全文获取类型
收费全文 | 429篇 |
免费 | 5篇 |
国内免费 | 29篇 |
专业分类
农学 | 1篇 |
基础科学 | 2篇 |
7篇 | |
综合类 | 57篇 |
水产渔业 | 6篇 |
畜牧兽医 | 389篇 |
园艺 | 1篇 |
出版年
2024年 | 3篇 |
2023年 | 8篇 |
2022年 | 3篇 |
2021年 | 8篇 |
2020年 | 3篇 |
2019年 | 7篇 |
2018年 | 5篇 |
2017年 | 7篇 |
2016年 | 7篇 |
2015年 | 14篇 |
2014年 | 14篇 |
2013年 | 14篇 |
2012年 | 10篇 |
2011年 | 20篇 |
2010年 | 18篇 |
2009年 | 27篇 |
2008年 | 23篇 |
2007年 | 29篇 |
2006年 | 34篇 |
2005年 | 43篇 |
2004年 | 23篇 |
2003年 | 22篇 |
2002年 | 18篇 |
2001年 | 14篇 |
2000年 | 12篇 |
1999年 | 10篇 |
1998年 | 11篇 |
1997年 | 18篇 |
1996年 | 19篇 |
1995年 | 12篇 |
1994年 | 5篇 |
1993年 | 2篇 |
排序方式: 共有463条查询结果,搜索用时 31 毫秒
111.
单抗捕捉ELISA检测猪附红细胞体血清抗体方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
在制备针对猪附红细胞体病的特异性单克隆抗体的基础上,建立了单抗捕捉快速检测猪附红细胞体病抗体的ELISA方法,并对影响ELISA结果的各项反应条件进行了优化.结果表明,猪附红细胞体腹水单抗的最佳稀释度为1:20 000,猪附红细胞体病抗原工作质量浓度为4.088 mg/L,血清稀释度为1:40,HRP标记的兔抗猪IgG的工作浓度为1:5 000.待检血清和酶标二抗的反应时间均为37℃1 h;底物在室温显色时间为10 min.已建立的ELISA方法与PCR平行检测50份样本,总符合率为92%,表明该方法特异性强、快速、敏感性高.用该法检测了各地采集的171份血清,阳性率为40.4%,与镜检的符合率为59.2%;阴性率为47.4%,与镜检的符合率为66.7%,总符合率为67.3%. 相似文献
112.
目的选取PPRV和RPVN蛋白中抗原性较强、氨基酸差异性较大的片段进行重组表达。方法对PPRV和RPVN蛋白中51-175aa、376-525aa蛋白片段基因进行大肠杆菌偏爱密码子优化后人工合成,利用分子生物学技术,将目的基因分别克隆至原核表达载体pET-28a(+)构建重组表达质粒,将重组表达质粒转化至E.coliBL21(DE3),诱导表达并纯化PPRV与RPVN蛋白中51-175aa、376-525aa片段。结果得到了分子量分别约17.8kD、20.6kD的各两段融合蛋白。结论本研究成功表达了PPRV和RPVN蛋白中抗原性较强、氨基酸差异性较大的51-175aa和376-525aa蛋白片段,为制备能区别PPR和RP病毒的特异性单抗提供了抗原。 相似文献
113.
114.
115.
根据GenBank上公布的MRP与CPS2J的开放性阅读框保守序列,运用BEACON Desigener 2.0软件设计和合成了2对引物和其相应的荧光探针,优化各个反应物的浓度和实时荧光PCR循环程序,建立从组织中直接检测2型链球菌主要毒力因子MRP与CPS2J的实时荧光PCR方法.双重实时荧光PCR检测2型猪链球菌方法能够从病料中直接检测2型猪链球菌并可以检测出该菌的主要毒力基因MRP,运用该方法可以最低检测到24CFU/mL 2型猪链球菌,并且与其他血清型链球菌和其他病原菌无交叉反应.特异性良好.通过对8个样品在3个不同时间的检测.结果显示该方法的稳定性和重复性均很好. 相似文献
116.
猪生殖与呼吸综合征油乳剂灭活疫苗的制备及安全性试验 总被引:1,自引:0,他引:1
用本中心分离鉴定的猪生殖与呼吸综合征(PRRS)强毒株接种Marc-145细胞,制备病毒抗原液,毒价不低于10^-7.0TCID50/0.1mL。经一定浓度的甲醛溶液灭活后与油佐剂乳化制成油乳剂灭活疫苗3批。经对该制品的安全性能测定,结果表明该品对初生仔猪、断奶仔猪及妊娠母猪3倍剂量注射,均未出现不良反应,安全性良好;对母猪的繁殖性能不产生影响。 相似文献
117.
口蹄疫(Foot—and—mouth disease,FMD)是由口蹄疫病毒感染引起的一种急性、热性、高度接触性和可快速远距离传播的动物疫病,动物和动物产品的国际贸易中受到严格限制。FMDV有7个血清型,80多个亚型,型与型之间无交叉保护性,使FMD的预防和诊断更加困难。目前,该病在世界动物卫生组织(OIE)成员国中有三分之二的国家存在本病,由于发病后的巨大影响——引起消费者恐慌和出口受到限制, 相似文献
118.
119.
120.
用亲和层析纯化的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)重组核衣壳蛋白GST-N作为诊断抗原,建立检测PRRS血清抗体的间接ELISA方法。抗原最佳包被量为每孔400 ng,待检血清最佳稀释度为1∶100,待检血清样品的D_(490 nm)≥0.43D_(po■) 0.57D_(neg)判为阳性,反之判为阴性。对采自14个猪场的364份猪血清样品进行检测,PRRS阳性率为51.4%,略高于HerdChek ELISA的阳性检出率49.7%。与HerdChek ELISA相比,间接ELISA的敏感性为94.5%,特异性为91.3%,总符合率为92.9%,Youden指数为0.86。同时还证明该方法具有良好的批间和批内重复性,并且不与猪瘟、猪伪狂犬病等阳性血清发生反应。该方法的成功建立将为我国PRRS的防制工作作出贡献。 相似文献