NO在生物医学中的研究进展

一氧化氮 ( nitric oxide,NO)一直被认为是对生物有毒的简单无机分子。 1 977年人们在研究硝酸甘油和相关的舒血管复合物的作用机理时 ,发现它们都释放 NO;1 980年有人提出血管舒张是由于内皮细胞释放一种舒血管因子 ( EDRF)所致 ;1 986年研究者在探索 EDRF化学本质时发现 ,EDRF就是 NO。这一发现开辟了 NO研究的全新领域 ,有关 NO的文章像雪片一样在世界各有名杂志上争相发表。为此 ,美国《Science》杂志将 NO选为1 992年的明星分子 ,而发现 NO在心血管系统中重要作用的 3位美国药理学家获得了 1 998年度诺贝尔医学奖。NO作为…     

桔皮素乙酰酯对动物螨病的治疗及安全性试验

将桔皮素乙酰酯制成1%，2%的擦剂和0.1%的乳剂，间隔1周2次用药，进行了鼠，犬，兔，鹿螨病的治疗试验。结果发现；患病动物痒感减轻，消失，患部皮肤变软，增重迅速，镜检未见活螨，用5%的桔皮素乙酰酯浇泼剂，间隔1周3次用药治疗梅花鹿掉毛病。结果3-4d后皮肤开始变软，2周后长出新毛，2个月后无1头鹿再发病，用不同浓度的桔皮素乙酰酯浸泡小鼠1min，进行安全性试验，体积分数为0.1%时无任何异常反应；体积分数为1%时对眼睛有轻度刺激作用，个别小鼠出现轻度中毒症状；体积分数为4%时，小鼠出现中毒症状，5h后死亡1只，存活小鼠24h后恢复正常。试验证明；桔皮素乙酰酯对动物螨病具有良好的治疗作用。在治疗剂量范围内用药是安全可靠的。     

新鱼腥草素钠对脾细胞增殖及对其产生IL-2水平的影响

MTT法检测新鱼腥草素钠对脾细胞的增殖反应,胸腺细胞增殖法检测新鱼腥草素钠对脾细胞分泌IL-2的影响.在脾细胞培养液含有2.5 mg/L ConA的条件下,128及256 mg/L新鱼腥草素钠能够促进脾细胞增殖,与2.5 mg/L ConA组对照,经统计学检验,差异有显著性(P＜0.01).64、128及256 mg/L新鱼腥草素钠表现出提高脾细胞培养透析液中的IL-2水平的作用,与2.5 mg/L ConA组比较,经统计学检验,差异有显著性(P＜0.05或P＜0.01).     

康氏木霉诱变株(NN—15B_7)酶粉的致突变性研究

给小鼠一次口服康氏木霉诱变株(NN—15B_7)粗酶粉,结果LD_(50)>15g/kg体重,属无毒物.Ames试验,康氏木霉纯酶粉3.83～5000μg/皿的5个试验组,对组胺酸缺陷型鼠伤寒沙门氏菌TA_(97) 、TA_(98)、TA_(100)三株菌在加与不加S_9活化系统中,回变菌落数与自发回变菌落数相近,无剂量效应关系.微核试验,用康氏木霉粗酶粉1.25、2.5和5g/kg体重连续2d给小鼠口服,结果各试验组微核率(1.6‰～1.8‰)均在正常范围内,PCE/RBC比值也与阴性对照组无显著差异.精子畸形试验,精子畸形率(1.88%～1.96%)与阴性对照组(1.78%)比较无显著差异,与阳性对照组(8.35%)比较差异非常显著(P<0.01).因此认为,康氏木霉诱变株(NN—15B_7)酶粉无毒性,无致突变性.     

橘皮麦衍生物对离体痒螨及临床药效观察

通过磺酸化、卤代、酯化、乙酰化等途径对橘皮素进行结构改造后得到8种衍生物,并对这8种衍生物进行了离体兔耳痒螨药效试验。结果除磺酸取代物－2无杀螨作用外,其余7种均具有较强的杀螨作用,橘皮素磺酸取代物－1,在0．2％时40min内将被试螨虫全部杀死;在0．05％时橘皮素溴取代物－1和橘皮素溴取代物－2分别在35min和30min内、橘皮素碳酸酯在20min内、橘皮素甲基酮－1和橘皮素甲基酮－2分别在16min和43min内将被试螨虫全中杀死;橘皮素乙酰酯杀螨效力最强,在0．05％浓度时5min内、0．02％浓度时10min内将被试螨虫全部杀死。将橘皮素乙酰酯制成1％的擦剂,两次滴耳、涂擦治疗25只耳痒螨感染病兔和475只耳痒螨感染病狐,两周后治愈率达96．5％;将其制成50％的乳油,再稀释至0．05％和0．025％,间隔1周,药浴两次,共治疗172只和132只两群螨虫感染病羊,两周后,治愈率分别达到99％和98％,优于周期药浴的辛硫磷对照组,且无任何毒副作用发生。     

mRNA差异显示法筛选环磷酰胺致突变相关基因的初步研究

为建立在药物致突变研究中应用银染mRNA差异显示的方法,试验提取未经过和经过环磷酰胺处理的BALB／e小鼠脾组织的总RNA,并以此为模板,采用dT12CG、dT22AG、dT12GG为锚定引物,通过反转录、差异显示PCR反应,6％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离差异条带,回收后将其再扩增。对扩增条带进行克隆、测序。经Blast搜索,发现2条新的基因片段,为进一步研究致突变效应奠定了基础。     

"军牧1号"断乳仔猪血液生理生化指标正常参考值

选用55日龄“军牧1号”断乳仔猪30头,测定了18项血液生理指标和10项血液生化指标。结果,“军牧1号”断乳仔猪与后备猪比较,有多项血液生理生化指标差异显著(<0.01),与其他同龄杂交品种猪比较,绝大多数指标基本一致。这些指标不仅能反映断乳仔猪的健康状况和生长发育规律,而且也是兽医临床诊断和防治的重要依据。     

利什曼原虫实时荧光定量PCR方法的建立

以利什曼原虫的小环状动基体DNA(Leishmaniak DNA)为靶基因,建立实时荧光定量PCR检测利什曼原虫的方法。根据GenBank报道的利什曼原虫小环状动基体DNA保守序列设计合成特异性引物,经PCR扩增后与pMD18-T载体连接,转化入大肠杆菌DH5α感受态细胞。挑选阳性克隆重组质粒经鉴定正确后,作为模板建立SYBR-GreenⅠ荧光定量PCR标准曲线和熔解曲线。结果构建的标准曲线线性关系良好,相关系数为0.996,而且特异性强,重复性好。本研究成功建立了实时荧光定量PCR检测利什曼原虫的方法,该方法可用于利氏曼原虫病的诊断、流行病学监测和科学研究。     

冷应激对猪脂肪、肝脏、心脏与肾脏组织中PPARγ2 mRNA及蛋白表达的影响

为了研究冷应激对机体的影响及过氧化物酶体增殖物激活受体γ2（PPARγ2）在冷应激中的作用,本试验选用30头军牧一号猪,并随机分成5组,包括常温对照组和4个冷应激组。常温组在（21±2）℃饲养,冷应激组的温度设置分别为：（-10±2）、（-5±2）、（0±2）、（5±2）℃。冷应激2h屠宰后分别采集猪腹腔脂肪、颈部皮下脂肪、胸部皮下脂肪、肝脏、心脏与肾脏组织样品提取总RNA与总蛋白。通过荧光定量PCR技术检测了PPARγ2mR-NA的表达量;通过Western blot检测PPARγ2蛋白表达量。结果显示,各温度组猪腹腔脂肪、颈部皮下脂肪、胸部皮下脂肪、肝脏、心脏PPARγ2mRNA及蛋白表达量总体上差异显著（P〈0.01）,肾脏PPARγ2mRNA表达量总体显著升高,但其蛋白表达量总体呈下降趋势。结果表明,PPARγ2对冷刺激非常敏感,它除了可以调节冷应激时的脂肪代谢平衡,还对心脏有较好的保护作用,但是对肾脏的作用有限。本试验显示了冷应激中PPARγ2在脂肪代谢与能量代谢中作用,为研究冷应激对机体的影响及畜禽品质的提高奠定了基础。     

黄花棘豆生物碱对体外大鼠卵黄囊胎盘结构及功能的影响

结合电镜技术 ,应用体外全胚胎培养 (WEC)方法 ,观察了黄花棘豆生物碱对大鼠卵黄囊 (YS)胎盘及胚胎的影响。结果表明 ,黄花棘豆生物碱质量浓度在 5 0 μg/ m L 以上时 ,YS血管分化程度明显减低 ,对胚胎器官形态学分化的影响有剂量反应关系 ;质量浓度在 2 0 0 μg/ m L 时 ,YS直径和畸胎数与对照组有显著差异。电镜观察发现 ,剂量在 5 0 μg/ m L 以上时 ,YS上皮细胞微绒毛稀疏变短 ,胞质中贮液泡减少 ,线粒体、内质网等内膜系统发生多种细胞病理学改变 ,细胞间隙增宽 ,连接复合体破坏。表明 YS血管分化及其超微结构对棘豆生物碱反应敏感 ,其分化程度与对胚胎发育程度的影响一致 ,可以认为 YS结构与功能受损是黄花棘豆生物碱导致胚胎发育毒性所致