结核分枝杆菌Rv3519表达与其生物被膜形成能力的研究

采用结晶紫染色检测结核分枝杆菌生物被膜的形成能力,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测生物被膜态的不同结核分枝杆菌Rv3519表达水平,分析Rv3519基因表达与结核分枝杆菌生物被膜形成能力的关系。结果表明:临床分离株产膜能力较H37Rv明显偏低,差异显著(P0.01);临床分离株之间生物被膜产量差异不显著(P0.05);生物被膜态的分离株较标准株Rv3519基因表达量偏低,差异显著(P0.01)。说明结核分枝杆菌生物被膜形成能力与Rv3519基因表达水平相关,Rv3519基因可以作为结核分枝杆菌生物被膜形成能力的潜在分子诊断标志。     

荔枝大小年叶片营养比较研究

<正>荔枝是我国重要的亚热带果树,是广东、广西、福建及海南等省区主要果树树种之一。荔枝生产上普遍存在的大小年现象,严重地影响了荔枝的经济效益。本试验对5个荔枝主栽品种大年和小年叶片的营养状况进行了研究,以期为生产上控制荔枝大小年结果提供一定的理     

<检验核医学>教学中实验带动自学的一点尝试

《检验核医学》是一门医学边缘学科，与统计学有密切联系，但由于教学的安排，学生在学习本课程前还没学过统计学，而检验核医学教学时数较少，不可能系统地讲解统计学知识。因此，让学生自学一部分与统计学知识有关的内容非常必要。但部分学生自学的自觉性和主动性较差，为了提高学生自学的自觉性和主动性，我们试图在《检验核医学》教学中，通过实验来带动学生自学。我们选择“放射性计数测量的统计学处理”这节内容，进行了这方面的尝试，现报道如下。１　对象和方法１．１　对象　随机抽取１９９４级检验本科班（简称１９９４检）５８人…     

家蚕中肠型脓病的发生规律及防治技术

1家蚕中肠型脓病的病原 家蚕中肠型脓病，又叫家蚕质型多角体病毒病，其病原为家蚕质型多角体病毒（Bombyxmori Cytoplasmic Polyhedrosis，BmCPV）。该病原属于呼肠弧病毒科（Reoviridae）质型多角体病毒属（Cy．povirus），主要寄生于家蚕中肠上皮圆筒状细胞的细胞核内（图1）。家蚕质型多角体病毒以游离态病毒粒子和多角体2种形式存在于病变细胞中：     

IL-24对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、细胞周期和缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的观察IL-24对瘢痕疙瘩成纤维细胞（KF）的抑制效应及缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达的影响。方法建立KF组、携带绿色荧光蛋白表达质粒的KF组（pEGFP-KF组）、携带转染IL-24基因表达质粒的KF组（IL-24-pEGFP-KF组）,用噻唑蓝法及流式细胞术检测KF增殖、细胞周期变化。建立KF、pEGFP-KF、IL-24-pEGFP-KF细胞株裸鼠移植瘤模型,免疫组织化学检测KF中HIF-1α表达。结果 IL-24-pEGFP-KF组较pEGFP-KF组、KF组到达平台期延迟,IL-24明显抑制了细胞增殖（P〈0.05）。IL-24-pEGFP-KF组的G0/G1期比例明显高于pEGFP-KF组、KF组,而S、G2/M期比例明显降低（P〈0.05）。IL-24-pEGFP-KF组的HIF-1α表达明显低于pEGFP-KF组和KF组。结论 IL-24可抑制KF增殖和HIF-1α表达,阻止细胞周期于G0/G1期。     

湛江市260名健康成人尿δ－氨基酮戊酸的检测

湛江市２６０名健康成人尿δ－氨基酮戊酸的检测赵南（湛江市职业病防治所）唐旭东（广东医学院中心实验室）铅接触工人尿中δ－氨基酮戊酸（δ－ＡＬＡ）含量变化比较早，且有一定特异性；δ－ＡＬＡ含量增高可反映铅接触和中毒程度。另外，利用δ－ＡＬＡ对铅作业工人进...     

家蚕微孢子虫伴侣蛋白CCTθ的鉴定

家蚕微粒子病是一种严重危害蚕种生产的蚕病,被列为蚕桑生产唯一的检疫对象.分子伴侣协助底物蛋白折叠、装配和转运,但目前对家蚕微孢子虫分子伴侣CCT(chaperonin containing tailless complex polypeptide)的研究较少.本研究克隆了家蚕微孢子虫NbCCTθ基因,构建原核表达载体pET-28a-NbCCTθ表达重组蛋白,纯化后制备多克隆抗体.间接免疫荧光分析结果显示,NbCCTθ在家蚕微孢子虫的整个生命周期中均表达,但在不同发育阶段分布不同;在成熟孢子中主要分布于细胞质和质膜上,在裂殖增殖期主要分布于细胞质中,孢子形成期后期定位在细胞核中.研究结果为进一步探索NbCCTθ的具体功能奠定了基础,对家蚕微粒子病的防治也有一定的指导意义.     

猪链球菌病防治措施

猪链球菌病是由猪链球菌感染所引起的一些疾病的总称。以E群链球菌所致的淋巴结脓肿最为常见，以D群链球菌所致的败血性链球菌病危害最大。该病的流行性和病原复杂，给养猪业造成很大影响，防治措施应根据当地流行病学调查进行拟定。     

家蚕感染BmCPV相关未知功能蛋白LOC101742613的基因克隆及表征特征分析

在感染家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrovirus,BmCPV)的家蚕中肠组织中发现一个表达量明显下调的未知蛋白LOC101742613,与棉铃虫(Helicoverpa armigera)的未知蛋白LOC110378285的序列一致性为51%。利用PCR技术克隆获得了编码该蛋白质的cDNA,其序列全长为1 114 bp,最大开放阅读框(ORF)为993 bp,编码的蛋白质由330个氨基酸残基组成,预测蛋白质分子质量为36.6 kD,等电点为4.31。实时荧光定量PCR分析发现目的基因主要在家蚕的脂肪体、精巢、卵巢和头部组织中表达,且家蚕中肠感染BmCPV后48 h和72 h其mRNA的表达量显著下调,分别为对照组的7.3%和2.1%。通过构建重组表达载体pET28a/BGIBMGA014203对去掉信号肽的目的蛋白进行原核表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析发现重组蛋白主要在包涵体中,分子质量约为37 kD。研究结果为进一步阐明目的基因的生物学功能奠定了基础。     

家蚕微孢子虫海藻糖合成酶基因Nbtps1的克隆与原核表达

海藻糖在保护细胞质膜和生物大分子空间结构,维持胞内渗透压增大的过程中发挥重要作用,海藻糖合成酶是海藻糖合成途径中的一个关键酶。通过检索微孢子虫基因组数据库发现,家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)基因组中含有4个海藻糖合成酶基因,其中Nbtps1基因的开放阅读框长1 386 bp,为单外显子结构,编码461个氨基酸残基,预测蛋白质分子质量53.7 k D,等电点5.19。Nb TPS1蛋白序列含有1个糖基转移酶结构域和4个潜在的N-糖基化位点,亚细胞定位预测该蛋白质位于细胞质中。多重序列比对分析结果表明,Nb TPS1与东方蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)、兔脑炎微孢子虫(Encephalitozoon cuniculi)海藻糖合成酶的氨基酸序列相似度分别为59.0%、54.7%,系统发育进化树显示三者的亲缘关系与之相符。构建重组表达载体Nbtps1/p ET-28a(+)并转化大肠埃希菌Rosetta(DE3)菌株,经IPTG诱导表达及亲和纯化后获得最终质量浓度为1.18 mg/m L的重组融合蛋白His-Nb TPS1。用纯化后的融合蛋白制备兔多克隆抗体Anti-Nb TPS1,利用间接ELISA法测定多克隆抗体的效价达1∶25 600,并通过Western blotting检测验证了该多克隆抗体的特异性,为研究Nb TPS1的生物学功能以及家蚕微孢子虫的间接免疫检测奠定了实验基础。