椰子ISSR遗传多样性分析

应用ISSR技术分析了来自多个国家的30份椰子品种或类型的遗传多样性。用29条多态性较好的引物共扩增出了157条条带,其中多态性条带110条,多态性比率70%;用NTSYS软件计算出这30份材料的DICE相似系数在0.548～0.962,平均值为0.788。其中相似系数最高的是红矮(14号)和杂交种(16号)为0.962,最低的是海南高种(29号)和斐济高种(5号)仅0.548。用UPGMA方法构建聚类树,所有材料在相似系数0.79处被划分为三大类(类群A,B,C)。A类群包括所有引进的高种、矮种和杂交种,B类群包含了除雄树以外的所有特殊变异类型椰子,而来自海南的所有高种单独聚为C类。综合研究结果表明我国海南的椰子种质资源多样性水平不高,需要进一步引进国外优良种质。     

椰子成熟胚离体培养活性炭浓度效应研究

通过探讨活性炭在椰子胚培养过程中对椰子胚褐变以及生长发育的影响,结果表明活性炭有明显抑制褐化的作用,活性炭浓度过高或过低均不利于椰子成熟胚的萌发和生长,最适合诱导椰子胚的最佳活性炭浓度应该为2~3 g/L。     

生物物种资源监测原则与指标及抽样设计方法

生物物种资源监测是了解生物物种资源现状、开展生物物种资源保护与管理的基础工作和重要手段.阐述了生物物种资源监测的科学性原则、可操作性原则和持续性原则.提出了监测计划的制定程序;监测计划应充分考虑所具有的人力、资金和后勤保障等条件,并进行定期评估.分析了指示物种在物种资源监测中的作用与不足;认为应选择具有不同生态需求和生活史的生物类群作为监测对象.讨论了监测指标的选取方法;监测指标应可测量、有科学基础、易被公众接受、低成本和高效益;监测方法应具有科学性,能检测到相应的变化,应采用高效率、低成本的标准化监测方法.分析了现有监测计划在抽样设计方面存在的问题,探讨了空间变异性和可检测率对监测数据误差的影响及其处理方式,讨论了样本量确定和监测样地的大小、形状及位置设计.监测样地要有较好的代表性,能在有限的监测面积中较好地反映监测区域内群落种类组成与数量特征.最后,讨论了生物物种资源监测的尺度和标准化问题.     

椰子CnRADIALIS-like转录因子的克隆与表达分析

本研究依据前期已经完成的4个品种椰子外果皮转录组测序数据结果,筛选获得在4个品种椰子外果皮中表达水平显著差异的MYB类基因CnRADIALIS-like。从椰子（Cocos nucifera L.）外果皮中克隆获得CnRADIALIS-like,序列分析显示,CnRADIALIS-like基因的开放阅读框（ORF）长288 bp,编码95个氨基酸。结构域分析显示,CnRADIALIS-like含有1个典型的SANT/MYB结构域,属于MYB转录因子家族中的I-box-binding-MYB型。多序列比对发现,CnRADIALIS-like氨基酸序列与油棕MYB-RADIALIS（RAD）氨基酸序列相似度最高。理化性质、亲/疏水性和无序化分析显示,CnRADIALIS-like转录因子是亲水性蛋白且偏碱性,存在无序化区域。信号肽和跨膜结构域分析表明,其不存在信号肽和跨膜结构域。空间结构分析显示,CnRADIALIS-like有典型的α-螺旋结构。实时荧光定量PCR（qRT-PCR）显示,CnRADIALIS-like基因在4个品种椰子外果皮中的表达量存在显著差异,在红矮椰子中表达量最高,红矮椰子不同组织中在外果皮表达量最高。该基因的表达在红矮椰果从幼果至成熟果的3个发育阶段依次降低,套袋条件下表达量低于正常光照条件下,表明该基因可能与光形态下细胞发育及代谢产物合成存在相关作用。通过对该基因的生物信息功能进行分析,为深入研究其功能及作用机制提供参考,同时以期为深入剖析椰子的外果皮颜色形成机制提供重要的理论依据。     

酶法制备鲢蛋白

对比研究几种蛋白酶水解微波解冻后鲢肌肉的效果,单酶水解选择中性蛋白酶为水解鲢肌肉的最适酶种,采用正交实验确定其最佳的水解条件为温度50℃、酶用量0.5％、pH 7.0、水解3h、料比1:2,蛋白质回收率可达到90.60％;双酶水解采用中性蛋白酶和风味蛋白酶,正交实验确定最佳水解条件:中性蛋白酶作用1h后,添加0.4％的复合风味蛋白酶,在50％、pH为7.0下水解4h,蛋白质回收率可达到94.50％,水解液采用活性炭脱腥后基本无腥苦味,经真空冷冻干燥可制得纯度91.0％的蛋白粉。     

酶法制备鲢蛋白

对比研究几种蛋白酶水解微波解冻后鲢肌肉的效果,单酶水解选择中性蛋白酶为水解鲢肌肉的最适酶种,采用正交实验确定其最佳的水解条件为温度50℃、酶用量0.5％、pH 7.0、水解3h、料比1:2,蛋白质回收率可达到90.60％;双酶水解采用中性蛋白酶和风味蛋白酶,正交实验确定最佳水解条件:中性蛋白酶作用1h后,添加0.4％的复合风味蛋白酶,在50％、pH为7.0下水解4h,蛋白质回收率可达到94.50％,水解液采用活性炭脱腥后基本无腥苦味,经真空冷冻干燥可制得纯度91.0％的蛋白粉。     

利用SSR分子标记快速鉴定香水椰子种苗纯度

香水椰子因其具有独特的糯米香味备受消费者喜爱,香水椰子特别是在苗期和其他绿矮椰子极为相似,市场上因“假苗”造成损失的现象层出不穷,因此鉴定香水椰子纯度显得尤为重要。本研究利用SSR分子标记技术对具有香味和不具有香味的椰子之间的多态性进行了引物筛选和纯度鉴定研究。结果表明,在供选的131对SSR核心引物中,仅有1对引物具有多态性。利用这对引物对100株椰子进行纯度鉴定,并与田间单株的嗅觉鉴定结果和2AP含量检测结果一一比对,吻合率达100%,说明该SSR分子标记对香水椰子的纯度鉴定结果是可靠的,可用于生产实践中香水椰子种苗的纯度鉴定。     

槟榔新品种‘热研1号’

 ‘热研1号’槟榔是从海南地方农家品种中选育出的新品种,高产,稳产,口感好,适宜鲜食或加工。种植后4 ~ 5年开花结果,年平均单株产果16 kg,最高可达30 kg以上,10年树龄植株产量比同树龄的海南地方农家品种提高约12%。     

椰子ISSR体系优化

该实验旨在获得最佳的椰子ISSR-PCR反应体系,以海南本地高种和马来亚高种为实验材料,采用单因素实验法将反应体系的5个主要因素设定5个梯度,根据每个因素量的变化对扩增结果产生的影响进行了研究;并利用梯度PCR仪得出引物807的最适退火温度为56.0 oC;最后确定最佳反应体系为:总体积20 pl,Taq聚合酶1.0 U、Mg2+浓度即10xTaq Buffer用量2.5 mmol/L、模板DNA用量50 ng、dNTPs 浓度0.2 mmol/L、引物浓度0.8 tanol/L.