肉鸡热休克蛋白70 mRNA荧光定量PCR方法的建立和优化

对适应性饲养到30日龄时的60只肉鸡进行热应激处理,通过热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)mRNA荧光定量PCR(fluorescencequantitativePCR,FQ-PCR)方法检测热应激处理肉鸡组织中HSP70mRNA含量。虽然受试鸡肝脏和心脏的HSP70mRNA水平在热应激6h时略低于对照组(P>0.05),但随持续性高温应激时间的延长,HSP70mRNA水平逐渐升高,热应激18h时应激肉鸡肝脏和心脏HSP70mRNA水平达最高水平,明显高于对照组(P<0.01)。实验选用3-磷酸甘油醛脱氢酶基因(GAPDH)作为内参照,体外转录的RNA和阳性质粒作为两种标准品。结果显示,实验所建立和优化的FQ-PCR反应体系是理想的。     

急性持续热应激对肉鸡免疫系统的影响

养殖环境等各种应激使机体的免疫应答能力降低是引发疾病的重要原因之一。本实验通过研究持续应激条件下受试鸡体液免疫、细胞免疫等指标的改变以及HSP90在免疫脏器的分布，以探索持续热应激对肉鸡免疫能力的影响，为养殖环境的控制提供理论依据。     

鸡痘病毒基因组DNA复制非必需片段的鉴定

将中国鸡痘病毒鹌鹑化弱毒株（２８２Ｅ４）蚀斑纯化，在ＳＰＦ鸡胚成纤维细胞上增殖后，经超声波裂解，蔗糖梯度离心得到纯化病毒，以蛋白酶Ｋ消化，酚：氯仿、氯仿和水饱和乙醚抽捉，乙醇沉淀，得到ＦＰＶ基因组ＤＮＡ，后用ＥｃｏＲｌ消化，随机克隆到ｐＵＣ１８质粒中。限制性内切酶片段电泳分析结果表明，克隆到１０个不同大小的片段，根据酶切图谱分析，选取克隆或亚克隆后的单一酶切位点，插入标记基因（Ｐ１１一ＩａｃＤ筛选出３个复制非必需片段。为进一步构建表达外源片段重组质粒载体创造了良好的条件。     

热应激下肉鸡心肌的损伤和热休克蛋白的定位

将90只肉鸡随机分成A组(对照)、B组(热应激6 h)、C组(热应激12 h)、D组(热应激18 h)、E组(热应激24 h)和F组(热应激48 h).对各组受试鸡心肌进行病理组织学检查,并利用4种HSP单克隆抗体(HSP27、HSP60、HSC70和HSP86)对心肌纤维进行免疫组织化学染色.实验结果显示,热应激时心肌纤维的病理组织学损伤主要表现为心肌纤维变性和心肌纤维断裂;HSP27、HSP60、HSC70和HSP86在心肌纤维中的定位不尽相同,HSP27、HSC70和HSP86在心肌纤维中有强阳性表达,但HSP60的阳性染色较弱.提示HSPs在心肌纤维内的广泛分布对保护心肌纤维方面可能起重要的作用.     

花自芳菲香自来——记寿光市新世纪种苗有限公司董事长桑自方

一粒种子可以改变整个世界，一株幼苗则孕育着沉甸甸的希望。从种子萌发幼苗，一个看拟简单的过程，一位普通农民却深入其中，把这个“简单的过程”演绎得有滋有味——     

牛支原体肺炎流行RT-PCR方法的初步诊断

设计5对引物,对山东某一牛交易市场采集的64份鼻腔棉拭子样品进行了病原学检测。对所有样品进行差异脲原体、牛支原体、牛生殖道支原体、牛眼支原体和牛传染性胸膜肺炎(CBPP)PCR病原学检测,PCR产物连接T载体测序。PCR结果显示,牛支原体阳性样品7份,牛生殖道支原体、牛眼支原体和牛丝状支原体全部为阴性;测序结果显示,所测样品核酸序列与牛支原体和无乳支原体核酸序列都具有很高的同源性。对核酸序列进行遗传进化树分析表明,相对于无乳支原体而言,所测核酸序列与牛支原体物种具有更近的遗传距离。     

葡萄牙使用非洲猪瘟弱毒疫苗的历史案例分析

1957年4月非洲猪瘟(African swine fever,ASF)首次从非洲大陆传至葡萄牙里斯本,1960年4月再次传入葡萄牙并快速蔓延.因担心疫情失控及对养猪业发达地区产生影响,葡萄牙自1962年5月启动ASF疫苗田间试验.部分数据显示:接种疫苗21 d后,ASF的群体发病率为0.96％,个体发病率为1.05％...     

表达MDV gB的重组FPV疫苗的免疫保护试验

表达ＭＤＶｇＢ的重组ＦＰＶ疫苗的免疫保护试验刘秀梵，王志亮，彭大新，张如宽（江苏农学院动物医学系，扬州２２５００９）通过多步基因操作将马立克氏病病毒（ＭＤＶ）ｇＢ基因克隆进本室构建的中国鸡痘病毒（ＦＤＶ）疫苗株插入载体，其转染后筛选到高效表达ｇＢ的重...     

集约化肉鸡场新城疫免疫失败原因分析

对经常遭受新夸疫（ＮＤ）免疫失败的某鸡场１９９５年的免疫检测结果进行了全面总结。分析结果表明：（１）生物制品亟待改进，肉鸡配套技术的建立刻不容缓。（２）弱毒苗和灭活苗的应用各有优劣，选用疫苗应酌情处理。（３）免疫的制订不能一成不变，线源抗体的测定是制订免疫程序的基础。（４）饲养管理条件的好坏，防疫卫生制度的健全直接影响疫病的防疫，不容忽视。（５）消除疫苗免疫抑制因素的影响。