山羊痘病变的超微病理学研究

对发生在贵州省的山羊痘病变进行了透射电镜观察。在感染的皮肤和肺上皮细胞的胞浆内发现有大量不同成熟阶段的典型的山羊痘病毒颗粒。病毒颗粒也可见于巨噬细胞、成纤维细胞、血管内皮细胞的胞浆内，甚至少量在血管腔内。受感染的细胞除可见胞浆内散在的病毒颗粒或形成病毒包涵体外，通常可见细胞水肿，线粒体肿胀，内质网和高尔基复合体扩张。一个有趣但十分重要的发现是，有髓神经纤维也被病毒和被感染的巨噬细胞所波及，并可见节段性脱髓鞘以及轴索和雪旺氏细胞的变性。在山羊痘痘疹材料感染鸡胚绒毛尿囊膜痘斑的上皮细胞和成纤维细胞中也可见成熟和不成熟的病毒颗粒。     

贵州省高致病性猪繁殖与呼吸综合征血清流行病学特征分析

给全世界养猪业造成巨大经济损失的猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)所致.     

猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定

采用巧克力琼脂平板从贵州省某养猪场发病猪体分离到3株细菌,经培养特性观察、生化特征检查和血清型鉴定,确定3株分离菌均为猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型。经药敏试验显示,分离菌对氨苄西林、硫酸庆大霉素、丙氟哌酸、氟哌酸、头孢三嗪和四环素等药物高度敏感。     

DuCV和GPV与DEV三重PCR检测方法的建立及应用

根据GenBank中的序列,合成针对鸭圆环病毒(DuCV)REP基因、鹅细小病毒(GPV)NS1基因、鸭肠炎病毒(DEV)UL6基因的3对特异性引物,以病毒的克隆质粒作为模板,进行退火温度、引物终浓度的优化,建立一种能同时鉴别DuCV、GPV、DEV的三重PCR检测方法,并检验该方法的特异性、敏感性和重复性.结果显示:...     

贵州省鸡群中禽白血病病毒J亚群感染的调查

采用禽白血病J亚群抗体检测试剂盒对4个不同肉种鸡场的血清样本进行检测,发现ALV-J抗体阳性率平均达到16.52%(3.33%～0.0%).对出现肿瘤病变的显性型病鸡进行病理组织学检查,在肝、肾、脾组织中观察到大量增生的、含嗜酸性颗粒的髓细胞样瘤细胞.针对J亚群gp85基因部分序列进行PCK扩增,从ALV-J抗体阳性鸡的肝病料扩增出一条545bpDNA带,而ALV-j抗体阴性鸡的样本显现阴性反应.将扩增的gp85基因序列与国内外J亚群毒株相应序列进行比较,结果核苷酸序列的同源性分别达到94.8%～96.5%和95.50%～96.8%.综合血清学、病理组织学变化和病原分子生物学鉴定结果,证实贵州省肉种鸡群中存在ALV-J 亚群病毒感染.     

贵州省7个地区主要山羊流产疫病的流行病学调查

为了解2011—2012年间贵州省山羊5种流产疫病的流行情况,采用虎红平板凝集试验(RBPT)、间接血凝试验(IHA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)3种血清学方法对贵州省7个地(州、市)74个养殖场的514份山羊血清进行5种流产疫病抗体的血清学监测,并通过PCR方法对10个规模化养殖场流产死亡母羊子宫、胎儿、肺和肺门淋巴结组织进行羊流产亲衣原体病和山羊传染性胸膜炎的病原核酸进行检测。结果显示:布氏杆菌病、羊流产亲衣原体病、弓形虫病、蓝舌病、山羊传染性胸膜炎的丝状支原体山羊亚种和绵羊肺炎支原体血清抗体阳性率分别为0、1.26%、6.72%、26.95%、2.35%和6.79%;羊流产亲衣原体病、山羊传染性胸膜肺炎的丝状支原体山羊亚种和绵羊肺炎支原体病原核酸检测阳性率分别为0、0、10%。结果表明:目前除布氏杆菌病以外,其余4种山羊流产疫病均在贵州存在不同程度的流行。     

对贵州某养鸽户鸽新城疫的分子生物学诊断

鸽新城疫（Newcastle disease,ND）是由新城疫病毒（Newcastle diseasevirus,NDV）引起的鸽的一种高度接触性、急性败血性传染病。其起源于20世纪70年代末的中东,80年代在欧洲、非洲、北美等地流行。我国20世纪80年代初期出现鸽新城疫病,现已广泛流行于各省区,成为养鸽业的主要疫病之一。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒贵州流行株GP5基因的RLFP分析

为对贵州省某养猪场猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疑似病例进行确诊及分析其病原分子变异情况,采集该养猪场死亡猪病料样本进行猪繁殖与呼吸综合征病毒(PSSRV)的RT-PCR检测,并采用RLFP方法分析了现场流行毒株GP5基因的变异情况。结果表明,该猪场病猪样本中PRRSV的核酸检出率为100%,是由高致病性PRRSV变异毒株引起;RT-PCR扩增PRRSV贵州流行株GP5基因,经RLFP分析显示,流行株GP5基因呈1-3-3 PCR-RFLP模式;克隆测序后发现,贵州流行株GP5基因发生多个点突变,其中在第25、216、358、409和554位核苷酸的点突变,可导致一些酶切位点的丧失或显现。     

山羊痘病毒P32蛋白在毕赤酵母中的表达与鉴定

为了获得具有生物安全性高的体外表达蛋白,以含山羊痘病毒贵州LD株P32基因的质粒pMD18-T-P32/LD为模板,应用PCR方法扩增P32基因不同片段,将基因片段克隆至毕赤酵母菌表达载体pPICZαA中,构建了重组表达载体,转化感受态毕赤酵母菌X-33中并诱导表达。SDS-PAGE分析结果显示,有分子量约为64 ku的融合蛋白获得表达,与预期结果相符;Western-blot证实该表达蛋白具有免疫学活性。     

动物细胞培养生物反应器研究进展

文章结合动物细胞培养的基本特点,介绍了国内外动物细胞培养生物反应器的研究现状以及未来的技术发展方向。