新城疫病毒作为疫苗载体的研究进展

在综述新城疫病毒(NDV) 的分子生物学特征、致病本质、复制机理以及利用反向遗传操作技术获得NDV的感染性克隆的基础上,着重介绍了以NDV作载体,将报告基因、功能基因包括鸡传染性法氏囊病毒VP2基因及流感病毒HA基因等插入NDV基因组的不同位置构建重组新城疫病毒,并对外源基因进行成功表达的研究进展。同时对DNV作为新的疫苗载体表达外源基因的可行性及未来应用前景进行了初探。     

猪瘟病毒E0基因在CHO细胞中的表达

将EGFPE0融合基因插入哺乳动物细胞表达载体pCI-dhfr中,构建重组质粒pCI-EGFPE0。将重组质粒转染CHO(dhfr-),在荧光显微镜下观察到少数细胞呈现绿色荧光,表明转染成功。通过MTX加压筛选后,在荧光显微镜下观察到多数细胞呈现强绿色荧光,表明重组融合蛋白EGFPE0在CHO细胞中得到大量表达。高效表达重组融合蛋白细胞克隆的获得为进一步大量制备可溶性的猪瘟病毒E0糖蛋白、制备其单抗筛选抗原表位及研究E0蛋白的生物学功能奠定基础。     

牛肠道病毒TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为建立快速、准确地检测牛肠道病毒(BEV)及对北京周边地区牛群中BEV感染情况进行检测,本研究通过设计合成扩增BEV 5＇UTR序列的引物及探针建立了检测BEV的通用型TaqMan荧光定量RT-PCR快速检测方法并对反应条件进行了优化.该方法对BEV的最小检测量为0.1 TCID50/0.1mL,敏感性比病毒分离法高10倍.而且该方法对其他牛相关病毒均无交叉反应.用3批试剂对3个稀释度的BEV培养物进行批内和批间重复性试验,其变异系数均小于1.1％,表明该方法具有良好的重复性.采用该方法对北京周边地区牛群采集的852份临床样品进行检测,并与病毒分离方法比较,两种方法检测结果完全一致.因此,本研究所建立的BEVTaqMan RT-PCR检测方法具有快速、准确、特异性强、敏感性高、重复性好的优点,为国内BEV的检测提供了有力的技术支持.本研究首次通过病毒核酸检测证明了我国部分地区的牛群中存在BEV感染.     

安徽省农村居民医疗机构信任现状与影响因素

农村居民对医疗机构的信任直接影响中国分级诊疗目标的实现。通过对安徽省456名农村居民的调查,分析农村居民对不同层级医疗机构的信任现状以及影响因素。结果显示,农村居民对不同层级医疗机构的信任具有“差序格局”特征,对三级医院信任水平最高,对二级医院信任水平次之,对乡镇卫生院的信任水平最低。健康状况、生活质量、医疗透明度等对农村居民的医疗机构信任有较大影响。为了提升农村居民对医疗机构尤其是基层医疗机构的信任,医疗机构及其主管部门在加强业务建设的同时,需提升医疗机构的透明度,并增加与农村居民的接触与沟通。     

泸州烟区植烟土壤养分的区域分布特征

[目的]探明植烟土壤养分的含量及区域分布特征,为泸州烟区烟叶生产的合理施肥提供科学依据.[方法]采用蛇型采样法采集0～20 cm耕层土壤混合土样,参照中国植烟土壤分类标准,研究泸州烟区叙永县和古蔺县植烟土壤pH、有机质、全氮、碱解氮、有效磷和速效钾的含量及其区域分布状况.[结果]古蔺县和叙永县土壤pH平均分别为6.12...     

水稻白叶枯病抗性基因的鉴定、定位、克隆与育种应用

水稻白叶枯病是由黄单胞杆菌水稻变种(Xanthomonas oryzae pv.oryzae Xoo)引起的细菌性病害,发掘、鉴定和利用新抗源是控制水稻白叶枯病的有效途径.白叶枯抗性基因定位和克隆,使分子标记辅助选择和转基因技术在白叶枯抗病育种中发挥了重大作用,也使人们在分子水平对白叶枯病抗性机制有了深刻认识.文章综述了白叶枯病抗性基因定位,克隆以及在育种方面的应用,并对如何利用抗病育种减轻白叶枯病的危害提出了几点建议.     

我国糕点食品行业质量安全分析及应对措施

通过对我国糕点行业质量安全方面存在的问题进行分析研究,提出规范我国糕点行业生产所必须采取的措施,以提高我国糕点行业产品质量的整体水平,从而维护消费者的切身利益。     

猪瘟病毒EO基因在CHO细胞中的表达

将EGFPEO融合基因插入哺乳动物细胞表达载体pCI-dhfr中,构建重组质粒pCI-EGFPE0.将重组质粒转染CHO(dhfr'),在荧光显微镜下观察到少数细胞呈现绿色荧光,表明转染成功.通过MTX加压筛选后,在荧光显微镜下观察到多数细胞呈现强绿色荧光,表明重组融合蛋白EGFPE0在CHO细胞中得到大量表达.高效表达重组融合蛋白细胞克隆的获得为进一步大量制备可溶性的猪瘟病毒E0糖蛋白、制备其单抗筛选抗原表位及研究E0蛋白的生物学功能奠定基础.     

体外鉴定的禽流感病毒T细胞表位的免疫效果研究

为验证来源于禽流感病毒的、可与鸡MHCI类分子结合的九肽KILTIYSTV和LLLAIVSLV的免疫原性,使用TIGECPKYV、LLLAIVSLV和KILTIYSTV3条多肽免疫BALB／c小鼠,加强免疫时和加强免疫1、2、3、4、5周后分别采血,流式细胞术测定免疫前后小鼠外周抗凝血中CD8^＋淋巴细胞的变化情况;加强免疫后14d进行MTT试验;首次免疫3周后进行DTH试验;ELISA检测免疫前后小鼠分泌IFN-γ的变化情况。结果表明,KILTIYSTV、LLLAIVSLV、TIGECPKYV免疫后分别引起CD8^＋T淋巴细胞4．2％、4．0％和0．2％的额外增殖。KILTIYSTV和LLLAIVSLV免疫组的IFN7的增长和迟发型变态反应均显著高于对照组。简言之,与重建的MHCⅠ类分子结合的多肽KILTIYSTV和LLLAIVSLV可以刺激小鼠产生特异性CTL反应,而不结合的多肽TIGECPKYV刺激小鼠未产生特异性CTL反应。     

拉布拉多犬和德国牧羊犬干扰素alpha基因克隆及测序

本研究采用ＰＣＲ技术扩增和克隆了拉布拉多犬和德国牧羊犬的扰素基因ａｌｐｈａ ＩＰＮ。测序结果显示拉布拉多犬和德国牧羊犬的ａｌｐｈａ ＩＦＮ基因序列一致,全长均为５１３个核苷酸,共编码１７０个氨基酸。两种犬ａｌｐｈａＩＦＮ蛋白分子量均为１８．５０４ＫＤ。结果也揭示了犬属动物的ａｌｐｈａＩＦＮ基因十分保守,公丰在０．３％的变异。