贵阳地区家畜口蹄疫免疫抗体监测结果分析

采用LB—ELISA方法对贵阳地区6个种畜场、8个规模养殖场、11户农村散养户和5个屠宰场迭检的826份血清样本进行口蹄疫免疫抗体检测，结果表明：贵阳市家畜口蹄疫免疫抗体的平均合格率为84．6％，达到农业部要求。其中种畜场口蹄疫免疫抗体的平均合格率为97．1％，规模养殖场为92．19，5，农村散养户为72．79，5，屠宰场为63．79，5，免疫抗体合格率的总体趋势为种畜场〉规模场〉散养户〉屠宰场。     

牛结核分枝杆菌PCR检测方法的建立

随着牛结核病疫情日趋严重,快速、高效的分子生物学检测方法建立显得十分必要.试验设计合成了牛结核分枝杆菌特异性引物,优化反应条件,建立了牛分枝杆菌PCR检测方法.结果显示,所建立的牛结核分枝杆菌PCR检测方法可有效检测牛结核分枝杆菌,在模板浓度、引物浓度和退火温度分别为1.32 μg/mL、0.5 μm/L、54℃时最佳;性能评估显示,该方法具有较好的特异性、敏感性和临床应用性,为我省牛结核病的综合防控提供关键技术.     

产气荚膜梭菌cpe~+菌株的筛选与鉴定

参考相关资料,针对产气荚膜梭菌肠毒素基因(cpe)设计合成1对特异性引物,对34株贵州分离株进行PCR扩增,并将扩增产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取质粒进行PCR和双酶切鉴定后测序和分析。结果在34株产气荚膜梭菌贵州分离株中有1株C型菌株扩增出与预期大小相一致的目的片段,经克隆测序后,该片段大小为233 bp,其与产气荚膜梭菌参考株肠毒素基因序列的核苷酸同源性为99.6%~100%,推导氨基酸同源性为98.7%~100%,表明所扩增产物为产气荚膜梭菌的肠毒素基因片段。本试验筛选鉴定出1株产气荚膜梭菌cpe+菌株,为今后进一步探讨产气荚膜梭菌性食物中毒机制奠定了基础。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒及混合感染的检测

自2009年7月以来,贵州省几个规模养殖场猪群出现疑似猪繁殖与呼吸综合征的症状,为查明致病原因,以便采取针对性的治疗及防控措施,采用病毒学和细菌学试验对送检病料进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒检测和细菌分离鉴定。结果猪繁殖与呼吸综合征病原基因检出率为100%,同时继发感染猪瘟病毒、葡萄球菌或链球菌的比例高达85.7%。     

猪群高热症的血清流行病学调查研究

采用血清学试验对贵阳市花溪区某种猪场的95份血清样本进行猪繁殖障碍性疫病血清学检测,以了解猪群免疫水平及疫病感染状况.结果显示,猪群O型口蹄疫（O-FMD）、猪瘟（HC）、猪繁殖与呼吸障碍综合征（PRRS）、猪伪狂犬病（PR）免疫合格率分别为100％ （33/33）、62.9％（39/62）、14.5％ （9/62）、61.3％ （38/62）,HC、PRRS和PR免疫合格率均未达到农业部要求;通过比较母猪免疫抗体与仔猪母源抗体水平相关性,发现HC与PR首免后抗体保护期维持较短,PRRS免疫不合格;猪群猪圆环病毒病（PC）、猪细小病毒病（PP）隐性感染抗体阳性率分别为70.5％ （67/95）、82.1％（78/95）,隐性感染情况严重.血清流行病学调查结果表明,该猪场应改进HC、PR免疫程序,立即对全群进行PRRS补免,并要高度重视PC和PP的防控。     

贵州省部分地市H5亚型禽流感免疫抗体监测结果分析

禽流行性感冒(AI)即禽流感,是由正粘病毒科A型流感病毒属的A型流感病毒(AIV)所引起的各种家禽及野生禽类感染的高度接触性传染病.     

基于N基因的小反刍兽疫病毒贵州流行株分子特征与分群研究

为探讨小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV)贵州流行株N基因分子特征和分群,试验设计了1对特异性引物,应用RT-PCR技术对小反刍兽疫(peste des petits ruminants,PPR)临床样本进行N基因扩增,克隆至pMD19-T载体,对阳性重组质粒进行测序,应用DANStar软件对测序序列和参考序列进行核苷酸同源性、氨基酸同源性、变异位点及系统进化树分析。结果显示:PPRV贵州流行株N基因扩增长度为1 578bp,其相互间核苷酸、氨基酸同源性分别为99.6%~100.0%及99.2%~100.0%,与国内参考株N基因的核苷酸序列(97.7%~99.9%)及氨基酸序列(98.3%~100.0%)同源性较国外参考株(88.5%~97.7%和92.2%~98.5%)高;PPRV贵州流行株N基因编码的氨基酸同疫苗株Nigeria 75-1相比存在26个位点突变,但没有氨基酸的缺失或增加;基于N基因系统进化分析显示,PPRV贵州流行株同国内参考株处于同一个进化分支,但与国外参考株处于不同进化分支;其属于病毒进化的Ⅳ基因群,与国内参考株处于同一系统分群,但与疫苗株Nigeria 75-1(Ⅰ基因群)处于不同基因群。     

贵阳市猪传染性胸膜肺炎的血清学调查

采用间接血凝试验对2007年和2008年贵阳市免疫与非免疫、不同饲养规模以及不同生产阶段的猪群进行猪传染性胸膜肺炎（PCP）血清抗体检测。结果：免疫猪群PCP血清抗体阳性率为63．6％和78．5％,非免疫猪群为50．3％和38．0％;在非免疫猪群中,规模养猪场的PCP阳性血清检出率,为60．2％和52．6％,农村散养户为25．0％和12．5％;在不同生产阶段非免疫猪群中,育肥猪群PCP血清抗体阳性率为62．2％和47．4％,断奶仔猪群,为30．3％和23．5％。调查结果表明,贵阳市不同猪群中已普遍存在猪传染性胸膜肺炎感染。     

PRRSV GZJL株GP5基因的克隆及原核表达

为成功表达PRRSV GZJL株GP5蛋白,本研究设计合成一对引物,并以PCR方法从阳性重组质粒pMD18-T-GP5中扩增得到PRRSV GZJL株GP5基因片段中的79～600 bp即dGP5.将dGP5基因连接至原核表达载体pET-32a(+),并转化入表达菌株BL21(DE3).经PCR、双酶切和测序鉴定,阳性...     

猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染的诊断

2009年3月贵州省某猪场送检病猪3例,为确诊病因,进行了流行病学调查,实验室剖检病变观察,细菌学、荧光抗体和RT-PCR检测。经流行病学调查和剖检病变观察,该病例为疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒感染所致;该病例细菌分离鉴定结果为阴性,猪瘟直接荧光抗体检测结果为阳性,猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪瘟病毒RT-PCR核酸检测为阳性。表明,该病例为猪瘟病毒和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染。