细菌耐药性的产生机理及其控制对策

随着抗菌药的广泛应用,细菌的耐药性越来越高,给临床治疗带来诸多困难,因此了解细菌耐药性的产生机理具有重要意义。抗菌药主要以细菌4个必要的细胞内途径为靶位,包括细胞壁的合成、蛋白质的合成、核酸(DNA或RNA)的合成以及细菌的代谢过程。细菌耐药性产生包括生化机理和基因机理,重要的生化机理包括抗菌药破坏酶的产生、靶位的改变和主动外排系统的出现。细菌耐药性的基因机理主要包括基因的突变和外源抗性基因的获得。近年来,喹诺酮类药物耐药性机理成为了研究的热点,并且已经证明由质粒pMG252介导的耐药性具有重要的意义。     

鸽Ⅰ型副黏病毒灭活疫苗的免疫抗体监测与分析

鸽Ⅰ型副黏病毒(PPMV-Ⅰ)病又称鸽瘟或鸽新城疫,是一种由禽Ⅰ型副黏病毒引起的、流行于鸽群的高度接触性急性传染病,它以肠炎、严重腹泻和神经症状为特征,是危害养鸽业的主要疫病之一。鸽Ⅰ型副黏病毒病目前在各种鸽群(肉鸽、信鸽和赛鸽)中普遍存在,临床发病多见于月龄以下的鸽,     

鸽新城疫灭活疫苗的研制及免疫效果研究

利用近年来分离到的鸽Ⅰ型副黏病毒ND32株进行鸽新城疫油乳剂灭活疫苗的研制,并对制备疫苗的性状、安全性、免疫效力等进行检验,结果表明制备疫苗的各项指标均符合生物制品通则的要求,对疫苗的最小免疫剂量、抗体产生及免疫持续期、与同类产品的交叉攻毒保护对比效果进行了进一步试验,结果表明疫苗的最小免疫剂量为0.15 mL/只,疫苗以0.3 mL/只免疫剂量进行一次免疫,免疫持续期为3个月,以0.3 mL/只免疫剂量进行二次免疫,免疫持续期可达6个月.交叉攻毒保护对比试验结果表明所制备的鸽新城疫灭活疫苗对鸽Ⅰ型副黏病毒ND32株和鸡新城疫病毒北京株(CVCC AV1611)的攻毒保护效果均优于鸡新城疫(La Sota株)灭活疫苗.     

单增李斯特氏菌溶血素基因的克隆及原核表达

参考GenBank收录的单增李斯特菌Hly基因序列,设计1对引物,采用PCR技术扩增出单增李斯特氏菌的溶血素基因Hly(不含有信号肽部分),得到一条1590bp的条带。将其连入pMD18-T载体,经酶切、PCR鉴定和序列测定法进行鉴定。测序正确后,将该基因插入到pET-28a中构建原核表达载体pET-28a-sHly,将重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导,将诱导产物用SDS-PAGE和Western-blot鉴定。结果显示,Hly基因可以在大肠杆菌中获得表达,表达产物分子质量约为65kU,与预期蛋白质分子质量大小一致。经Western-blotting鉴定可知,诱导表达产物以可溶形式存在,可被兔抗LM阳性血清特异识别,具有较好的抗原活性,为进一步研制基于溶解素蛋白的诊断抗原和特异性单克隆抗体,开展LM的致病与免疫机理研究奠定基础。     

H5亚型禽流感病毒多肽疫苗的初步研制

本试验利用生物软件对H5亚型禽流感病毒A/CK/GD/178/04的血凝素进行抗原特性分析,结合关于禽流感病毒血凝素抗原位点的文献报道,选定97～212位氨基酸和369～529位氨基酸两个区域作为多肽表位候选区域.利用本实验室自主研发的原核表达载体pBT载体,串联表达HA的两个区域,经SDS-PAGE和Western Blotting分析,证明重组产物得到表达,Ni2+柱纯化重组蛋白后,对2周龄SPF鸡进行免疫,经HI试验检测该重组蛋白可以刺激机体产生HI抗体.本研究为H5亚型AIV多肽疫苗的进一步研制奠定了基础.     

鸡球虫中山分离株对7种抗球虫药的药敏试验

试验比较7种离子载体类抗球虫药对鸡球虫中山野外分离株的敏感性。试验分为9组,包括拉沙洛西钠(90mg/kg)、盐霉素(60mg/kg)、马杜霉素(5mg/kg)、莫能霉素(100mg/kg)、那拉霉素(70mg/kg)、敌球素(30mg/kg)和赛杜霉素(25mg/kg)7个用药组,感染不用药及不感染不用药2个对照组。每组选用15只2周龄本地黄鸡,从感染前1d开始喂药直到试验结束(感染后7d)。攻毒剂量为6万孢子化球虫卵囊。结果为拉沙洛西钠、敌球素、莫能霉素、那拉霉素、盐霉素、赛杜霉素和马杜霉素的抗球虫指数(ACI)分别是199、186、185、146、135.3、135和125;病变记分减少率(RLS)依次是拉沙洛西钠(100%)、敌球素(100%)、莫能霉素(80%)、那拉霉素(15%)、赛杜霉素(15%)、盐霉素(10%)和马杜拉霉素(5%)。结果表明:拉沙洛西钠、敌球素和莫能霉素对鸡球虫中山分离株属于敏感药物,盐霉素、国产马杜霉素、那拉霉素和赛杜霉素对鸡球虫中山分离株均不敏感。     

细菌耐药性的产生机理及控制对策

随着抗生素的广泛应用,细菌的耐药性越来越高,给临床治疗带来诸多困难,因此了解细菌耐药的产生机理具有重要意义。本文主要对抗生素的作用机理,细菌耐药性产生的生化机理和基因机理,耐药性的控制对策进行了阐述,希望能为临床上的合理用药提供科学的依据。     

鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白原核表达载体的构建

本研究旨在构建鸡传染性支气管炎病毒(IBV)原核表达体系,制备其S1目的蛋白,为建立IBV ELISA检测方法奠定基础.以IBV QX型基因为模板,PCR扩增出S1蛋白基因,连接至pET-32a原核表达载体,获得重组质粒pET(32a)-S1,将重组质粒转入大肠杆菌BL21感受态细胞后进行IPTG诱导表达.SDS-PA...     

猪流感疫苗的研究进展和应用前景

猪流感是由正粘病毒科、流感病毒属的A型流感病毒引起的一种急性、热性、高度接触性的猪呼吸道疾病,以H3N2.H1N1和H1N2 3种血清亚型最为常见.其病原还具有重要的公共卫生意义.目前临床上防控本病的主要手段是接种疫苗.本文对猪流感全病毒灭活疫苗和各种亚单位疫苗的研究进展进行了简要阐述,旨在为研制新型猪流感疫苗提供参考.     

广州地区禽产品单核细胞增生性李斯特菌污染情况调查

单核细胞增生性李斯特菌是食品卫生上重要的病原菌.它广泛存在于自然界,可导致人和动物脑膜炎、流产、败血症等,病死率高达30％～70％,是目前人类最重要的食物源性病原菌之一[1,2].在欧美许多发达国家常发生因食品中污染该菌而导致的人员死亡事件,因此,很多国家都将单核细胞增生性李斯特菌列入食品安全重点监测对象[2,3].本调查采集广州不同地点和来源的各种禽类产品,进行了单核细胞增生性李斯特菌的分离和鉴定,分析了广州地区禽类产品中该菌的污染情况,为单核细胞增生性李斯特菌病的防制提供依据.