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11.
新城疫病毒Ulster株血凝素—神经氨酸酶基因的克隆与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
析城疫病毒Ulster株经SPF鸡胚增殖和超速离心纯化后,以酚-SOS法提取其基因RNA,作为反转录-聚合酶链反应的模板。根据其已发表的F和HN基因核苷酸序列,合成一个长为30mer的寡核苷酸和一对分别长为28、30mer的寡核苷酸分别作为反转录引物和PCR引物。 相似文献
12.
2005年10月,山东省青岛市城阳区青峪村19岁的姑娘王伟从幼儿园下班回家后,突然感到头疼、恶心。第二天病情继续恶化,不住地呕吐,几次差点摔倒,大小便也出现失禁现象,随后视力下降,渐渐看不清东西。年底,经医院确诊,她患了“弓形虫病”。为了挽救她的生命,跨越了20多个国家寻求特效药——乙胺嘧啶,终于在2006年1月17日韩国稀贵医药中心提供了这种国家储备药,使得王伟康复出院。弓形虫病是一种人和动物共患的原虫病,分布于世界各地,也是造成不良妊娠结局的病因之一,甚至危及生命,其危害相当严重。一、流行病学特点弓形虫病的发生无明显的季节… 相似文献
13.
14.
从GenBank上调取猴痘病毒的基因序列,经过分析,找出了猴痘病毒的特异性靶基因序列F3L片段,人工合成猴痘病毒MPV(AF380138)F3L基因片段(48048-48509bp)并插入质粒,作为病毒检测的模拟阳性模板。根据该序列设计并合成PCR引物,对模拟的阳性模板进行扩增,结果能扩增出与目的片段大小一致的条带。建立了PCR检测方法,经条件优化后,对鸡痘、禽痘、羊痘等14种相似病毒核酸进行PCR扩增,发现具有良好的特异性。PCR方法能扩增出0.3pg的阳性模板,显示建立的PCR方法具有高效、快速、特异、灵敏的特点,可用于口岸猴痘病毒的检疫。 相似文献
16.
17.
1993年12月15日南京某养犬场从香港引进种用宠物犬29只,在隔离检疫期间,经粪检发现该批宠物犬感染狮蛔虫和双槽线虫,现简报如下.该批犬进境后笼养,隔离15天后分别采集每只犬的新鲜粪便,用饱和盐水漂浮法进行寄生虫卵检查,结果镜检发现编号为8、11和18的宠物犬粪便中有狮蛔虫卵,其卵囊呈圆形,灰褐色,表面光滑.中央有一大卵胚,大小scum左右;另一编号为20的犬粪便中除狮蛔虫卵囊外.还有双槽线虫(Diphy-lobothriumtetum)卵囊,呈淡黄色,椭圆形,壳薄,一端有小盖,内含本分裂卵胚.大小约50-68urn。犬消化道寄生虫病,特别是… 相似文献
18.
通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增了新城疫病毒(NDV)F48E8株核衣壳蛋白(NP)基因,并克隆到pUC18中,得阳性克隆pUCNP.应用分子克隆技术,将NP基因导入鸡痘病毒(FPV)转移载体pFG1175-1中P7.5启动子的下游,得到含NDV NP基因的质粒pFGNP1175-1.利用脂质体转染技术,将该质粒转染FPV疫苗株282E4感染3~4 h的鸡胚成纤维细胞,采用蓝斑筛选方法纯化多次,得到稳定的重组FPV.用狄高辛标记的探针进行斑点杂交实验,结果表明pFGNP1175-1已与FPV 发生同源重组;用抗NDV的SPF鸡的阳性血清进行间接免疫荧光实验,证实重组FPV在感染细胞中表达了F48E8株NP蛋白.该基因两端部分序列与已发表的D26株NP基因对应区域的核苷酸同源性为89.1%,推断的氨基酸同源性则为93.1%. 相似文献
19.
20.
根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)美洲株的基因序列,设计U1和U6两套PCR引物和荧光探针,建立了扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR用于检测美洲型PRRSV。用10倍倍比稀释的质粒DNA、cDNA、RNA进行扩增以检测其灵敏度,同时对猪瘟(HCV)、猪伪狂犬(PRV)等7种病毒进行特异性检测。结果显示建立的扩增U1和U6基因的荧光RT-PCR可用于检测PRRSV,其灵敏度为10个拷贝的质粒DNA,而与HCV等非PRRSV无交叉反应。本研究所建立的荧光RT-PCR具有快速、灵敏、准确、低污染等优点,可用于PRRSV样品的检测。 相似文献