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Cpf1是2类V型CRISPR-Cas系统的单个RNA引导的核酸内切酶,具有切割DNA的核酸酶活性。该系统由Cpf1核酸酶和CRISPR RNA(crRNA)组成,对于如何提高CRISPR/Cpf1系统的基因编辑效率主要集中在增强crRNA的稳定性、设计对PAM要求更简单的Cpf1变体或者鉴定新型Cpf1核酸内切酶。然而,其是否适用于构建双切刻系统还有待验证。因此,本研究旨在设计3种AsCpf1突变体以及成对的crRNA,进行瞬时转染,利用双荧光素酶报告基因检测评估AsCpf1双切刻系统的编辑效率;同时探究人工改造的crRNA能否提高AsCpf1双切刻系统的编辑效率;以及设计6对具有拓展PAMs序列的crRNA靶向位点,评估HkCpf1双切刻系统在哺乳动物基因组中的编辑效率。结果显示:3种AsCpf1突变体均能不同程度地提高报告基因的相对活性,并具有切割DNA单链的能力。在AsCpf1 crRNA发生突变和延伸后,它们仍然具有引导AsCpf1双切刻系统切割DNA单链的能力。HkCpf1不仅可以用做构建双切刻系统还具有较高的切割活性,并且可以识别5’-YTN和5’-TYYN PAMs序列... 相似文献
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<正>昨天有个蜂友给我讲了件事:他在1个星期前查蜂时,发现有1群蜂数减半,强群变成弱群,同时蜂群里还有已经出房的自然王台。出现这种情况,肯定发生自然分蜂飞逃,周围又没有发现分蜂团,就以为已经逃走了。接着1个星期经常下雨,蜜蜂难以出巢采集,无意中在一个斜坡的草丛中发现了分蜂团,看蜜蜂的体色可能就是那群蜂分蜂飞逃的,因为在外面停留的时间过长,底下有大量死蜂,剩下的蜂已经不多了。 相似文献
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1视诊视诊是用肉眼观察病牛的神态和所呈现的各种异常现象。视诊时,检查者先远后近,左、右、前、后,边走边看,观察病牛在自然状态下的全貌,以后有顺序地观察身体各部。如发现异常,可稍接近畜体,进一步观察。最后可令其行走、跑步等运动,观察步态。 相似文献
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试验旨在探究鸡腺苷琥珀酸裂解酶(adenylosuccinate lyase,ADSL)基因启动子区多态性及其与鸡肉冻藏新鲜度的相关性。以161只青脚麻鸡为研究对象,通过DNA混池测序法检测ADSL基因启动子区遗传变异。采用等位基因特异性PCR完成个体基因型分析,并分析了各基因型与鸡胸肌肉色、体重及胸肌冷冻60 d后新鲜度K值和pH的相关性。结果显示,在ADSL基因启动子区ATG上游1 670 bp处发现1个SNP位点(c.-1670 C>A),其AA基因型个体肌肉冷冻60 d后新鲜度K值(23.61%)极显著低于CA(33.00%)和CC(33.56%)基因型(P<0.01),即冻藏60 d后AA基因型个体肌肉较CA和CC基因型新鲜,CA和CC基因型间新鲜度K值差异不显著(P>0.05);各基因型间鸡体重、胸肌肉色及胸肌冷冻60 d后pH均无显著差异(P>0.05)。生物信息学预测发现,c.-1670 C>A导致ADSL基因启动子区转录因子结合位点的显著改变,该突变位点可能造成ADSL基因的表达差异。综上,ADSL基因启动子区c.-1670 C>A与青脚麻鸡胸肌冷冻60 d后新鲜度K值具有显著相关性,该位点可作为青脚麻鸡肉品新鲜度的候选分子遗传标记。 相似文献
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和建英 《畜牧兽医科技信息》2020,(1):174-174
青贮饲料的原料品种较为丰富,包括玉米、高粱以及豆科牧草等。青贮饲料不仅营养丰富,同时具有良好的适口性以及较高的消化率,其制作方法较为简便,有窑贮,裹包青贮,平面堆积青贮等,最为常用的是窑贮。可以不受季节以及气候的影响而长时间保存,已经成为家畜常年均衡获得青绿多汁饲料的一种有效措施。1青贮饲料的管理1.1开窖初步感官鉴定在青贮饲料开窖过程中,首先需要进行初步的感官鉴定,如果条件允许还需开展实验室检验工作,从而提高其检验级别。青贮饲料感官判定操作方法较为简便,在现场即可开展,其指标一般包括质地、颜色以及气味,级别可以分为优良、中等以及低劣。 相似文献
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