酵母培养物饲喂妊娠后期与哺乳期母猪对断奶仔猪体重的影响

<正>母猪是猪场的根本。妊娠后期至断奶期的母猪更是重中之重,值得猪场认真对待。此时的母猪最容易出现的问题就是便秘、奶水不足、采食量下降。由此会引起仔猪窝重偏小、弱仔等情况。酵母培养物(商品名:母乐健)是浙江科峰生物技术有限公司专门推出的生物发     

海盐县百步镇2012年春茧张产超历史的主要措施

海盐县百步镇的春蚕生产在各级领导的重视和产区蚕农的努力下,农技推广部门积极开展技术指导,配合县政府开展农业“绿剑行动”,组织春蚕生产技术培训,优化桑园基础,推广先进适用技术,有效地提高了生产技术到位率,促进了全镇近年春茧张产的持续高产.     

大肠杆菌F18菌毛A亚单位基因的多样性分析

根据已经发表的大肠杆菌F18ab菌毛A亚单位(FedA／ab)的基因序列(fedA／ab)设计1对引物，利用PCR技术从本实验室保存的10株大肠杆菌(F107／86、YCED1、YCED2、C、D、E、12F、2134P、8199、8813)中分别扩增到一段序列．并克隆至pGEM-T载体，获得重组质粒TF107A、TYCED1A、TYCED2A、TCA、TDA、TEA、T12FA、T8813A、T8199A、T2134PA。通过序列测定，并与已发表的fedA／ab进行比较、基因树分析，可将这10个菌株分为2个基因群，其中F107／86、YCED1、YCED2、C、D、12F与fedA／ab具有高度同源性，属于fedA／ab．大小为513bp；E、8813、8199、2134P构成另一单独的分支，属于fedA／ac．大小为516bp。     

大肠杆菌F18菌毛FedE蛋白的表达与鉴定

根据已经发表的F18菌毛E亚单位的基因序列(fedE)设计1对引物,利用PCR技术从重组质粒TFl07E中扩增到一段序列,并按预定的阅读框架插入到表达性质粒载体pGEX-6p-1中的谷胱苷肽转移酶(GST)基因的下游,获得重组质粒pPFedE,并转化大肠杆菌BL21获得重组菌PPFedE。琼脂糖凝胶电泳、序列测定及分析表明：该序列大小为459bp,与GENEBANK中的FedE结构编码序列(Z26520)完全一致。通过对菌体裂解物的SDS—PAGE电泳分析以及Western blotting鉴定,证明重组大肠杆菌PPFedE的可以表达融合蛋白形式的FedE(命名为GST-FedE),即FedE蛋白(16．297ku)与谷胱苷肽转移酶(27．335ku)相连组成分子量为43．632ku的融合蛋白。     

细菌表面表达载体的构建与鉴定

用聚合酶链式反应(PCR)技术，从金黄色葡萄球菌中扩增出769bp的编码SPA细胞壁跨膜区的编码序列。将扩增的片断克隆进pEZZ-18载体BamHI和sall位点之间。重组质粒转化大肠杆菌HB101后，根据酶切分析筛选到含有目的基因的重组质粒pZSPAX。序列测定结果表明，该重组质粒中的插入序列与已发表的SPA-X是一致的。通过水肿病毒素B亚单位(SLT-IIeB)基因(slt-IIeB)证实质粒pZSPAX能作为在细菌表面表达目的基因的载体。     

鸡大肠杆菌1型菌毛单克隆抗体的研制

将菌毛化的大肠杆菌C600（fim^ ）经0.3%甲醛灭活后作为免疫原，经淋巴细胞杂交瘤技术，用间接酶联免疫吸附试验（ELISA）筛选获得1F4－1和2C32株抗F1菌毛a或b因子抗原单抗和1株抗F1c因子抗原单抗，它们均为IgG1。免疫印迹试验结果表明：3株单抗均能同禽大肠杆菌1型菌毛反应，识别分子质量为17ku左右的菌毛蛋白。同时对沙门氏菌及猪源大肠杆菌进行检测，结果均无交叉反应性，说明禽病原性大肠杆菌F1菌毛与沙门氏菌1型菌毛及猪大肠杆菌粘附素之间存在很大差异。     

海盐县茧丝绸体制改革的现状

海盐县是浙江省位居第六的蚕茧生产县,为促进蚕茧生产持续稳定发展,根据浙政(1996)9号文件精神,从1997年进行了茧丝绸体制改革,实行了贸工农一体化的经营管理方式.将蚕种场、县蚕业指导站及供销系统的茧站全部划入了海盐丝绸总公司管辖,实行茧丝绸、贸工农一体化的管理格局.     

鸡抗大肠杆菌血清抗体和卵黄抗体变化规律研究

用猪源大肠杆菌四价(K88、K99、987P、F41)灭活疫苗免疫蛋鸡,微量凝集法定期检测蛋鸡血清抗体和卵黄抗体的效价。结果表明,血清抗体比卵黄抗体出现早,免疫蛋鸡血清中和卵黄中4种抗体的消长规律基本相似,但不同抗体水平之间存在明显的差异,整个试验期间血清抗体水平均比卵黄抗体水平高。     

禽脑脊髓炎病毒结构蛋白VP3基因真核表达载体的构建及其免疫

根据已发表的禽脑脊髓炎病毒（AEV）1143株结构蛋白VP3基因的序列，设计1对特异性引物，经PCR从原核表达载体pET—VP3中扩增出VP3基因片段，克隆入T载体经测序证明所扩增的序列正确。从T载体切下目的片段。定向克隆入pcDNA3．1（＋）载体，转化大肠杆菌DH5u，鉴定后大量提取质粒。转染COS-1细胞，用间接免疫荧光检测到目的基因的表达。将重组载体对BALB／c小鼠进行免疫。结果2次免疫后就检测到特异性抗体，表明该载体在动物体内有较高的表达水平，可用于动物体内免疫，为进一步研究AEV的核酸疫苗打下了基础。     

选择优良菌株用于仔猪水肿病疫苗的改进

传统的仔猪水肿病疫苗（目前市场上广泛使用），只是以致水肿病大肠杆菌菌株的O抗原为基础，而没有考虑水肿毒素SLT－lle抗原和菌毛F18抗原，其免疫效果鸡以提高，在仔猪水肿病疫苗的改进中，我们除了考虑O139、O18、O141菌体抗原之外，还利用PCR技术、单克隆抗体技术、电镜技术筛选了含有水肿毒素SLT－lle抗原和菌毛F18抗原的菌株。本研究中获得用于新一代仔猪水肿病疫苗的三型大肠杆菌菌株；O139：SLT－lle^ ：F18ab^ 、O138：STL－lle^ ：F18ab^ 以及O141：SLT－lle^ :F18ac^ 。