伪狂犬病病毒上海株gE和gI基因的克隆及序列分析

参考Genebank发表的伪犬病病毒（Pseudorabies Virus,PRV）的gI和gE基因序列，自行设计并合成了两对引物，对PRV上海株（PRV－SH）进行PCR扩增，产物经琼脂糖电泳分析，均呈现一条约960bp和1740bp的条带，将其克隆入pGEM-T-easy载体中，进行了序旬测定，将PRV－SH株的gI基因与Rice株gI基因比较发现,核苷酸的同源性为94.7%，氨基酸的同源性为91.3%，证实为gI基因，将PRV－SH gE基因序列与Ea株、Ruce株gE基因序列进行比较，结果显示，该序列与PRV Ea株、Rice株gE基因的同源性分别为98.5%、97.5%；的氨基酸序列与Ea株，Rice株和I型单纯疱疹病毒（HSV－1）17株gE的同源性分别为97.2%、94.8%和15.6%。     

疑似鸡传染性滑膜炎的诊断

鸡传染性滑膜炎是由滑膜霉形体引起的4—12周龄鸡和火鸡的一种急性、慢性传染病。以跛行和瘫痪为主要特征,还可引起肉鸡气囊感染,使呼吸系统出现异常,造成较大经济损失。现将一起疑似鸡传染性滑膜炎病的诊断报道如下:一、发病情况1991年8月,某鸡场从国外引入 AA 种鸡4400只,在隔离检疫期间,未出现明显病症,两次采血检疫,传染性法氏囊炎、病毒性关节炎、霉形体病、鸡白痢等病均为阴性,检疫隔离期结束时,成活率达97.5%。转群到育成舍饲养10天后,开始出现关节肿大,行走困难病鸡。通过改善饲养管理条件,多次使用庆大霉素、青霉素、链霉素、土霉素     

施马伦贝格病研究进展

施马伦贝格病毒是近期在奶牛血液中检测到的一种新型病毒,主要感染猪、牛、羊和野牛,主要通过蚊子、蠓传播。会造成动物精神不振、体质下降、厌食和腹泻等临床症状。本文从病原学、流行病学、诊断和防控等方面对该病进行了综述。     

牛传染性鼻气管炎病毒套式PCR检测方法的建立

利用套式PCR技术建立一种快速检测牛传染病鼻气管炎病毒(bovine infectious rhinotracheitis virus,IBRV)并能区分野毒株和gB基因缺失疫苗的方法。根据基因库中牛传染性鼻气管炎病毒的gB和gE基因序列,应用pri mer5.0软件设计了gB/BN和gE/EN的2套套式PCR引物,分别对IBRV标准株进行PCR扩增,结果表明,这2套引物均能扩增出与设计目的片段大小一致的特异性条带;用此引物对同属的伪狂犬病毒、马立克氏病毒、鸭瘟病毒进行扩增,具有良好的特异性。引物gB/BN和gE/EN的检测灵敏度分别为0.01TCID50和0.1TCID50。     

猪圆环病毒病

猪圆环病毒病主要以消瘦、呼吸困难、皮肤苍白、生长停滞、腹泻、淋巴结先肿大后萎缩等为特征,且和多种综合病症有关.鉴于其呈世界性分布的态势和对养猪业已经造成的严重影响,文章简介了猪圆环病毒引起的相关的疾病,鉴别诊断方法以及预防控制的研究进展和成果.     

赤羽病病毒的新毒株——Iriki分离株引起的脑炎

1984年10～11月间,日本鹿儿岛县的两个地区10头犊牛出现了以神经症状为特征的一种疾病。每个病例都出现了非化脓性脑炎的组织病理学变化。应用HmLu-1细胞从1头犊牛的小脑中分离出一株命名为Iriki(入来)分离株的病毒,所有感染的犊牛都有中和此病毒的抗体。1984～1985年调查了与感染犊牛的同居牛和流行地区饲养的牛对该病毒的血清变化情况,结果血清阳性率很高,分别为65/102(63.7%)和46/137(33.6%)。用Iriki分离株实验感染犊牛,表现的神经症状和组织病理学变化与自然感染的相似。血清流行病学调查和动物实验结果证明,Iriki分离株是引起此病的病原。因该病毒与赤羽病病毒的中和试验出现交叉反应,所以认为Iriki分离株是赤羽病病毒的一个变种。     

伪狂犬病病毒蛋白激酶基因部分序列的克隆和序列测定及转移质粒载体的构建

以伪狂犬病病毒SH株细胞培养物为模板，用PCR方法扩增蛋白激酶(PK)基因部分片段，克隆到pCDNA3中，序列测定显示所扩增的PK基因片段长907bp，与PRVNIA-3株的核苷酸同源性为99．6％。把PK基因克隆到pUCl9上，利用PK基因中间的SalI酶切位点，插入带有绿色荧光蛋白(EGFP)的基因表达盒，构成了含EGFP的转移载体，为今后研究PK基因的功能和构建PK缺失株奠定了基础。     

猪流行性腹泻病毒RT-LAMP可视化检测方法的建立

为建立一种适用于现场快速检测的猪流行性腹泻病毒(PEDV)LAMP技术,基于羟基萘酚蓝(HNB)的可视化显色特点,根据PEDV M基因编码区序列,设计合成1套引物,通过反应物浓度和反应条件优化,建立了可闭管检测的PEDV RT-LAMP检测方法。特异性和灵敏度试验结果显示,建立的RT-LAMP检测技术快速、灵敏、特异,可于1 h内检出0.2 mL 0.1 TCID₅₀/mL的病毒RNA,与实时荧光RT-PCR检测方法灵敏度一致,与猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪圆环病毒2型以及猪链球菌2型核酸不发生交叉反应。利用该方法对187份送检的粪拭子及病死猪组织样品进行应用检测,检出阳性样品9份,与荧光定量RT-PCR方法检测结果一致。试验结果表明,所建立的方法快速、特异,重复性满足要求,适用于送检样品的PEDV快速检测。     

犬、猫禽流感研究动态及预防

一、高致病性离流感流行的基本情况高致病性禽流感是指由H5N1亚型禽流感病毒使多种动物感染致病。就目前研究所知,各种家禽和野生禽是主要的病毒携带和传播者。截止2006年5月23日,全世界共有218人发病,124人死亡。中国有18人发病,12人死亡。动物可感染的有:1.猫科动物:2003年12