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猪水肿病大肠杆菌分离、鉴定及药敏试验 总被引:6,自引:3,他引:3
本实验从疑似猪水肿病的病例分离到5株大肠杆菌,O抗原鉴定结果表明所有菌株均为O139血清型;应用F18ab菌毛单克隆抗体对这5株大肠杆菌能否表达F18ab菌毛进行了鉴定,结果表明其中2个菌株能表达F18ab菌毛;利用聚合酶链式反应(PCR)对志贺氏菌样毒素Ⅱ型变异体(SLT-Ⅱe)操纵子基因保守区进行了扩增,结果发现在能表达F18ab菌毛2个菌株中可扩增一段特异性序列。以上数据表明这2株大肠杆菌为致仔猪水肿病大肠杆菌。药敏试验表明这两株菌株均对氟哌酸、妥布霉素、庆大霉素、利福平等抗生素高度敏感。 相似文献
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杨树天牛的发生规律及防治技术初探 总被引:1,自引:0,他引:1
在杨树苗木地和新造杨树幼林中,分别选择标准地,观察杨树天牛在湖口县发生规律和危害情况,探索其预防和防治方法。 相似文献
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根据已经发表的F18ab菌毛F亚单位(FedF/ab)的基因(fedF/ab),设计一对引物,利用PCR技术从本实验室保存的10株大肠杆菌(F107/86、YCED1、YCED2、C、D、E、12F、2134P、8199、8813)中分别扩增到一段序列,并克隆至pGEM_T载体,获得重组质粒TF107F、TYCED1F、TYCED2F、TCF、TDF、TEF、T12FF、T8813F、T8199F、T2134PF。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明,该10个序列大小均为903bp。通过与已发表的fedF/ab进行比较,可将这10个菌株分为2个主要遗传分支;其中F107/86、YCED1、YCED2、C、D、12F与fedF/ab具有高度同源性,属于fedF/ab;另外E、8813、8199、2134P虽与fedF/ab具有99.4%的同源性,推导的氨基酸序列具有98.3%的同源性,但通过基因树分析证明其已成为一个单独的分支,属于fedF/ac。 相似文献
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以菌体表面表达猪水肿病毒素保护性抗原(SLT-ⅡeB)的重组大肠杆菌(PZBSPAX),对1日龄、15日龄仔猪口服免疫,用ELISA法对口服免疫后10 d、15 d、30 d仔猪肠黏液中特异性SIgA和血清中特异性IgA、IgG进行检测,结果显示口服免疫猪能产生较高水平的肠黏液特异性SIgA及血清特异性IgA和IgG,证明该重组菌能有效激发肠道黏膜免疫反应,同时也能激发全身性体液免疫反应. 相似文献
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类志贺氏菌毒素Ⅱ型变异体B亚单位基因的表达与鉴定 总被引:8,自引:0,他引:8
将由 P C R 扩增并克隆在p U C18 质粒载体中的sltⅡe B基因切出,并按预定的阅读框架插入表达性质粒载体 p G E X6p1 中的谷胱苷肽转移酶( G S T)基因的下游。重组质粒 pppsltⅡe B在大肠杆菌 B L21 中以融合蛋白的形式表达 S L TⅡe B蛋白(命名为 G S T S L TⅡe B),即 S L TⅡe B蛋白(7568k D)与谷胱苷肽转移酶(27335k D)相连组成分子量为 34885k D 的融合蛋白。通过对重组大肠杆菌 P P S L TⅡe B的菌体裂解物的 S D S P A G E 电泳分析,以及根据抗原抗体结合反应的免疫学特性,通过 Westernblot 鉴定,重组大肠杆菌 P P S L TⅡe B(含有重组质粒 ppsltⅡe B的大肠杆菌 B L21)可以大量表达融合蛋白形式的 S L TⅡe B。根据 G S T 可与其底物谷胱苷肽结合的特性,用谷胱苷肽结合的 Sepharose 4 B制备的亲和凝胶纯化表达产物,纯化的表达产物经 S D S P A G E,可以鉴定到分子量约为 35k D 的蛋白条带,这与融合蛋白形式的 S L TⅡe B分子量(34885k D)相当。 相似文献