禽流感实验室诊断技术研究进展

禽流感（AvianInfluenza，AI）是由正粘病毒科流感病毒属A型流感病毒（AIV）引起的传染病。多种禽类都带毒，但鸡和火鸡是主要受害者。AIV有共同的与抗原相关的核衣壳或者基质多肽，根据血凝素（H）和神经氨酸酶（N）抗原进行亚型分类。已知现有13个H亚型（H1－H13）和9个N亚型     

越南非洲猪瘟疫苗AVAC ASF LIVE(ASFV-G-ΔMGF)研究工作分析与思考

非洲猪瘟（Afcrian swine fever,ASF）是由非洲猪瘟病毒（African swine fever virus,ASFV）感染引起的烈性传染病。近日,越南正式将经临床试验验证的非洲猪瘟弱毒疫苗AVAC ASF LIVE(ASFV-G-ΔMGF)在其全国推广使用。本文对越南非洲猪瘟弱毒疫苗ASFV-G-ΔMGF相关研究数据进行了总结分析,分别从ASFVG-ΔMGF株攻毒保护能力评价、传代细胞培养株临床动物实验、野猪口服接种试验、毒力返强验证等方面,结合国内相关ASFV基因缺失株试验数据进行了分析。总结分析发现：越南上市的ASFV-G-ΔMGF疫苗株,二次免疫接种后攻毒保护效果更好,但在对野猪的口服接种评价中,其口鼻接种效果存在不确定性;随着疫苗株在动物体内的不断传代,其存在毒力返强和毒株变异风险,导致接种猪只临床症状明显;ASFV-G-ΔMGF株虽然有较好的攻毒保护能力和可靠的生产优势,但仍缺乏相关研究数据,特别是在垂直传播、交叉保护、基因突变等方面。后续仍需对ASFV-G-ΔMGF株的临床应用效果进一步评价。     

牛巴贝斯虫核酸探针检测中血样处理优化试验

分别采用光敏生物素，地高辛标记的牛巴贝斯虫ＤＮＡ探针检测三种血样处理方法提取的虫体ＤＮＡ，结果表明：ＴｒｉｔｏｎＸＺ－１００／乙酸处理方法与全血提取法有相同检测水平；但前者操作简便；皂素处理法不能回收全部虫体，降低了探针敏感性。     

热休克蛋白70研究新进展

1962年,Ritassa在果蝇的研究中首次发现,短暂的热休克可以诱导唾液腺染色体出现3个膨突,提示这一区带转录加强,他将这一现象称为“热休克反应“(heat shock response,HSR).1974年,Tissieres发现热休克反应中转录合成的为一组特殊蛋白,而且伴随着这类蛋白的合成,细胞的其他蛋白合成却受到抑制,由于这类蛋白的合成与热休克反应有关,故命名为热休克蛋白(heat shock protein,HSP).除了高热之外,多种应激原如重金属、饥饿、缺氧、缺血等都可以诱导HSP的表达,但人们习惯上仍称为HSP或热应激蛋白(heat stress protein,HSP),有时也称为应激蛋白(stress protein,SP).……     

近两年山东省新城疫流行现状

近两年（２０００～２００１年）来，农业部动物检疫所门诊的病禽中，经病毒分离、血清学调查证明为新城疫的病例共３６８例，发病禽数８８２３９４羽。我们对这些发病禽的流行病学进行了分析。１地区性如表１所示，其中来自青岛的共２５４例，平均发病日龄为１１１日龄，平均产蛋下将幅度为２３％，平均死淘率为１０．４４％；来自潍坊的共４２例，平均发病日龄为２２７日龄，平均产蛋下将幅度为３１％，平均死淘率为７．９９％；来自烟台的共４０例，平均发病日龄为１５４日龄，平均产蛋下将幅度为２９．２７％，平均死淘率为２０．７９％…     

规模化奶牛场布鲁氏杆菌病的诊断、净化、防控

布鲁氏杆菌病是由布鲁氏杆菌引起的重要的人兽共患慢性传染病。凡是养牛的地区均有不同程度的流行和感染,每年因此造成巨大的经济损失,严重影响畜牧业的持续发展,威胁着人类的健康。由于奶牛场集中饲养,如有个别发病没有及时隔离,便会很快蔓延全群,如果不能有效地控制和消灭,不仅会造成严重的经济损失,更会导致严重的社会公共卫生问题。人类生活与牛奶、牛肉制品关系非常密切,人接触病牛、饮用病牛的生乳或制品均可被感染,所以奶牛场布鲁氏杆菌病的净化、防控极其迫切、尤为重要。笔者根据《布鲁氏杆菌病防治技术规范》、《2009—2015年布鲁氏杆菌病结核病防治规划大纲》和实践经验,对布鲁氏杆菌病的诊断、净化、防控几方面进行归纳、总结,希望能对奶牛场布鲁氏杆菌病的净化、防控有所帮助。     

地高辛标记探针检测重组鸡痘病毒中的MDVgB基因

以XbaI从pVLgB中切下gB基因片段，用dig试剂盒通过六聚核苷酸随机引物合成DNA探针，对粗提的重组FPV、MDVGA、FPV282E4和CEFDNA以及pFGB1175质粒DNA进行打点杂交（Dot－blot）。经免疫学测定、NBT显色后发现，重组FPV、MDVGA、pFGB1175斑点呈明显阳性反应；而FPV282E4和CEFDNA则呈阴性反应．从而在DNA水平上证实了重组FPV基因组中gB基因的存在。     

I类新城疫病毒NDV08-004株微型基因组的构建及其功能鉴定

目的本研究旨在构建Ⅰ类新城疫病毒NDV08-004的微型基因组和辅助质粒,为构建病毒拯救体系奠定基础。方法根据Ⅰ类新城疫病毒NDV08-004的全基因组序列,采用SOE方法将增强绿色荧光蛋白基因(eGFP)插入NDV08-004的3’-Leader和5’-Trailer区域之间后反向插入转录载体pOLTV5中,构建了NDV08-004的微型基因组pLGT-03。将pLGT-03转染辅助病毒NDV08-004感染的表达T7RNA聚合酶BSRT7/5细胞进行功能鉴定。采用RT-PCR将NDV08-004的NP、P和L蛋白基因亚克隆入表达载体pCI-neo中,分别构建了三个辅助质粒pCI-NP、pCI-P、pCI-L。通过构建的微型基因组pLGT-03和三个辅助质粒按照一定的比例共转染BSRT7/5细胞来验证辅助质粒的功能。结果微型基因组pLGT-03转染辅助病毒感染的BSRT7/5细胞后可见明显荧光,表明微型基因组构建成功。微型基因组和辅助质粒共转染可见荧光表达,表明三个辅助质粒均具有相应的功能。结论表明微型基因组和辅助质粒均具有相应的功能,为建立NDV08-004的反向遗传操作平台奠定了基础。     

新城疫疫苗对SPF鸡和商业肉鸡的免疫学效力分析

将不同新城疫病毒疫苗免疫SPF鸡和商业用肉鸡,对免疫后抗体水平变化和对野毒株攻击的保护率进行了监测。利用Clone30、F48E8和NXF3单联苗和联苗免疫过的SPF和商业肉鸡,对105EID50两次攻毒保护率均为100%;而只用LaSota疫苗免疫的SPF鸡保护率为40%。试验数据表明,分离株NXF3具有较好的免疫原性和对强毒攻击的保护,可以作为候选疫苗用于商业肉鸡。     

抗尼帕病毒N蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

为制备抗尼帕病毒(NiV)的单克隆抗体(Mib),本研究以原核表达并纯化的NiV核蛋白(N蛋白)为免疫原,按常规方法免疫小鼠,取其脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,对杂交瘤细胞进行筛选,阳性孔经两次有限稀释法克隆,最终获得两株稳定分泌抗N蛋白MAb的杂交瘤细胞株,分别命名为A6和C5.Western blot分析表明....