生姜转录因子基因ZoNAC17 的克隆与表达分析

NAC类转录因子在植物逆境胁迫应答过程中具有极其重要的作用。为进一步探索NAC转录因子的结构与功能,基于生姜转录组数据库,利用RT-PCR法克隆生姜转录因子基因ZoNAC17,采用数字表达谱分析生姜不同组织的ZoNAC17表达图谱。序列分析结果显示,生姜ZoNAC17基因的ORF长度为1 815 bp,编码604个氨基酸残基,分子量为67.52 k D;转录因子ZoNAC17等电点为4.59,不存在信号肽,为跨膜蛋白,亚细胞定位于细胞核。系统进化树分析表明,生姜ZoNAC17与小果野蕉MaNAC17基因亲缘关系最近。数字表达谱结果表明,ZoNAC17在生姜不同组织中均有较强表达,在成熟组织中的表达量为地上茎叶片根茎。在生姜根茎的发育过程中,ZoNAC17表达量先增加,后逐渐减少,且在生长约3个月的发育期表达量最高。     

中国大鲵“烂脚病”病原菌的分离鉴定

为了解重庆地区部分中国大鲵(Andrias davidianus)养殖场流行"烂脚病"的病因,对患"烂脚病"中国大鲵进行剖检后,在其肺部分离到一株优势菌CQWU2013,对该优势菌进行致病性实验、生理生化特性鉴定、16S r DNA测序和药敏实验。结果显示:中国大鲵"烂脚病"是由肺炎克雷伯氏菌(Klebsiella mobilis)引起的,该菌为短链状排列的革兰氏阴性杆菌,其生理生化特性符合肺炎克雷伯氏菌的指标,16S r DNA序列同源性高达99.6%;药敏实验显示该菌对部分青霉素类、β-内酰胺类、氨基糖苷类和糖肽类药物耐药,对供试的20种药物中有7种药物出现明显的耐药现象。     

棘腹蛙皮肤抗菌肽Cathelicidin-Pb的克隆及表达分析

基于棘腹蛙(Paa boulengeri)皮肤转录组数据库,釆用RT-PCR方法从棘腹蛙皮肤组织中克隆到了编码Cathelicidin-Pb前体的核苷酸序列,其完整ORF长度为441 bp,编码146个氨基酸残基。通过信号肽预测和结构域查找比对,发现Cathelicidin-Pb前体包含N端20个氨基酸残基的信号肽、101个氨基酸残基的中间间隔区(cathelin结构域)和25个氨基酸残基的成熟抗菌肽。进一步研究发现,在适度高温范围内,皮肤组织中Cathelicidin-Pb的表达随着生长环境温度的升高而逐渐增加,但是当环境温度超过27℃后,其表达量急剧降低;Cathelicidin-Pb主要在皮肤组织中表达,在肌肉组织和血液组织的表达量较低。这些结果为棘腹蛙养殖过程中疾病控制及Cathelicidin-Pb抗菌肽的后续开发提供了重要的线索。     

绿盲蝽象防治试验研究

在用粘虫胶与化学防治相结合的防治试验区、精细管理的化学防治对照区、粗放管理的化学防治对照区,分别对绿盲蝽象进行了防治试验,发现在树干涂闭合粘虫胶环结合化学防治,对绿盲蝽象的防治效果显著。     

全自动物理灭蛾器诱杀枣树害虫的试验

利用全自动物理灭蛾器诱杀枣树害虫的试验表明,该灭蛾器可诱杀危害枣树的5个目、21个科的49种害虫;每台灭蛾器的控制面积为3.1hm2,3台灭蛾器全年可诱杀枣树害虫14 881头;全年防治病虫害喷药8次,比喷药13次的对照园好叶率提高3.1个百分点,好果率提高6.5个百分点,且显著降低了防治成本,减轻了产品和环境污染。     

月季RhPR10.2基因克隆及生物学功能分析

为解析月季PR-10家族基因RhPR10.2在月季花瓣衰老中的生物学功能,采用Real-Time PCR、RACE PCR、异源过表达、VIGS(病毒诱导的基因沉默)等生物技术方法,分析了月季RhPR10.2基因在月季不同开放阶段花瓣中的表达谱,克隆了RhPR10.2基因全长,构建了pSuper1300-RhPR10.2异源过表达载体以及pTRV2-RhPR10.2VIGS载体.结果表明,RhPR10.2基因的表达受月季花瓣衰老显著诱导,其开放阅读框为483bp,编码160个氨基酸,含有PR-10家族特有的P-loop基序;蛋白分子式为C796H1250N204O239S2,分子量为17 566.02,等电点(pI)为6.07;RhPR10.2蛋白与葡萄VvPR10.1亲缘关系最近;与拟南芥野生型植株(WT)相比,异源过表达RhR10.2基因的拟南芥T2代纯合子植株表现出显著延迟叶片衰老的表型,伴随着更高的叶绿素含量以及更低的离子渗透率;此外,与TRV2对照相比,沉默RhPR10.2基因的月季花瓣表现出加速衰老的表型,伴随着更高的离子渗透率以及衰老marker基因RhSAG12的表达.     

绿盲蝽成虫对枣树叶片、花蕾、幼果危害能力测定

为进一步了解绿盲蝽对枣树危害的严重性,在枣产区沧县高川乡朴寺村3 a生金丝小枣苗圃对其成虫危害枣叶、花蕾、幼果的能力进行了测定,结果为:绿盲蝽成虫每头每天平均危害枣叶2.46片,花蕾2.74个,幼果1.59个。     

沿树干爬行枣树害虫防治试验研究

在粘虫胶与化学防治相结合的防治试验区、精细管理与粗放管理的化学防治对照区,通过对枣树红蜘蛛、枣粉蚧、枣尺蠖、食芽象甲的防治试验,发现树干涂闭合粘虫胶环结合化学防治效果显著,经两年的示范防治,叶片被害率均在1 %以下.     

不同温度对棘腹蛙宜宾种群蝌蚪生长发育的影响

为了探讨温度对棘腹蛙(Paa boulengeri)蝌蚪生长发育的影响,试验采用温度梯度方法即设置了15℃、17℃、19℃、21℃、23℃、25℃、27℃7个梯度研究棘腹蛙宜宾种群蝌蚪在这些温度下的生长发育情况。结果表明:棘腹蛙蝌蚪生长发育的最适水温是21℃,该温度下的各项生长发育指标(全长、头体长、体宽、体重)均为最优,其中头体长、体重均高于其他几个温度下的指标,且变态率也较高。低于21℃时,温度越高生长状况相对越好;高于21℃时,温度越高变态越提前,变态时的个体因能量积累不够致使体形偏小,而不利于变态后的生存。     

枣树绿盲蝽的生物学特性及综合防治技术

对枣树绿盲蝽的危害特点、生活习性和发生规律进行观察研究。提出以主干涂闭合粘虫环和化学防治为主的综合防治措施。