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为分析当前猫泛白细胞减少症病毒(FPLV)基因组遗传变异情况,对FPLV胶体金试纸条检测结果为阳性的猫粪进行病毒分离,通过血凝、分子生物学等试验对分离株进行鉴定。结果表明:病毒在CRFK细胞上盲传5代后产生明显细胞病变,电镜观察病毒粒子直径约25 nm,分离病毒的血凝效价为1∶256,将分离株命名为FPLV BJ04。基因组扩增结果显示,FPLV BJ04基因组大小为5 118 bp。决定病毒宿主范围和抗原性的VP2蛋白系统进化树分析表明,FPLV BJ04株与2017年意大利分离株KX434462株位于同一分支;分离株的VP2、NS1基因与GenBank收录的FPLV VP2、NS1基因相似性分别为99.1%~99.5%和99.0%~99.5%。动物回归试验中攻毒组猫出现临床症状和病理变化。本研究对分离的FPLV北京流行株的VP2和NS1基因进行遗传变异分析,可为更好地预防和控制FPLV提供基础。 相似文献
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克伦特罗单克隆抗体的制备及其初步鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:制备克伦特罗单克隆抗体(McAb)建立克伦特罗ELISA检测方法,为研制检测试剂盒奠定基础。方法:用偶氮化法将克伦特罗与钥孔血蓝蛋白(KLH)牛血清白蛋白(BSA)及卵清白蛋白(OVA)偶联.制备完全抗原,免疫Ballb/c小鼠,建立杂交瘤细胞株以备单抗,并对单抗特异性、交叉反应性及抗原识别位点等特性进行初步鉴定。用HRP标记CL,建立ELISA方法。结果:获得了1H5、1H7、1D6、2F10四株杂交瘤。其中1H5、1H7培养上清效价都在1:2000以上.腹水效价在1:100000以上。对沙丁胺醇交叉反应测定,最小的是1D6,只有2.32%的交叉反应性。最后建立了检测CL的固相抗体竞争ELISA方法。 相似文献
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通过序列比对和Blast分析,选定犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)VP2蛋白保守区基因为检测的目的基因,引物采用Primer Premier 5.0软件设计。利用灵敏度较高的TaqMan探针法建立CPV核酸检测方法。通过对标准品的扩增、测序及对标准扩增曲线的绘制,建立CPV核酸检测方法。同时对建立的检测方法进行了检测特异性、灵敏度和重复性分析。将阳性对照标准品进行10倍梯度稀释后可检测到102拷贝/μL样品,表明该检测体系具有较高的检测灵敏度。通过分析表明,本检测方法在用空白对照及类似的猪细小病毒、猪圆环病毒作为扩增对照时,没有发现非特异性产物的产生,表明该体系对于CPV的检测是特异的。通过6次批间重复检测,体系的变异系数小于3%,表明该检测体系具有良好的重复性。 相似文献
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