花椰菜高效再生体系建立及农杆菌介导的遗传转化研究

以栽培品种"银峰80天"的下胚轴与子叶为外植体,建立花椰菜高效组织再生体系,并研究卡那霉素浓度、侵染时间和共培养时间等因素对花椰菜愈伤组织分化的影响。结果表明:以MS+TDZ 0.2 mg/L+NAA0.1mg/L作为分化培养基时,下胚轴的分化频率达88.9%,子叶的分化频率达97.6%;农杆菌介导花椰菜遗传转化时,OD600=0.4,下胚轴和子叶的侵染时间为1 min,下胚轴和子叶分别共培养1 d和3 d后进行筛选,有利于花椰菜再生芽的分化获得抗性苗。     

油橄榄研究进展及其在贵州的发展建议

油橄榄(Olea europaea L.)又名洋橄榄、齐墩果,是世界名贵常绿木本油料兼果用经济树种,原产于地中海沿岸,富含优质食用植物油—橄榄油,广泛应用于食品医药、化妆品和化工等行业。从油橄榄的起源分布、生物学特征及生长环境、主要成分与利用价值、生产技术、产量及贸易等方面对其研究进展进行概述,分析我国油橄榄产业发展面临的机遇与存在问题,提出了贵州油橄榄产业发展的相对建议。     

橡胶合酶基因TkCTP1异源表达对杜仲胶合成的影响

本研究通过农杆菌介导的遗传转化法转化杜仲,经PCR验证获得独立的杜仲转基因株系76株.代谢组学分析结果表明,转基因杜仲与野生型杜仲差异代谢物共有58个,其中有43个上调、15个下调;与杜仲胶生物合成相关的差异代谢物有7个,包括上调的两个单萜和下调的甲羟戊酸、D-赤藓糖-4-磷酸、1个半倍萜和2个三萜.野生型和转基因杜仲...     

15个茶树品种多糖、纤维素、木质素含量的分析

本研究以常见15个茶树品种迎霜、白叶一号、福云6号、梅占、福鼎大白、金玫瑰、佛手、乌牛早、金牡丹、紫牡丹、九龙袍、黄观音、龙井、丹桂、紫玫瑰为研究对象,分别采用蒽酮-浓硫酸法、浓酸水解定糖法、浓硫酸法对同一地区不同品种茶叶中的多糖、纤维素、木质素含量进行了测定,结果表明茶多糖含量在2.27％3.36％之间.最低为迎霜,...     

烟草NAC4基因的克隆及其抗旱功能分析

NAC(NAM-ATAF-CUC)转录因子在植物逆境胁迫应答过程中发挥着十分重要的作用。本研究克隆了烟草(Nicotiana tabacum)的NAC4基因,c DNA编码区全长1 422 bp,编码473个氨基酸;进化树分析表明,烟草NAC4基因编码的氨基酸序列与辣椒(Capsicum baccatum)和榴莲(Durio zibethinus)都有极高的相似性。构建表达载体pSH-NAC4,遗传转化烟草,获得32株转基因植株。选取6株不同的转基因株系和3株野生型(wild type,WT)在20%聚乙二醇6000胁迫的条件下,观察植株生长并进行抗旱性分析;选取T_1代3个转基因株系(TP_4,TP_6,TP_7)和野生型烟草种子,用3个不同浓度的甘露醇模拟干旱胁迫,对其种子的发芽率和苗期根进行耐旱性相关分析。结果发现,300 mmol/L甘露醇处理15 d,种子发芽率比野生型高40%以上,通过观察苗期根的生长发现,野生型植株根的生长明显受到抑制。用20%PEG6000处理转基因植株和野生型植株7 d,结果显示,在干旱胁迫下,转基因植株的超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和过氧化物酶(peroxidase,POD)的活性均显著高于野生型,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量显著低于野生型植株(P0.05)。利用qRT-PCR方法分析相关基因,结果表明,在干旱胁迫时,NAC4,吡咯啉-5-羧酸合成酶基因(pyrroline-5-carboxylate synthetase,P5CS)和鸟氨酸-δ-氨基转移酶基因(ornithine-oxo-acid transaminase,δ-OAT)的相对表达量均上调;转NAC4基因的表达可能提高了植株的抗旱能力。本研究为进一步探讨NAC4基因的功能提供依据,以期为创制转基因耐旱植物提供基础资料。     

喜树快速繁殖与再生体系建立

喜树(Camptotheca acuminata)是珙桐科(Nyssaceae)的一种落叶阔叶树,为我国南方特有树种, 含有抗肿瘤作用的喜树碱.本研究建立了喜树愈伤诱导,器官发生与植株再生体系以及喜树成年茎段和无菌苗子叶节的快繁体系.以喜树无菌苗子叶和胚轴为外植体,采用不同激素组合诱导愈伤组织,只有培养在NN69 6-BA (1.0 mg/L) IAA (0.05 mg/L) AS (afenine sulfate ,10 mg/L)的培养基上的愈伤组织出现器官分化.每个愈伤分化的芽数平均为6个,分化率达86%.培养在附加0.5 mg/L的6-BA和0.1 mg/L的KT的NN69培养基上的芽生长既快又好.以子叶节和茎段为外植体,附加6-BA (0.5 mg/L), IAA (0.1 mg/L) 的NN69培养基对喜树茎段丛生芽的诱导效果较好,子叶节丛生芽诱导培养基为NN69附加6-BA (0.2 mg/L), IBA (0.05 mg/L) ,AS (afenine sulfate,10 mg/L),附加6-BA (0.25 mg/L), IAA (0.05 mg/L)的培养基对丛生芽增殖效果明显.所诱导的芽苗在附加0.5 mg/L IBA, 0.1 mg/L KT, 10 mg/L AS的B5培养基上诱导生根,生根率可达90%,平均根数6-8条.本研究为喜树的遗传转化提供了前提.     

茶树CsADH基因家族的鉴定和表达模式分析

ADH转录因子在植物的生长发育和非生物胁迫响应中起重要的调控作用。本研究基于全基因组数据,从茶树基因组中鉴定到51个ADH基因,对其基因结构、进化关系、保守域、染色体定位进行分析,同时分析它们在PEG诱导的干旱胁迫、盐胁迫和冷处理中的转录组数据。结果表明:51个茶树CSADH基因在茶树染色体上分布不均;根据进化关系将茶树ADH基因分为Ⅱ类;基因结构和保守基序分析发现相同亚家族的基因结构和保守结构域基本一致;基因表达分析显示,CSADH基因在花和果实组织中具有较高的表达水平,部分基因随着叶片成熟度的增加,表达水平升高;不同的CSADH基因在PEG诱导的干旱胁迫和冷处理下存在差异表达,说明CSADH基因广泛参与茶树生长发育和响应非生物胁迫中发挥重要作用。茶树ADH基因家族的鉴定与表达分析,为深入解析ADH基因响应茶树生长发育和非生物胁迫中的功能及分子机制提供理论依据,进一步为茶树抗逆育种提供更多基因资源。     

杜仲叶片为外植体的植株再生

杜仲不仅是传统中药植物,也是重要的胶源植物,具有很高的经济价值.本研究采用生长21天的杜仲无菌苗叶片为材料,基本培养基为MB(MS无机盐,B5有机物).不定芽的分化:切取杜仲叶片(叶盘)为外植体,在附加6-BA(1.0mg/L), IAA(0.5mg/L), KT(2.0mg/L), TDZ(0.2 mg/L)的MB培养基上培养一个月,分化得到不定芽,分化率高达到56%.壮芽和芽的增殖:不定芽培养在MB 6-BA (1.0mg/L) NAA (0.05mg/L)的培养基上,可使不定芽迅速得到增殖.生根和移栽:将切取的单芽培养在1/2MS IBA (1.5mg/L) 蔗糖20g/L的(培养基上,一个月后,从芽的基部生长出根,获得杜仲再生植株.本研究通过叶盘法建立杜仲植株再生体系,为杜仲的遗传改良奠定了基础.     

杜仲叶片为外植体的植株再生

杜仲不仅是传统中药植物，也是重要的胶源植物，具有很高的经济价值。本研究采用生长21天的杜仲无菌苗叶片为材料，基本培养基为MB(MS无机盐，B5有机物)。不定芽的分化：切取杜仲叶片(叶盘)为外植体，在附加6-BA(1．0mg／L)，IAA(0．5mg／L)，KT(2．0mg／L)，TDZ(0．2mg／L)的MB培养基上培养一个月，分化得到不定芽，分化率高达到56％。壮芽和芽的增殖：不定芽培养在MB 6-BA(1．0mg／L) NAA(0．05mg／L)的培养基上，可使不定芽迅速得到增殖。生根和移栽：将切取的单芽培养在1／2MS IBA(1．5mg／L) 蔗糖20g／L的(培养基上，一个月后，从芽的基部生长出根，获得杜仲再生植株。本研究通过叶盘法建立杜仲植株再生体系，为杜仲的遗传改良奠定了基础。