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[目的]克隆番木瓜CpTIFY10A-like基因序列,并分析其表达特性,为探索该基因功能和抗番木瓜环斑病毒(PRSV)分子机制提供理论依据.[方法]结合前期研究的抗PRSV转录组数据,利用RACE对上调表达基因Cp-TIFY10A-like进行克隆,获得该基因cDNA全长序列,分析其编码区序列(CDS)及进行生物信息学分析.利用已鉴定的PRSV对3月龄番木瓜植株进行不同处理,以感染PRSV且出现病症的植株(CK+)、1.0 mL/L禾甲安(CTS-N)灌施感染PRSV且出现病症的植株(B)为处理组,以清水灌施(不添加禾甲安)不感染PRSV的植株(CK-)为对照组,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测不同处理下PRSV基因和CpTIFY10A-like基因在番木瓜叶片中的表达情况.最后将CpTIFY10A-like基因CDS序列连接至pET28a-sumo载体上构建原核表达载体,转化Rosetta(DE3)感受态细胞,通过不同浓度IPTG诱导蛋白表达,利用SDS-PAGE电泳检测原核表达情况.[结果]CpTIFY10A-like基因全长为1352 bp,CDS序列为822 bp,编码273个氨基酸残基;其编码蛋白理论等电点(pI)9.23,不稳定系数62.97,亲水性平均系数-0.458,属于不稳定的亲水性碱性蛋白,定位在细胞核上,其二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主,同时含有少量的β-折叠和延伸链.CpTIFY10A-like蛋白与酸枣和白梨TIFY蛋白的氨基酸序列相似性较高,均含有特定的TIFY结构域,属于TIFY蛋白家族,三者在系统发育进化树上聚在同一分支,表明亲缘关系较近.不同处理的番木瓜叶片中,PRSV基因的相对表达量排序为CK+(1.02)>B(0.39)>CK-(0),CpTIFY10A-like基因的相对表达量排序为B(53.12)>CK+(1.15)>CK-(1.02),且CpTIFY10A-like基因在经禾甲安处理的感染PRSV番木瓜叶片中相对表达量显著升高(P<0.05,下同),而PRSV基因的相对表达量显著降低.CpTIFY10A-like基因在原核细胞中表达蛋白的分子量与理论分子量(29.36 kD)相符,且不同浓度IPTG诱导下,IPTG浓度越高,蛋白表达量越多,表明该基因在原核细胞中成功表达.[结论]禾甲安可诱导CpTIFY10A-like基因高效表达,进而通过茉莉酸通路起调节作用以抵抗PRSV感染,即CpTIFY10A-like基因在番木瓜抗PRSV过程中发挥重要调控作用. 相似文献
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摘要:金沙江河谷区是我国油橄榄四大适生区,是云南省油橄榄产业发展重点区域,油橄榄栽培历史证明迪庆州两江干热河谷油橄榄生长适应性较强,经济性状表现优良,满足产业化要素。本文针对该州当前油橄榄生产现状及基地建设中存在问题,采用综合因子态势分析法,通过剖析当地油橄榄产业优劣势和生态适宜性分析,不仅将油橄榄在迪庆地区的适生范围确认至金沙江、澜沧江两江流域,还提出在乡村振兴战略背景下适于两江上游干热河谷油橄榄产业发展的产业化策略,并以高质量发展为目标提出区域油橄榄生态经济发展模式。 相似文献
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不同小麦品种对麦田磺酰脲类除草剂的耐药性研究 总被引:8,自引:0,他引:8
通过敏感性测定,明确了不同小麦品种对麦田磺酰脲类除草剂的耐药性。结果表明,百农65,豫麦2号耐药性较强;百农64,豫麦32号,中育3号耐药性居中,豫麦21号,豫麦18号耐药性较弱。豫麦21号对药剂的敏感性最强,用药不当,易产生药害,并对品种×药剂间及品种×药剂×含量间的协同效应进行了分析。 相似文献
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土壤因子与小粒咖啡品质产量形成关系研究 总被引:1,自引:0,他引:1
土壤因子是影响小粒咖啡品质产量的主要因子。本研究通过对土壤因子进行相关性分析、改进的灰色关联分析、通径分析及多元线性回归分析,明确影响小粒咖啡品质和产量的主要因子,以指导科学施肥。结果表明:小粒咖啡咖啡因含量的土壤决定因子为海拔(-0.296*),总糖含量的土壤决定因子为有机质(0.607**)和速效磷(-0.232*),蛋白质的土壤决定因子为pH(-0.387**)和有机质(0.227*),灰分含量的土壤决定因子为速效磷(0.334**),水溶性浸出物含量的土壤决定因子为海拔(-0.494**),脂肪含量的土壤决定因子为碱解氮(-0.461**),产量的土壤决定因子为速效钾(0.339**)和有机质(0.248*)。研究结果可为小粒咖啡优质高产的土壤条件筛选和肥料的减施增效提供一定的理论基础,以期增强优质咖啡种质的适宜性和目的性。 相似文献
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68.
浅论加入WTO后四川省的优质稻产业化发展 总被引:1,自引:0,他引:1
分析了入世对我国的农业生产特别是粮食产品带来的严峻挑战,结合国情、省情及水稻生产现状指出优质稻产业化是加入WTO后四川省稻业发展的基本方向。同时,还针对当前实际提出了四川省优质稻产业化生产中应注意解决的6个问题。 相似文献
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70.
迪庆高寒山区由于人才缺乏、自然环境恶劣、资源闲置、资源价值转换不力及投入不足等原因,导致乡村振兴林业建设存在许多困难.通过总结迪庆州林业建设对乡村振兴的影响方式,分析了林业生态建设对山区乡村振兴的推动机制,基于高寒山区得天独厚的自然生态条件、地方特色民族文化优势和担负的国家生态安全屏障建设任务,思考了林业生态建设对边远... 相似文献