猪源沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析

对采自贵州省某规模化养猪场的57份腹泻仔猪肠道样本进行沙门氏菌的分离鉴定,并用药敏纸片法对其进行耐药性分析。结果,共分离鉴定沙门氏菌20株;药敏试验表明所鉴定沙门氏菌对抗菌药物的耐药率从高到低依次是麦迪霉素、红霉素、卡那霉素、庆大霉素和诺氟沙星,且均为多重耐药株,耐药种类达12种以上。研究结果对合理使用药物控制仔猪沙门氏菌感染提供了理论依据。     

对黑山羊肠内容物中魏氏梭菌的研究

通过分离纯化，培养特性和生化反应的观察，毒素溶血活性和最小致死量的测定及中和试验对正常和猝死黑山羊肠内容物中的魏氏梭菌进行了初步研究，结果表明，猝死黑山羊肠内容物魏氏梭菌的分离率为100％，而正常黑山羊肠内容物的分离率只有40％（16／40），肠内容物中魏氏梭菌主要是A型；魏氏梭菌不同分离株在培养特性，生化反应，毒素溶血活性和小白鼠最小致死量上存在一定的差异。     

口蹄疫检测能力比对试验的结果分析

对22份盲样采用RIHA、RT—PCR、LB—ELISA和3ABC—I—ELISA进行了检测。结果表明，在RIHA试验中，X079、X100、X232盲样分别为口蹄疫A型、O型和Asia I型抗原阳性；X136为猪传染性水泡病抗原阳性；X141、X165为阴性样本。在LB—ELISA中，L222、L271、L323、L431、L502盲样为O型口蹄疫抗体阳性；L283、L307、L457、L550、L557为阴性样本。在3ABC—I—ELISA中，Y067、Y123盲样为口蹄疫感染抗体阳性；Y167为阴性样本。在RT—PCR检测中，Z075盲样扩增出分子长为634bp、483bp和278bp3条特异性的DNA片段，Z126盲样扩增出分子长为634bp和278bp2条特异性的DNA片段，确定为口蹄疫病毒；Z087为阴性样本。     

贵州新城疫分离物的形态学观察与细胞病变效应

贵州新城疫病毒分离物能够在鸡胚成纤维细胞上表现生长，引起特征性的细胞病变效应。本试验用鸡胚成纤维细胞增殖病毒，观察细胞病变；同时采用血凝试验、间接荧光抗体试验检测感染细胞的病毒抗原。结果表明，接种病毒的细胞24h即可观察到细胞病变——合胞体巨细胞的形成；培养上清液和感染细胞的血凝效价分别达到2^3和2^6；用间接荧光抗体试验在细胞浆中观察到特异性黄绿色荧光；电镜观察到大多数病毒粒子呈球彤．直径100-150nm．囊膜清晰．可见柱状紧密排列的纤突结构．     

口蹄疫实验诊断技术研究进展

概述了口蹄疫的生物学试验、血清学诊断技术与分子生物学诊断技术。在生物学诊断技术方面，对口蹄疫的诊断主要依靠动物实验、细胞培养。血清学诊断技术包括补体结合试验、病毒中和试验、凝集试验、免疫扩散、酶联免疫吸附试验（ELISA）等。随着分子生物学的发展，对口蹄疫的诊断从细胞水平发展到分子水平，国内外相继建立了口蹄疫核酸杂交、反转录聚合酶链反应（RT—PER）、核酸序列分析等分子生物学诊断技术。这些方法比传统诊断方法具有更高的敏感性和特异性。     

瓯江彩鲤简达气单胞菌的16S rDNA分子鉴定与药敏分析

为了研究分离自患病瓯江彩鲤的1株气单胞菌(HX201006-2)的分类地位与药敏特性,试验采用细菌的16S rDNA基因的分类鉴定与生化方法对该分离菌进行研究,通过NCBI的Blast搜索同源序列,应用MegAlign软件进行序列比对并构建系统发育树。结果表明:该分离菌的16S rDNA(GenBank登录号为JF713702.1)基因,与简达气单胞菌类聚,初步确定该分离菌株的分类地位,结合分离菌的形态、生理生化特征,鉴定该分离菌为简达气单胞菌;该分离菌对头孢噻吩、丁胺卡那、庆大霉素等12种药物敏感;对新霉素、利福平、红霉素3种药物中度敏感;对头孢拉定、多黏菌素B和O/129等7种药物存在不同程度的耐药性。     

施秉县动物防疫体系现状调查

为适应农业产业结构调整的需要,完善基层动物防疫体系,笔者于2011年1—12月,通过问卷调查和实地走访等方式,对施秉县动物防疫体系建设情况、动物防疫人员的职责和任务、养殖户对动物疫情了解情况等进行调查,以期能全面了解和掌握施秉县基层动物防疫系统存在的问题并提出相应的解决办法。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒JL株 Nsp10基因生物信息学分析

本研究旨在对高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)贵州JL株Nsp10基因(GenBank登录号:EU886322)进行生物信息学分析,了解其生物学特征,为下一步Nsp10的表达和ELISA检测方法的建立奠定基础。应用BioEdit、DNAStar、PsortⅡ、SignalP、TMHMM、ProtFun、Clustal_1.81、Mega等软件对Nsp10蛋白的理化参数、信号肽、跨膜区域、亲水性、表面可及性、抗原性、二级结构、亚细胞定位及与其他PRRSV毒株相应片段同源性等进行分析和预测。该蛋白理论分子质量为26.38 ku,pI为8.93,为稳定蛋白,不含信号肽,无跨膜结构,具有良好的形成抗原表位的条件。亚细胞定位结果表明,该蛋白极有可能位于细胞质,其编码氨基酸序列与参考毒株同源性为97.4%~100%。该蛋白保守性较高,是可溶性蛋白,有良好的抗原性,具备作为靶蛋白建立免疫方法的条件。     

山羊皮肤霉菌病的诊断

皮肤霉菌病是一种人畜共患的皮肤传染病。在家畜中,以牛、马最易感,猪、绵羊次之;山羊罕见,且易误诊为疥螨病。现将我院实验牧场山羊群由毛癣菌属霉菌引起的皮肤霉菌病的诊断结果报告如下。一、发病经过与临床表现我院教学实验羊场饲有奶山苹与本地山羊共16只,该场曾于1989年4月从本省纳雍县维新区购进本地山羊多只,当时发现1只黑羊羔腹部皮肤有一小块秃斑,误认为羊疥     

山羊痘病毒反向末端重复序列的克隆与序列分析

应用PCR方法扩增山羊痘病毒QL、LD、Y、B-株反向末端重复序列片段,将其克隆至pMD18-T载体,构建了重组质粒pMD18-ITR,再将该重组质粒转化DH5α感受态细胞进行培养,对通过PCR、酶切鉴定为阳性的重组菌进行序列测定,并将所得序列与GenBank收录的2株山羊痘病毒、3株绵羊痘病毒全基因序列进行比较分析。结果:所测4个毒株序列与GenBank上收录的山羊痘病毒该片段核苷酸序列的同源性均为100%,与绵羊痘病毒该片段核苷酸序列的同源性均为98.3%。研究结果表明,山羊痘病毒反向末端重复序列与已收录的羊痘毒株之间该片段的同源性非常高,为今后兽医临床上应用PCR方法检测羊痘病毒提供了另一更为特异、保守的基因片段。