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F107(F18ab)菌毛单抗的制备、鉴定与初步应用 总被引:9,自引:2,他引:7
将大肠杆菌107/86和水肿病菌株在TSB中培养,鉴定其表达F107菌毛,前者作为免疫原免疫BABL/C小鼠,后者作为检测抗原包装酶标板。细胞融合后经ELISA和玻板凝集检测,得到一株阳性杂交瘤细胞株,命名为F7-1。该细胞株制备的腹水ELISA效价为:2^16,试管凝集价为:1:5120,在免疫印迹中可与提取的F107菌毛特异性条带发生反应。利用此单抗检测表明,91%的水肿病菌株表达F107菌毛。 相似文献
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大肠杆菌F18菌毛A亚单位基因(fedA)的克隆与序列测定 总被引:6,自引:0,他引:6
利用PCR技术,分别从产F18ab菌毛的猪水肿病大肠杆菌分离株G及产F18ac菌毛的大肠杆菌8813株中扩增出510bp左右的F18菌毛A亚单位基因(fedA)。将这2个PCR扩增产物按预测阅读框架克隆入pGEX-6p-1载体的谷胱甘肽S-转移酶(GST)基因的下游,筛选获得阳性重组质粒,并对质粒中的插入序列进行测定。序列分析表明:F18ab与F18ac的fedA基因的核苷酸序列同源性为97.6%,的氨基酸序列同源性为94.7%,两者的主要区别在于F18ac fedA基因的第363bp处比F18ab多3个核苷酸,并出现一个新的酶切位点(NgoMI)。 相似文献
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根据文献合成了一对引物,利用PCR方法检测了84株来自断奶仔猪水肿病例的产Vero细胞毒素大肠杆菌(VerotoxigenicEscherichiacoli,VTEC)的LEE(locusofenterocyteeffacement)毒力岛的eaeA基因,以了解携带LEE毒力岛的大肠埃希菌在江苏省断奶仔猪群VTEC中的流行状况。结果发现:从其中17株中可扩增到预期的DNA片断,证实它们携带LEE毒力岛,携带率为20.24%。数据分析提示:LEE毒力岛的分布不仅限于EPEC和EHEC,在断奶仔猪源VTEC中也有一定的分布,并可能成为重要的毒力因子。 相似文献
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