稳定表达T7RNA聚合酶PK-15细胞系的建立

为构建稳定表达T7 RNA聚合酶(RNAP)的猪肾细胞系(PK-15),本研究采用PCR方法,以E.coli BL21(DE3)细菌基因组为模板扩增T7 RNAP基因,将其克隆到逆转录病毒载体pLXSN中,构建重组质粒pLXSN-T7.采用脂质体将pLXSN-T7转染至PT67细胞中,经G418筛选培养获得重组逆转录病毒rMLV-T7,将其接种于PK-15细胞进行G418加压筛选和纯化;应用PCR、间接免疫荧光试验及T7启动子控制下的红色荧光蛋白的重组表达质粒(pET-RED)进行瞬时表达,检测T7 RNAP的表达及活性,结果表明筛选所得的细胞系PK/T7的不同代次均具有转录活性.本研究建立稳定表达T7 RNAP的细胞系PK/T7,为实现细胞内T7启动的转录和猪源RNA病毒等的反向遗传操作提供了有效的方法.     

鸭肉毒中梭菌毒的诊治

肉毒梭菌中毒是由于动物摄食了含肉毒梭菌的食物而引起的一种中毒性疾病。在鸭等水禽中较为常见,现将一例鸭肉毒梭菌中毒病例报告如下。1发病情况2007年8月中旬,我镇仇湖村某养鸭专业户,前来动物门诊部进行求诊,主诉:自家饲养的700羽康贝尔鸭,第1d精神和采食均未见异常,按平时正常驱赶鸭群到就近的水域进行放养,     

关中地区核桃常见虫害及防治方法

近年来,随着退耕还林等林业工程的实施,核桃做为关中地区乡土树种,已成为当地农民增收致富的重要来源和支柱产业。本文按照预防为主,综合防治的方针,对关中地区常见虫害的综合防治方法作以介绍。对广大农民群众的生产实践具有一定的指导意义。     

紫茎泽兰在贵州六盘水市的发生

紫茎泽兰于60年代中期逐步由云南省的东北部传入我省,近年发现在六盘水市正迅速扩展蔓延,所到之处成片生长,很快成为当地杂草的优势种群。据调查,我市以盘县特区分布面最广,面积之大,已遍及整个特区17个区镇,六枝特区除新华、新场两区未发现外,其余区镇都有分布,水城县分布已达5个区。紫茎泽兰大多生长在路旁、水沟旁、山坡、荒地以及田间周围。也在庭院、宅旁、果园及菜园附近发现。在一般条件下紫茎泽兰株高1m 左右,但在排水沟、河堤及低洼潮湿地段,生长更茂盛,植株可达2m 多高。紫茎泽兰在我市分布在海拔770～1900m 之间,以1000～     

应用定量RT-PCR对猪瘟兔化弱毒疫苗的质量评价研究

为进一步验证猪瘟兔化弱毒(HCLV)疫苗荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)与兔体定型热试验之间存在正相关性,本研究利用qRT-PCR方法对278批次HCLV疫苗进行检测,分别检测其疫苗含量及牛病毒性腹泻病毒(BVDV)污染情况。结果表明,278批次猪瘟疫苗中有66批(24%)疫苗含量达不到规程标准,有42批(15%)疫苗存在BVDV污染;从所检疫苗中抽取6份qRT-PCR检测HCLV含量较低的疫苗,采用兔体定型热试验进行验证,两种方法结果吻合,表明qRT-PCR方法可以作为评价猪瘟疫苗质量的一种备选方法。     

鸡大肠杆菌病的诊断及防治措施

鸡大肠杆菌病是养鸡业中的常见病与多发病之一,由大肠杆菌引起.大肠杆菌在哺乳动物主要引起肠道疾病,而鸡抵抗力相对较弱,常引起继发性局部或全身感染.临床上鸡大肠杆菌病,通常表现为多脏器综合病变,发病率和死亡率较高,传播迅速,给养鸡业造成巨大经济损失.     

高速公路工程验收阶段财务管理规范研究

二十一世纪以来,中国的高速公路建设在快速运转的社会经济环境下蓬勃发展起来。虽然关于高速公路的各项财务管理工作都有相关的政策法规约束,但是一些规范不够具体,甚至存在着模糊界定,难以解决实质性问题。本论文针对高速公路工程验收阶段财务管理规范进行研究。     

超微气泡技术在对虾室内养殖中的初步应用

为了探究超微气泡技术在水产养殖应用的安全性和可行性,在小型凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)养殖生态系统中,以常规鼓风充气作为对照组,应用超微气泡发生装置,研究对比其在对虾养殖过程中的增氧效果、水体相关理化和生物因子的响应及对虾生长情况。结果显示:超微气泡能有效地提高水体中溶氧质量浓度,并使之维持更长的时间;与常规充气相比,在超微气泡技术条件下,养殖水体溶氧质量浓度平均高出7.66%,差异显著(P0.05);超微气泡能加快养殖水体颗粒物的降解,并对浮游植物的优势种结构产生影响;对虾在两种充气方式下,生长率和存活率都没有明显差异。研究表明:超微气泡技术对提高养殖水体溶氧的效果显著,在对虾养殖中应用是可行的;超微气泡技术为水产养殖新装备的研究应用提供了一条新思路。     

弹尾虫对食用菌的危害及防治

弹尾虫是危害食用菌生产的一类小型害虫。近年来,该虫对食用菌危害严重,因体形微小,常被忽视。现详细介绍了弹尾虫的外部形态特征、生物学特性、常见危害种类及其防控方法。     

云芝葡聚糖对非洲猪瘟病毒的体外抑制作用

研究云芝葡聚糖抑制非洲猪瘟病毒(ASFV)感染效果并初步探索其作用机制。利用CCK-8试剂检测云芝葡聚糖对原代猪肺泡巨噬细胞(PAM)的毒性并计算半数细胞毒性浓度(CC₅₀);ASFV感染细胞,检测不同质量浓度云芝葡聚糖抗ASFV感染的剂量依赖效应,并计算半数抑制浓度(IC₅₀);将25 mg/L的云芝葡聚糖与病毒悬液孵育处理,稀释后加入PAM,评价云芝葡聚糖体外直接杀灭ASFV的效果;同时在ASFV复制周期的不同时间点利用云芝葡聚糖处理细胞,确定其抗ASFV效果最显著的效应阶段;通过qPCR检测抗病毒相关细胞因子转录水平来初探其抗病毒机制。云芝葡聚糖的毒性较弱(CC₅₀为270.100 0 mg/L),具有一定的抗病毒效果(IC₅₀为0.957 5 mg/L),其不能直接杀灭病毒;在ASFV感染前6～12 h使用云芝葡聚糖处理细胞,其抑制病毒复制的效果最为显著,且PAM的IL-1β、IL-6、IL-8及TNF-α等细胞因子的mRNA水平显著升高。