基于1H NMR技术的奶牛I型和II型酮病血浆代谢谱分析

【目的】运用代谢组学中¹H NMR技术方法筛选出Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病与健康对照组之间血浆差异性代谢物。【方法】选取产后7—28 d,平均胎次为2—3胎的实验奶牛50头。根据血糖（Glc）、β-羟丁酸（BHBA）和游离脂肪酸（NEFA）的含量与临床发病特点分为Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病与健康对照组,其中Ⅰ型酮病20头,Ⅱ型酮病为20头,健康对照组为10头。当患病牛血中BHBA＞1.20 mmol·L^-1,Glc＜2.50 mmol·L^-1,NEFA＞0.50 mmol·L^-1时,被认为患I型酮病;当患病牛血浆中BHBA＞1.20 mmol·L^-1,Glc＞2.80 mmol·L^-1, NEFA＞0.50 mmol·L^-1时,被认为患II型酮病;当奶牛血中BHBA＜1.00 mmol·L^-1,Glc＞3.75 mmol·L^-1,NEFA＜0.40 mmol·L^-1时,被认为健康对照组。运用代谢组学中¹H NMR技术对实验奶牛的血浆代谢物分析,获得相应的代谢图谱,并结合多元统计分析中的主成分分析（PCA）、正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）的模式判别,从而寻找潜在的生物标记物。【结果】通过¹H NMR分析,Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病与健康对照的代谢图谱差异明显,3组代谢产物各自聚集,分散区域显著。Ⅱ型酮病与健康对照比较,获得7种血浆差异代谢物,主要为丙氨酸、赖氨酸、β-羟丁酸、丙酮、乳酸等,其中血浆中β-羟丁酸、丙酮、乳酸浓度升高;丙氨酸、赖氨酸、酪氨酸、肌酸浓度呈现下降。Ⅰ型酮病与健康对照组比较,获得19种血浆差异代谢物,主要为酪氨酸、苯丙氨酸、肌酸、β-羟丁酸、丙酮等,其中β-羟丁酸、丙酮浓度升高;酪氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸、组氨酸、丙氨酸、肌酸、肌醇、β-葡萄糖、谷氨酰胺、谷氨酸、柠檬酸、α-葡萄糖、甲酸、甘氨酸、O-乙酰葡萄糖胺、磷酸胆碱浓度呈现下降。Ⅰ型酮病与Ⅱ型酮病比较,获得24种血浆差异代谢物,主要为柠檬酸、组氨酸、β-葡萄糖、异亮氨酸、极低密度脂蛋白/低密度脂蛋白等,其中β-羟丁酸、低密度脂蛋白和极低密度脂蛋白、异亮氨酸、缬氨酸、丙酮、亮氨酸、乙酸浓度升高;柠檬酸、酪氨酸、组氨酸、肌醇、谷氨酰胺、β-葡萄糖、苯丙氨酸、谷氨酸、α-葡萄糖、赖氨酸、甲酸、甘氨酸、磷酸胆碱、丙氨酸、O-乙酰葡萄糖胺浓度呈现下降。【结论】¹H NMR技术与多元统计分析的有效结合能够有效的筛选出Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病与健康对照组之间血浆差异性代谢物,为进一步探究奶牛Ⅰ型酮病、Ⅱ型酮病的发病机理和诊断与防治提供了新的方向。     

过瘤胃脂肪对泌乳奶牛生殖机能的影响

本研究旨在了解过瘤胃脂肪对奶牛产后发情的影响,为提高集约化牛场奶牛繁殖性能提供科学依据。选取年龄、体重、胎次及泌乳量相近的健康泌乳奶牛40头,按添加过瘤胃脂肪的量分为高（H,400g/d·头）、中（M,300g/d·头）、低（L,200g/d·头）和对照组（0g/d·头）四组,每组10头,试验期为产后30d至70d。在产后30d、45d、60d、70d以及发情时记录试验奶牛采食量、体况分及泌乳量,调查繁殖性能,检测血浆血糖、游离脂肪酸、雌激素和孕酮的浓度。结果显示,试验奶牛繁殖性能从高到低依次为H组、M组、L组和对照组;第一情期血浆葡萄糖浓度为H组〉M组〉L组〉对照组（P〉0.05）;第一情期间血浆雌激素水平随着能量摄入增加而升高,孕激素水平变化不大（P〉0.05）。M组奶牛产后发情最早,繁殖性能最高。本研究得出结论：集约化奶牛场奶牛日粮能量水平能明显地影响奶牛产后生殖机能。日粮能量摄入越低,奶牛配种率与受胎率越低,产犊间隔越长。产后30d每天饲喂300g过瘤胃脂肪能改善奶牛生殖机能,提高奶牛繁殖性能。     

奶牛酮病与胰岛素抵抗关系探讨

为探讨奶牛酮病与胰岛素抵抗的关系,选取产后14 d的酮病组(T)16头和健康对照组(C) 24头奶牛,比较酮病与对照组在能量平衡、肝功能状况、氧化应激、胰岛素敏感性以及耐糖量试验的差异.结果显示:酮病奶牛机体处于能量负平衡状态;肝功能指标中酮病组奶牛血浆天门冬氨酸转移酶、直接胆红素含量极显著高于健康对照组(P＜0.01),总胆红素含量显著高于健康对照组(P＜0.05),胆碱酯酶含量极显著低于健康对照组(P＜0.01),总蛋白含量显著低于健康对照组(P＜0.05),丙氨酸氨基转移酶、间接胆红素、白蛋白、球蛋白含量与健康对照组差异不显著,表明病牛肝脏受到一定程度的损害;酮病组奶牛血浆丙二醛、超氧化歧化酶含量显著高于健康对照组(P＜0.05),表明病牛处于氧化应激状态;酮病奶牛血浆胰岛素敏感指数显著低于健康对照组(P＜0.05),表明病牛的胰岛素敏感性下降.葡萄糖耐量试验显示部分酮病奶牛血糖含量显著高于健康对照组(P＜0.05),在注射完葡萄糖120min后血糖浓度高达4.24 mmol/L,组间差异极显著(P=0.006),表明病牛存在胰岛素抵抗.奶牛酮病与胰岛素抵抗存在密切的关系,可能与肝功能与氧化应激有关.     

兔病毒性出血症的诊断

兔出血症俗称兔瘟 ,是兔的一种急性高度接触性传染病。以呼吸系统出血、实质器官水肿、淤血及出血性变化为特征。本病于 1984年初 ,首先在我国江苏等地爆发 ,随即蔓延到全国多数地区。此后 ,世界上许多国家和地区也报道了本病。兔病毒性出血症在临床上易与兔巴氏杆菌相混淆。因此 ,有必要通过实验室来确诊该病 ,提出正确的防治措施 ,确保养兔业的发展。现将养兔户发生的兔出血症诊治介绍如下 :1　发病情况某养兔户饲喂种兔、子兔、青年兔共 70余只 ,2 0 0 2年 5月2 6日突然有 1只死亡 ,随后连续发病 ,5ｄ内共死亡 3 0只 ,死亡率高达 44 %。…     

改良的水杨醛比色法检测奶牛血酮、尿酮的研究

本研究采用改良式水杨醛比色法与水杨醛比色法测定11头对照组奶牛、8头尿酮阳性奶牛及5头酮病奶牛血酮，尿酮含量。结果显示两种方法在测定血酮、尿酮方面差异不显著，改良式水杨醛比色法的回收率为108％，线性范围为3—389μg/mL，批内变异为2．94％-8．97％，批间变异为3．48％-11．07％。稳定性试验l周，血酮，尿酮无显著变化。因此，改良的水杨醛比色法测定血酮、尿酮具有简便，准确性较好，线性范围宽，稳定性较好及批量测定等特点。     

猫的心电轴,心电位及QRS复合波波幅的测定

，吴明福，赵君明对４０只０．５～９岁，平均体重３．４１±０．８８ｋｇ（２．２５～６．２５ｋｇ）平均心率１０５±３１次ｍｉｎ（７１～２５０次／ｍｉｎ）观赏猫，右侧卧保定，以８４６合剂麻醉（０．１ｍｌ／５００ｇ体重），１０～２０ｍｉｎ后记录心电图。心电图的测定项目如下：心电轴和心电向量分类（无偏、右偏，左偏）和测定；Ⅰ．Ⅲ导联在不同心电轴时和ａＶＬ、ａＶＦ导联在不同心电位时心电图ＱＲＳ复合玻的波型分类及比率，心电轴偏移分布率和心电位分布率；在不同心电轴和心电位时Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、ａＶＲ．ａＶＩ、ａＶＦ各导联ＱＲＳ复合波的波幅。     

应用内含子法构建PC基因mRNA竞争RT-PCR内参照

 运用PC基因mRNA与PC基因DNA相比缺少1个81bp内含子序列的基本原理,应用PCR技术和生物工程原理,通过1对引物,进行1次克隆,成功构建了PC基因mRNA的466bp竞争DNA模板重组质粒,PC基因mRNA与PC基因DNA可以互为内参照。为应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测糖代谢过程中PC基因mRNA水平奠定方法学基础。     

鸡有机磷农药中毒试验的研究

选取三组健康鸡,每组5只,平均体重分别为1.75±0.22 kg,1.8±0.24 kg,1.83±0.25 kg。未攻毒组为对照组,口服敌百虫、敌敌畏为攻毒组。口服三次敌百虫,口服一次敌敌畏,口服后,隔7 h采取血液,测定血中ChE、LDH、ALT、AST、RBC的变化。结果表明:攻毒组血清胆碱酯酶活性极显著地低于对照组,随着剂量的增多,时间的延长,胆碱酯酶的活性越来越低。但攻毒组血清LDH、ALT、AST、RBC值无显著变化。     

当前牛病的发生特点和流行趋势

<正>1当前牛病的发生特点1.1牛疫病种类增多,发病率增高,危害严重当前常发的疫病有口蹄疫、轮状病毒感染、冠状病毒感染、恶性卡他热、牛流行热、大肠杆菌病、沙门氏菌病、布氏杆菌病和副结核病等。呈世界性分布,各国发生程度不同。同时流行新的病毒性传染病如牛玻纳病、心水病、中山病、赤羽病、牛病毒性     

乳脂球膜蛋白的研究进展

乳脂球膜蛋白是乳腺在泌乳时包被在脂肪滴外的膜蛋白。乳脂肪球膜（milk fat globule membrane,MFGM）是磷脂、鞘脂和多种蛋白质组成的3层膜结构。乳脂球膜蛋白包含100余种蛋白质,含量最丰富的8种蛋白质为黏液素1、黄嘌呤氧化还原酶、黏液素15、CD36、嗜乳脂蛋白、乳凝集素、脂肪分化相关蛋白和脂肪酸结合蛋白。乳脂球膜蛋白已被证明具有丰富的开发利用价值,包括：反映奶牛母体的生理状态;作为幼体的营养和免疫来源,会影响犊牛的发育和母源抗体;会影响人和动物的免疫调节和体质,未来可能应用于疾病的治疗。作者介绍了乳脂球膜蛋白的来源、组成及一种新建立的乳脂球膜蛋白结构,阐述了几个主要蛋白的生理特性及乳脂球膜蛋白的研究进展,并对未来的研究方向提出建议。