稳定pH值对猪精液液态保存效果的影响

为了研究pH值变化对猪精液液态保存效果的影响,找到适合猪精液液态保存pH值,从而改进液态保存液的配方,提高人工授精效率,试验比较了不同pH值条件下猪精液液态保存效果,通过检测精子活力、存活时间、顶体完整性和质膜完整性等参数,研究pH值变化对猪精液液态保存效果的影响,并尝试改进保存缓冲液。结果表明:采用Androhep保存时,最佳初始保存pH值为6.40。在保存的第3天稳定pH值组能够显著提高精子活力(P0.05),用2-吗啉乙磺酸(MES)代替Androhep保存液中的4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES),在保存的第3天能显著提高精子活力、存活时间(P0.05),同时维持更高的质膜完整性,但是顶体完整性差异不显著(P0.05)。说明采用能够稳定pH值的保存液更有利于精液常温保存。     

Percoll法分离小鼠卵母细胞

在卵母细胞分子水平的研究和建立卵母细胞库时,常要求不能混有其他细胞,在试验中也要大量使用M Ⅱ期卵母细胞,但是收集卵母细胞时常常混有卵丘细胞和空透明带等杂质.     

猪的人工授精技术进展

本文概述了猪的人工授精中输精方式方面的研究进展,包括子宫体输精、子宫角深部输精等低剂量输精技术,以及性别鉴定精液在猪的人工输精中的使用和研究现状.     

猪Krox20基因组织表达规律及其在脂肪细胞中表达规律的研究

采用半定量RT—PCR方法对1月龄和6月龄大白猪，1月龄野猪Krox20基因的表达规律进行研究，并且还检测猪脂肪细胞和不同月龄大白猪脂肪组织Krox20基因的表达情况。结果表明Krox20基因在大白猪和野猪的心、肝、脾、肺、肾、胃等12个组织中均有表达；各组织间表达存在差异，在心、肝、脂肪组织中高表达；1月龄大白和1月龄野猪Krox20的表达模式基本相同，不存在种属特异性；Krox20基因在不同时期的脂肪组织的表达随日龄的增加而降低，9月龄表达量最低；脂肪细胞水平的研究中，在前脂肪细胞中未检测到Krox20的表达，只有在诱导之后的5h内，检测到Krox20的瞬时表达。     

不同浓度二甲双胍对猪精液液态保存效果的影响

[目的]研究不同浓度二甲双胍对猪精液液态保存效果的影响。[方法]在猪精液液态保存液中分别添加不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0 mmol/L)的二甲双胍,测定不同保存时间精子的活力、活率、质膜完整率、顶体完整率等指标。[结果]猪精液液态保存第3天,在不同浓度二甲双胍作用下各组间精子活力出现差异。第5天,添加1.0 mmol/L二甲双胍的保存液保存的精子活力达到38.03%,精子活率为49.03%,质膜完整率为43.91%,顶体完整率为50.88%,均高于对照组。[结论]添加二甲双胍有助于提高液态保存猪精液的质量,延长保存时间。     

猪成纤维细胞冻存方法的研究

试验以猪的成纤维细胞为研究对象，认为在-70℃情况下冻存至少7d不会影响其存活率(可达80％以上)，且生长形态正常。同时利用血清饥饿法使成纤维细胞周期同步化，在-70℃冻存2d、4d和7d，细胞存涪率可达92．3％、87．2％和83．6％，甚至在该务件下冻存15d，细胞也能恢复正常的生长。     

山羊辅助生殖技术

辅助生殖技术(ART)在山羊的繁育中具有重要作用.因为操作简单和成本低,同期发情和人工输精是使用最广泛的辅助生殖技术.由于结果具有不可预见性,超数排卵和胚胎移植(MOET)使用的并不十分广泛.使用经内窥镜从有价值的母畜采集的卵母细胞有助于提高MOET的结果并扩大其应用范围.胞质内精子注射(ICSI)技术能够利用精子作为载体生产转基因动物,以及使用无运动能力的冻干精子.转基因和克隆技术可以显著影响今后的山羊繁育,但是需要提高技术的效率.     

猪植入前胚胎体外培养条件的优化

探讨了更换胚胎培养液及添加FBS、高渗透压和不同浓度VE对猪卵母细胞体外受精(IVF)和孤雌激活(PA)胚胎体外发育的影响,进一步优化了猪植入前胚胎体外培养体系。试验一：在第2天、第4天更换新的培养液(换液组),在换液基础上第4天更换为添加10%FBS的培养液(FBS组)。试验二：胚胎分别在0.05 mol/L蔗糖(蔗糖组)和138 mmol/L氯化钠(氯化钠组)的PZM-3(300～320 mOsmol)中培养2 d后移至PZM-3(288 mOsmol)中培养5 d。试验三：在培养液中分别添加50、100和200 μmol/L VE。对照组均在PZM-3(288 mOsmol)中培养7 d。结果表明：试验一,IVF和PA胚胎FBS组囊胚率显著高于对照组和换液组(P<0.05);试验二,IVF胚胎氯化钠组卵裂率、囊胚率均显著高于对照组与蔗糖组(P<0.05);试验三,IVF胚胎添加100 μmol/L VE组囊胚率显著高于对照组(P<0.05)。结果提示,在换液的基础上添加FBS有利于猪IVF和PA胚胎的体外发育;氯化钠调节的高渗透压可以促进猪IVF胚胎的早期发育;添加100 μmol/L VE可以改善猪IVF胚胎的体外发育体系。     

谷胱甘肽对哺乳动物卵母细胞的影响

谷胱甘肽与哺乳动物卵母细胞之间关系密切,谷胱甘肽具有一种还原能力。谷胱甘肽参与保护雌性配子细胞免受氧化物的伤害,还参与维持卵母细胞减数分裂纺锤体形态。卵母细胞中谷胱甘肽浓度可以作为衡量哺乳动物卵母细胞质和核成熟程度的标志。它对于受精后雄原核形成起了积极的作用,并且还有助于早期胚胎发育。卵丘细胞对卵母细胞内的谷胱甘肽合成起重要作用。不同种类的低分子量硫醇复合物可以诱导卵母细胞中谷胱甘肽的合成。     

和厚朴酚对猪热应激卵母细胞体外成熟的影响

在成熟液中添加10μmol/L和厚朴酚,44 h后,检测卵母细胞中Sirt3蛋白表达、SOD2的乙酰化水平、活性氧水平、线粒体膜电位及孤雌激活胚胎的发育能力.结果 显示,在成熟液中加入和厚朴酚后,可显著提高热应激卵母细胞体外成熟率及其后续胚胎体外发育能力(P＜0.05).此外,在和厚朴酚作用下,卵母细胞中Sirt3蛋白...