仔猪散发亚临床猪瘟及其抗体效价分析

黑龙江某养猪户仔猪零星发病死亡,经PCR诊断为亚临床猪瘟。采集了60头母猪血,采用间接ELISA试剂盒检测60头母猪猪瘟免疫抗体水平。结果表明,该户母猪猪瘟免疫抗体水平较低,免疫抗体合格率仅为3.3%。因此,母猪免疫失败是导致仔猪散发猪瘟的主要原因。     

引进国外马铃薯种质资源的遗传多样性分析

应用RAPD标记技术研究国外马铃薯品种的遗传多样性,以期明确这些品种的亲缘关系,为马铃薯优良品种的选育提供理论依据。利用筛选的29条RAPD引物,对24份国外马铃薯品种进行遗传多样性分析。结果显示,29条RAPD引物共扩增出165个条带,其中116条为多态性条带,多态性比例为70.3%;试供的24个国外马铃薯品种间的遗传相似系数在0.514~0.816之间,平均为0.677;相似系数小于0.6的品种对仅为7.25%;24个马铃薯品种可聚为2大类6亚类。结果表明,试供的24个国外马铃薯品种间的遗传相似性高,遗传基础比较狭窄。     

蓝狐脑型大肠埃希氏菌的分离鉴定

从有神经症状的病死蓝狐脑组织中分离出两株大肠埃希氏菌，两株菌对小白鼠致病性强，对痢特灵、氨苄青霉素等敏感。     

过瘤胃维生素D对围产期奶牛低血钙症的影响

为了阐明日粮添加过瘤胃维生素D对围产期奶牛低钙血症的调控机制,在某集约化奶牛场选取40头奶牛,随机分为4组,对照组(C)饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别于产前10d至分娩后10d在日粮中每天添加1.5、3.0、6.0g/头过瘤胃维生素D。对4组试验奶牛围产期(分别于产前10、7、3、0d和产后3、7、10d)血清维生素D3(1,25-(OH)2D3)、钙、羟脯氨酸、甲状旁腺素和降钙素水平进行检测。结果表明,围产期奶牛血钙水平分娩时达最低,产后逐渐上升,且产前7d至产后10d对照组奶牛血钙浓度显著低于试验Ⅰ组(P<0.05);分娩当天试验Ⅰ组奶牛血浆中1,25-(OH)2D3、羟脯氨酸和降钙素水平显著高于对照组(P<0.05),甲状旁腺素水平显著低于对照组(P<0.05)。提示,日粮中每天添加1.5g/头过瘤胃维生素D能调节甲状旁腺素和降钙素等激素的分泌,促进肠道对钙的吸收,动员骨钙,从而防止奶牛产后低钙血的发生,且围产期奶牛低血钙症与机体血钙稳态调节作用密切关联。     

观赏凤梨的繁殖与栽培技术

<正> 观赏凤梨为凤梨科观赏植物,其株形优美,叶片和花穗色泽艳丽,花形奇特,花期可长达2-6个月,是新一代室内盆栽花卉。 一、繁殖方法 观赏凤梨小规模生产和家庭栽培,一般采用蘖芽扦插。观赏凤梨原株开花前后基部叶腋处产生多个蘖芽,待蘖芽长到10厘米左右,有3～5片叶时,用利刀在贴近母株的部位连短缩茎切下,伤口用杀菌剂消毒后稍晾干,蘸浓度为300～500毫克/千克的萘乙酸,扦插于珍珠岩、粗沙或培养土中,保持基质和空气湿润,并适当遮荫,1-2个月后即有新根长出,可转     

马铃薯脱毒试管苗壮苗培养体系的优化

试验采用正交实验设计法,研究了不同浓度的α-萘乙酸(NAA)、比久(B)9)、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)和大量元素组合对马铃薯品种费乌瑞它脱毒试管苗壮苗培养的影响,以期为费乌瑞它脱毒试管苗壮苗培养优化培养体系的建立提供理论参考。结果表明:在4个因素中对茎粗、根数、根长和单株干重影响大小依次为:大量元素>B9>NAA>6-BA;而对苗高、有效茎节数、活叶数和单株鲜重影响最大的为大量元素,影响最小的为NAA。新复极差法显著性测定结果显示,除4个处理外,其余处理与对照间有效茎节数、活叶数、茎粗、根长、根数、单株鲜重和干重差异均达到极显著水平。MS(100 mL/L大量元素)+0.03 mg/L NAA+10 mg/L B9+2%白糖+0.6%琼脂培养基除根长外各性状的值均最大,表明它是适合‘费乌瑞它’脱毒试管苗壮苗培养的最佳培养基。     

黑龙江省马铃薯主栽品种遗传多样性的RAPD分析

应用RAPD标记技术对黑龙江省34份马铃薯主栽品种的遗传多样性进行分析,明确这些主栽品种的亲缘关系,旨在为本区域马铃薯优良品种的选育提供理论依据。结果显示,34条随机引物共扩增出条带185条,其中多态性条带135条,占总条带数的73%;34份供试品种可聚为3大类7亚类,遗传距离在0.112~0.551之间,平均为0.364。结果表明,黑龙江省马铃薯主栽品种的遗传相似性较高,遗传基础比较狭窄。     

猪β防御素-2基因在HEK293T细胞中的表达

用Trizol试剂提取猪血白细胞总RNA,根据已发表的序列设计引物,采用RT-PCR方法扩增出猪β防御素-2(pBD-2)基因,并将该基因插入到真核表达载体pcDNA3.1A中,构建成猪β防御素-2基因的真核表达载体pcDNA3.1A/pBD-2,经磷酸钙介导转染HEK293T细胞进行表达。结果表明:本试验扩增的pBD-2基因与已发表的序列完全一致。表达产物经Western-blot检测,证明pBD-2能够在真核细胞HEK293T中表达。     

奶牛临床和亚临床酮病的血浆代谢组学研究

【目的】基于代谢组学的气相色谱(GC)/质谱(MS)联用技术分析临床酮病、亚临床酮病和健康的奶牛血浆代谢谱,观察奶牛体内代谢产物的变化,寻找内源性代谢分子标记物,用于发现奶牛临床和亚临床酮病的早期诊断及病情进展的特征生物标志物,并阐明该病发病机制。【方法】收集临床酮病奶牛血样24例,亚临床酮病奶牛33例,健康对照组奶牛23例,静脉采集试验奶牛血液,分离血浆,检测其β-羟丁酸、血糖等生化指标。将血浆样品预处理后,运用GC/MS联用技术检测各组奶牛血浆代谢产物,利用质谱数据库对其进行鉴定。采用主成分分析（principal component analysis, PCA）和偏最小二乘判别分析法（partial least squares discriminant analysis, PLS-DA）等多元统计方法对临床酮病组、亚临床酮病组和健康对照组奶牛检测数据进行模式识别分析。通过PLS-DA方法建立疾病诊断模型后,筛选潜在的疾病生物标记物。【结果】 以80例奶牛血浆样品为分析对象,研究建立了内源性代谢物谱的GC/MS分析方法,并利用NIST（2008）商业质谱数据库对检测到的代谢物进行快速鉴定,共检测出267个变量。将代谢组数据导入SIMCA-P软件进行主成分分析和偏最小二乘法判别分析,代谢组数据可将患病组与健康组分别聚类区分,并且寻找到组间种类无差别代谢物为40种。结果显示与对照组相比,临床和亚临床酮病的差异代谢物均为32个,临床酮病与亚临床酮病组相比有13个差异代谢物。通过查找KEGG数据库,对代谢物进行分析,这些代谢物主要与氨基酸代谢、脂肪代谢和碳水化合物代谢等能量代谢途径相关。【结论】基于代谢组学的GC/MS技术对酮病奶牛血浆进行检测,并结合多元统计分析,共在临床、亚临床酮病和健康组之间发现40种代谢物（主要为脂肪酸,氨基酸和碳水化合物等物质）。证明奶牛血浆样品的GC/MS代谢谱可以有效地对临床酮病组、亚临床酮病组与健康对照组进行区分。该结果也进一步证明了利用代谢组学技术,在一定程度上可以揭示奶牛临床和亚临床酮病的发生和发展变化,而这些对组间分类有贡献的差异代谢物可能是奶牛酮病诊断的潜在代谢标记物和客观指标。通过研究可以发现奶牛临床和亚临床酮病的发生和发展过程中,其血浆内的部分代谢物的代谢模式和代谢途径发生了改变。此外,新的潜在的代谢物也为奶牛酮病的诊断和预防提供了一定的新思路。     

兔病毒性出血症的诊断

兔出血症俗称兔瘟 ,是兔的一种急性高度接触性传染病。以呼吸系统出血、实质器官水肿、淤血及出血性变化为特征。本病于 1984年初 ,首先在我国江苏等地爆发 ,随即蔓延到全国多数地区。此后 ,世界上许多国家和地区也报道了本病。兔病毒性出血症在临床上易与兔巴氏杆菌相混淆。因此 ,有必要通过实验室来确诊该病 ,提出正确的防治措施 ,确保养兔业的发展。现将养兔户发生的兔出血症诊治介绍如下 :1　发病情况某养兔户饲喂种兔、子兔、青年兔共 70余只 ,2 0 0 2年 5月2 6日突然有 1只死亡 ,随后连续发病 ,5ｄ内共死亡 3 0只 ,死亡率高达 44 %。…