禽致病性大肠杆菌cOmpT单克隆抗体的研制及其识别抗原表位的鉴定

旨在制备禽致病性大肠杆菌（APEC）染色体编码外膜蛋白（cOmpT）的特异性单克隆抗体,本研究利用实验室已构建的APEC cOmpT重组表达质粒pET-28a-compT,经IPTG诱导表达后,获得以包涵体形式存在的约36 ku的重组蛋白cOmpT,利用尿素浓度梯度透析复性获得纯化蛋白cOmpT,并以此免疫BALB/c小鼠。建立间接ELISA检测方法,最适抗原包被浓度为0.625 μg·mL^-1,最适血清稀释度为1：6 400。4次免疫后取小鼠脾进行细胞融合,采用有限稀释法多轮筛选后得到3株能稳定分泌针对cOmpT蛋白的单克隆抗体,分别命名为1G8、2C3和2G3,均为IgG2b亚类。3株杂交瘤细胞上清ELISA抗体效价分别为1：200、1：3 200和1：3 200。Western blot结果显示,3株单抗均能与cOmpT发生特异性反应,而不与其他受检菌发生交叉反应。运用原核表达系统对compT基因进行截短表达,对单克隆抗体针对的cOmpT抗原表位进行鉴定,结果显示单抗1G8、2C3和2G3识别的抗原表位分别是⁸³DQDWMDS⁸⁹、⁹⁰SNPGTW⁹⁵和¹⁹⁷TFKYSGW²⁰³。本研究成功制备了3株抗cOmpT蛋白的单克隆抗体,并对其识别的抗原表位进行了鉴定,为cOmpT蛋白功能研究和APEC新型表位疫苗研发奠定了基础。     

鸡冠癣病及防治措施

鸡冠癣又称头癣或黄癣,是由头癣真菌引起的一种传染病。在临床上,该病的主要特征是在患病鸡的头部无毛处,尤其是在鸡冠上长有黄白色鳞片     

山羊类ES细胞的分离与培养

旨在优化并建立有利于山羊类ES细胞生长的饲养层细胞、培养基、细胞因子和传代方法。本研究选择武汉市本地白山羊配种6～7 d后的胚胎,通过全胚培养法、酶消化与机械分离结合法分离山羊类ES细胞,并在不同的细胞饲养层中饲养、在培养基中添加不同的生长因子、采用不同的传代方法,比较不同培养条件对山羊类ES细胞生长和增殖的影响。通过碱性磷酸酶染色和免疫组化染色法鉴定ES细胞特异生物标记AKT、SSEA-1和Oct-4的表达,并将得到的山羊类ES细胞进行体外分化。结果表明,与小鼠胎儿成纤维细胞(Mouse embryonic fibro-blast,MEF)和山羊胎儿成纤维细胞(Goat embryonic fibroblast,GEF)相比,C2C12更有利于细胞的贴壁,但差异不显著(P>0.05);细胞传代时,在高浓度细胞因子LIF(Leukemia inhibitory factor)和SCF(Stemcell factor)中处理ICM(Inner cell mass),更有利于细胞传代(传至第8代);培养基中添加LIF和SCF的同时,添加肝素和胰岛素,更有利于细胞的传代(传至第9代);山羊类ES细胞中SSEA-1(...     

我院实施三甲医院医疗质量管理对完善评价体系提高综合效益的体会

医疗质量管理是医院管理的核心，也是医院生存发展和改革成败的关键，本文以医院分级管理和标准化管理为依据，并结合我院实际，就健全和完善我院实施三甲医院医疗质量管理、质量评价体系和提高效益谈谈我们的体会。1评价体系的结构特点及重点以分级管理、标准化管理和医疗质量三个环节为控制重点的医疗质量管理评价体系，有以下结构特点及重点：1．1结构特点：（1）医疗质量评价重点控制住院、出院病历质量。采取防机检查住院病历和出院病历质量相结合的方法．新入院病人除24小时内必须完成住院病历外，还要求有L级医生的诊治意见．住院期…     

绿洲灌区固定道垄作对春小麦土壤水分变化动态的影响

研究了固定道垄作条件下,春小麦的土壤水分动态变化.结果表明:不同栽培措施下,0~120 cm土层土壤贮水量的变异系数随着土层的加深而减小,其中剧变层(0~30 cm)的土壤贮水量因受降水和灌溉的影响变化剧烈;小麦拔节期固定道垄作0~60 cm土壤贮水量高于其它处理5 mm左右;抽穗到灌浆期,土壤贮水量下降幅度最大,表现出良好的供水性,可节水200 mm左右,水分利用效率较传统提高31.66%.     

猪场沼液微藻净化前的营养优化

微藻净化猪场沼液是一种环保的、低成本的、前景广阔的资源再利用方式。通过对沼液的营养优化来提高微藻的净化效率,包括氨氮浓度的控制,碳氮比、氮磷比的合理调配,以及过量重金属、抗生素胁迫作用的消除。这些优化将为微藻净化沼液产业化发展打下基础。     

“黎婆婆”的安全经

“黎婆婆”是江西省吉水县供电有限责任公司安监部主任黎小安,因为他在安全会、施工现场逢人就讲：“我们供电企业抓安全,必须要有婆婆嘴,要经常唠叨。”所以公司职工背地里称他为“黎婆婆”。     

哺乳仔猪的"六关"和"三防"

养育哺乳仔猪的目的是使其发育良好、体质健壮、快速生长、降低发病率和死亡率,提高成活率和断奶窝重,为仔猪断奶后的正常生长打下良好的基础。因此,要根据哺乳仔猪的生物学特点和生理特点,采取相应的饲养管理技术措施,精心护理、科学养育,认真抓好仔猪的"六关"和"三防","六关"即出生关、初乳关、乳头定位关、调教补料关、奶膘关和断奶关,"三防"即防冻饿挤压、防各种腹泻和防僵猪,确保仔猪在哺乳期内有较高的成活率和断奶窝重。     

细菌内毒素对畜禽损伤研究进展

内毒素是革兰阴性菌的主要致病因子之一,可危害畜禽健康,影响养殖经济效益,但人们对其重视程度还远远不够.从内毒素的结构、对畜禽的危害、其作用的信号通路和内毒素耐受及防治措施等多个角度对内毒素的相关研究进展进行综述.     

山羊类ES细胞的培养

将187枚山羊胚胎按如下方式培养在GEF饲养层上:①桑椹胚直接培养;②囊胚直接培养;③囊胚去透明带后培养;④囊胚去透明带并被撕裂成碎片后培养;⑤囊胚去透明带后胰蛋白酶消化成小细胞团培养。将上述培养所获取的18个内细胞团(ICM)均分为2组,第1组始终从生长物中挑取较为浓密的类ES细胞团传代,第2组始终让培养物生长到铺满培养皿(瓶)底再传代。结果显示:①桑椹胚、囊胚直接培养以及囊胚被消化成小细胞团后培养,均未获得ICM;囊胚去透明带后培养,获得ICM的数量占参试囊胚数的30%;囊胚去透明带并被撕裂成碎片后培养,获得ICM的数量占参试囊胚数的60%。②始终从培养物中挑取类ES细胞团进行传代,传至第4代后已无细胞可传;而将培养物培养至长满培养皿(瓶)底后再一起传代,细胞可传11代以上,且其中的类ES细胞团呈大量扩增趋势。