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[目的]用大肠杆菌表达出CIAV的衣壳蛋白(VP1)作为免疫抗原,以建立鸡传染性贫血病毒(CIAV)的血清学诊断方法.[方法]根据已发表的CIAV的衣壳蛋白(VP1)序列,结合Protean软件预测出抗原富集区域,设计并合成1对引物,利用PCR扩增该区域基因,将扩增成功的VP1基因片段经T4连接酶连接至PGEX-6P-1表达载体.连接成功的重组质粒转化不同的大肠杆菌表达菌株,通过IPTG诱导进行原核表达,筛选出表达量最高的菌株及最佳诱导时间和1PTG诱导浓度.以感染CIAV的鸡阳性血清为一抗,对重组蛋白GST-VP1进行Western-blot分析.[结果]成功获得了重组质粒PGEX-VP1,诱导表达后经SDS-PAGE和Western-blot分析,分子量约71kD的融合蛋白GST-VP1在大肠杆菌Rosseta中以包涵体形式大量表达,并能与鸡传染性贫血病毒阳性血清发生反应.[结论]该研究可为抗CIAV单克隆抗体的制备及血清学诊断方法的建立等研究奠定基础. 相似文献
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正俗话说"打虎亲兄弟,上阵父子兵"。在江苏省盐城市亭湖区黄尖镇,有这样一对父子,"你登场来我唱戏",携手双双齐上阵,共同经营着一家农机修配中心,他们就是黄尖镇赫赫有名的"农机医生"蔡永生和蔡中云父子俩。2017年年底,蔡永生还代表盐城市农机维修行业参加了在句容市举办的全省农机维修工作研讨会,就开展农机维修服务作了典型发言。一时间,蔡家父子和他们的修配中心成为了当地老百姓热议的话题。 相似文献