融合蛋白中没有出现特异性条带,只有3、4泳道中共转化的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带,表明在Y2HGold酵母细胞中存在CR1-like与C3b识别结合的复合物。使用CR1-like单克隆抗体沉淀酵母细胞中的融合蛋白,以CR1-like单克隆抗体为一抗进行Western blot检测发现,单独转化了pGBKT7-CR1-like_(3-6)和pGBKT7-CR1-like_(8-11)的融合蛋白在50 kD处出现特异性条带;共转化pGBKT7-CR1-like_(3-6) + pGADT7-C3b和共转化pGBKT7-CR1-like_(8-11) + pGADT7-C3b的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带;以C3单克隆抗体为一抗进行Western blot检测发现,在pGBKT7-CR1-like_(3-6)和pGBKT7-CR1-like_(8-11)融合蛋白中没有出现特异性条带,泳道3、4所示只有共转化的酵母融合蛋白在83 kD处出现特异性条带,表明在Y2HGold酵母细胞中存在具有生物活性的CR1-like与C3b识别结合的复合物。通过多个单克隆抗体杂交结果,可看出诱饵质粒的表达产物CR1-like_(3-6)、CR1-like_(8-11)片段与捕获质粒的表达产物C3b片段可在酵母细胞内发生结合。【结论】猪红细胞CR1-like发挥免疫粘附功能的识别配体为C3b,为猪红细胞CR1-like功能域分子结构的进一步解析提供了重要数据依据。     

我国苜蓿病虫害发生情况及防治对策

本文根据近年来中国苜蓿病虫害的发生现状进行了总结,并提出了综合防治的方法,以期为苜蓿的管理和研究提供依据。     

猪SsMT-1A和SsMT-2A的原核表达及金属结合特性研究

【目的】通过对猪(Sus Scrofa)金属硫蛋白1A(metallothionein-1A of S. Scrofa, SsMT-1A)和2A(Metallothionein-2A of S. Scrofa, SsMT-2A)的生物信息学分析、原核表达和纯化，研究它们与Zn(Ⅱ)和Cu(Ⅰ)的结合特性。为饲料中添加Zn和Cu在促进猪生产性能的作用机制研究提供理论基础。【方法】首先，从NCBI中获得SsMT-1A和SsMT-2A的基因序列，利用ClustalX2和ExPASy分析两者的蛋白序列和结构差异，利用MEGA-X构建两者与其他物种MT蛋白分子的进化树。其次，构建pET-28a-SUMO-SsMT-1A/SsMT-2A原核表达载体，转化BL21(DE3)plysS，用IPTG诱导表达。利用Ni-NTA柱亲和层析和葡聚糖凝胶层析纯化重组蛋白。最后，利用大肠杆菌金属耐受性实验、圆二色光谱（circular dichroism, CD）、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix assisted laser analytic ionization time of flight m...     

稻田养殖中华小长臂虾的施肥策略

<正>中华小长臂虾(Palaemonetes sinensis)在分类地位上隶属于十足目、长臂虾科、小长臂虾属,为我国唯一有记载的小长臂虾属物种。中华小长臂虾不仅具有优良的观赏和食用价值,而     

紫苏的生产特性及其提取物在动物生产中应用的研究进展

本文就紫苏的营养特性、功能作用及作为饲料在家畜生产中的应用现状及前景做一概述。     

自繁海水硝化菌群的培养及功能的初步研究

正生物膜法去除氨氮是近年来研究较多的方法,生物膜中起主要作用的是硝化细菌,硝化细菌是一种好气性细菌,其硝化作用是含氮物质彻底矿化的重要步骤,为此我们筛选培养了适应当地水质的海水硝化细菌,并对其功能进行初步研究。一、材料1.菌种来源菌种采自辽宁盘锦光合蟹业有限公司三角洲分公司轮虫池底泥,按表1硝化细菌培养配方不断纯化培     

马立克氏病鸡红细胞天然免疫黏附功能及超微结构研究

试验研究了马立克氏病鸡红细胞天然免疫黏附活性及其超微结构。选用40羽1日龄海兰褐公雏鸡,随机分为2组,健康对照组（C）和马立克强毒攻毒组（GD）,在26、34、35、44日龄从每组中各取4羽鸡采血、取肝脏,分离肝组织细胞,通过红细胞免疫黏附肿瘤细胞试验及其扫描电镜观察,检测鸡红细胞免疫粘附功能。结果表明,红细胞免疫黏附活性因受机体调节存在动态变化,在攻毒后期,红细胞与马立克氏病肿瘤细胞和自身血浆混合后免疫黏附率接近对照组,红细胞与马立克氏病肿瘤细胞免疫黏附率在34、35 d极显著高于对照组。由此得出,在鸡马立克氏病的发病过程中,红细胞免疫黏附在机体免疫中起着非常重要的作用,这为鸡红细胞免疫分子机理的研究奠定基础。     

橡胶颗粒分布层位对沥青路面降噪效果影响的研究

本文通过轮胎垂直振动衰减试验和轮胎/路面振动模拟试验,研究了橡胶颗粒分布层位对橡胶颗粒沥青路面降噪效果的影响。研究表明：橡胶颗粒沥青路面降噪效果最佳的分布层位为上面层,但是橡胶颗粒分布于下面层时的降噪效果与上面层相比相差甚微。如果侧重考虑路面的最基本路用性能,那么橡胶颗粒分布于上面层较好;如果侧重考虑路面的耐久性,橡胶颗粒分布于下面层较好。