我国猪瘟的流行病学现状分析

根据调查、收集的猪瘟（CSF）临床与流行病学资料，分析了全国16个省市自治区48个发病猪场（疫点）的流行状况。调查结果表明，我国的CSF流行在较大范围内以临床表现不典型的CSF为主，发病多见于5月龄以下的仔猪，发病率与死亡率普遍较高，流行规模以局部流行为主，同一猪场中育肥捂与种猪的发病率很低。但母猪多呈隐性感染，部分感染母猪表现出繁殖障碍，因此认为隐生感染母猪可能是仔猪感染的重要传染源。在某些地区．仍然流行着高发病率和致死率的急性、典型CSF。所调查的猪群具有较高防疫注射密度，但仍有CSF发生，可能表明猪群的免疫水平不高。调查结果对进一步了解我国CSF的流行现状具有重受的参考价值。     

猪瘟病毒（HCV）石门株部分p23和p14基因的克隆,序列测定及与其…

应用ＲＴ－ＰＣＲ扩增猪瘟病毒（ＨＣＶ）石门株部分ｐ２３和ｐ１４基因，然后采用平端克隆法将扩增的ｃＤ－ＮＡ克隆到ｐＵＣ１９和ＳａｍⅠ位点，用双脱氧终止法牟重组质粒中的插入片段进行序列分析。将所测定的序列与其他１０株ＨＣＶ相同基因区域用ＤＮＡＳＩＳ计算机软件进行同源性比较和系统树分析。结果表明，大部分毒株为同一个型，该型共包括９个ＨＣＶ株，以Ｂｒｅｓｃｉａ株为代表，石门（Ｓｈｉｍｅｎ）株也属该型；而Ａ     

猪瘟基因疫苗在小鼠肌肉中的动态分布表达

本研究应用原位杂交法、免疫组化、PCR法对肌肉注射猪瘟基因疫苗pcDST、pcDSW后小鼠胫前肌中质粒存在的方式、部位及时间进行了动态观察，结果表明猪 病毒基因疫苗注射3h后质粒就到达细胞核，至20d在细胞核内仍呈阳性反应；pcDST质粒在肌肉内存在120d，pcDSW质粒在肌肉存在150d;pcDST质粒肌肉注射后第3d，pcDSW质粒肌肉注射后第5d，在胫前肌肌肉中可检测到表达产物，持续表达20d以上。表明构建的猪瘟基因疫苗经肌肉注射是较好的免疫途径。     

猪瘟病毒辽宁株E2蛋白部分基因片段的序列分析

应用RT-PCR方法对辽宁地区8份猪瘟临床病料进行了E2蛋白部分基因片段扩增,其中有5份病料扩增产物经2%的琼脂糖凝胶电泳获得大小约为210bp的目的基因片段.经对目的基因片段回收纯化后进行核苷酸序列测定,并与国内外发表的18株猪瘟病毒株的核苷酸序列和氨基酸序列进行同源性比较表明,所分离的5株猪瘟病毒株核苷酸序列及氨基酸序列与C1W、C2W等8个毒株的同源性较高,而与国内的疫苗株和强毒株的同源性则较低,基因型差异比较明显,并不归属于同一个基因亚群.本研究通过对E2基因片段扩增以及相应的核苷酸序列和氨基酸序列分析,揭示了本地区猪瘟病毒的分子流行病学背景.     

猪繁殖与呼吸综合征病毒直接免疫荧光检测方法的建立

为了建立一种快速、准确的猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)直接免疫荧光检测方法,对前期制备的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒核蛋白单克隆抗体进行亲和层析法纯化,经异硫氰酸荧光素标记;通过对荧光染色的固定试剂、固定时间、染色时间和荧光抗体工作浓度的测定,确定荧光抗体染色法在PRRSV感染细胞和病料中的最佳工作条件。利用荧光抗体染色法对本实验室收集的62份病料进行检测,同时以RT-PCR进行验证,确定荧光染色法的检测符合率。结果显示,FITC标记的荧光抗体检测细胞培养物最佳工作条件:80%丙酮4℃固定20 min,荧光抗体按1:400稀释,感作时间为1 h;检测组织病料最佳工作条件:病料组织进行涂片后,用80%丙酮4℃固定30 min,荧光抗体按1:200稀释,感作时间为2 h;病料组织荧光检测与RT-PCR的检测一致率为74.2%。本研究建立的快速、准确的猪繁殖与呼吸综合征病毒直接免疫荧光检测方法为今后该疾病诊断奠定了基础。