寄生虫分子疫苗

随着寄生虫耐药虫株的出现及消费者对畜禽产品药物残留问题的担忧和环境保护意识的增强,研制疫苗防治寄生虫病已成为大势所趋。目前上市的寄生虫疫苗还很少,且多为活苗或致弱苗,属劳动密集型产品,价格较高,而且还有人工发病的潜在危险。分子疫苗的研究是随着遗传学、蛋白质化学及免疫学理论和方法的发展而发展起来的,在人的乙型肝炎等疾病的控制上已起到了很大的作用。在寄生     

L—山梨糖引起犬红细胞溶血的机制

Ｌ—山梨糖引起犬红细胞溶血的机制吴绍强摘译王建元校１引言还原成２－已酮糖的Ｌ－山梨糖是一种好的蔗糖替代物，因为它不会引起龋齿且能量较低，然而，给犬口服Ｌ－山梨糖后，却会引起严重的溶血。同小鼠、大鼠及猫相比，犬的红细胞对溶血很敏感，况且，Ｌ－山梨糖对兔...     

贝类马尔太虫病研究进展

马尔太虫病是严重危害世界贝类养殖业的主要疾病,为OIE规定的必报贝类寄生虫病之一。我国贝类养殖及出口数量世界第一,相关流行病学及调查研究却很少。本文从病原分类学、形态学、流行病学、病理学、检测方法等方面,系统地阐述了贝类马尔太虫病的研究进展,以为本病研究及防控所借鉴。     

一种提取鸡血浆IgG的简易方法

许多免疫学试验(如ELISA、荧光抗体技术)都要应用提纯的IgG。传统的提取IgG的方法是用Na_2SO_4沉淀血清,然后再进行离子交换层析或凝胶电泳。以下方法具有简单易行、费用低,可同时测定多个样品等优点,且提取的IgG纯度不比市售的IgG低。现介绍如下: 采取鸡的血液,凝血析出血清。取此血清10ml,加入4倍量的醋酸盐缓冲液(60mM、pH4.0),用1N NaOH调整pH值为4.5。然后边搅拌边加入辛酸,至血清稀释液中辛酸的含量达25μl/ml为止。将此溶液继续搅拌30分钟(以上操作均在室温时进行,以下操作须     

传染性造血器官坏死病进境风险分析

为评估传染性造血器官坏死病病毒（infectious haematopoietic necrosis virus,IHNV）随国际贸易传入我国的风险,按照世界动物卫生组织（WOAH）动物卫生风险评估框架,从危害识别、风险评估及风险管理3个方面开展风险分析。结果显示：IHNV随活易感鱼类（包括亲鱼、鱼卵和鱼苗）和鲜活饵料鱼类（野杂鱼）传入的风险为“高”;随非易感鱼类及运输活鱼的水、包装、运输工具和用具等传入的风险为“很低”;随食用易感鱼类（包括活的、冷冻的、冰鲜的以及鱼肉）和易感鱼加工产品传入的风险为“可忽略”。根据以上风险评估结果提出相应风险管理措施：不从疫区进口高风险产品,低风险产品可以自由贸易,对来自疫区的非易感鱼类和运输活鱼的水、包装、运输工具和用具实施消毒。     

贝类派琴虫实时荧光定量PCR检测方法的建立和应用

选择派琴虫保守的核糖体DNAITS-2区域设计引物和TaqMan探针,通过对反应体系和反应条件进行优化,建立了实时荧光定量PCR检测派琴虫的方法。所构建方法检测质粒模板DNA的动态范围为2.6×10^1～2.6×10^7拷贝,敏感度可检测到26拷贝质粒DNA,而且与包拉米原虫、隐孢子虫等其他寄生性原虫无交叉反应,也不受贝类组织DNA的干扰。利用本研究所建立的方法对来自我国山东、福建等不同沿海海域的30份贝类样品进行检测,检出阳性样品3份。研究表明,本研究所构建的派琴虫实时荧光定量PCR检测方法具有快速、灵敏和特异等优点,可满足国内养殖场及进出口水生动物携带派琴虫的检测需要。     

柔嫩艾美耳球虫BJ株核酸疫苗的构建及其免疫保护效果研究

将 E.tenella BJ株的保护性抗原基因 TA4插入真核表达载体中 ,然后在其上游融合方式插入 Et1A基因 ,构建成核酸疫苗并进行体外表达。IFAT检测表明 ,p CT转染细胞的荧光亮度高 ,p CTE载体大 ,转染效率低 ,荧光较弱。动物保护性试验中 ,间隔一周两次免疫鸡后攻虫发现 ,核酸疫苗对球虫感染具有明显的保护作用 ,可显著减轻球虫感染引起的机体增重下降 ,其中 ,重组干扰素联合 p CT中剂量 (5 0 μg)免疫时 ,鸡的增重效果最为明显 ,盲肠病变值也最小 ,ACI可达 16 7.2。试验还发现 ,5 0 μgp CTE可达到 10 0 μg p CT的抗球虫效果 ,ACI在 16 0以上 ,说明融合插入两种基因构建的核酸疫苗对球虫感染的保护效果更佳     

南非蜱虫套式PCR鉴定方法的建立

为探讨来自南非不同蜱种的系统进化关系,建立南非截获蜱虫的套式PCR鉴定方法。根据GenBank中蜱虫的18SrRNA基因序列,设计2对特异性引物,通过优化条件建立蜱虫套式PCR鉴定方法。从南非进口生牛皮上截获寄生蜱,经过形态学初步鉴定后,应用所建立的套式PCR扩增获得10种南非蜱虫(T1-T10)的18S rRNA基因序列,测序后与NCBI中已公布的蜱虫18S rRNA基因序列进行同源性分析。应用MEGA5.0软件进行系统进化分析发现,T1、T2、T3、T4、T7、T8是花蜱属的亚种,T5和T6分别是牛蜱属的不同种或亚种;T9和T10是扇头蜱属的不同种或亚种。说明建立的套式PCR检测方法能够在传统形态学分类的基础上,准确鉴定不同形态的蜱种。